miR-1對(duì)陜北白絨山羊毛囊干細(xì)胞增殖分化的影響
發(fā)布時(shí)間:2022-02-23 23:41
陜北白絨山羊是絨肉兼用型的地方培育品種,其皮膚次級(jí)毛囊所生長(zhǎng)的毛發(fā)纖維(羊絨)因其優(yōu)良的性狀而具有極高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。miRNA是一類在大多數(shù)情況下結(jié)合在靶基因3’-UTR區(qū)引起靶基因降解或抑制mRNA翻譯,進(jìn)行轉(zhuǎn)錄后調(diào)控的非編碼小分子。研究表明多種miRNAs對(duì)毛囊周期性發(fā)育過(guò)程進(jìn)行調(diào)控,然而對(duì)于miRNAs如何調(diào)控陜北白絨山羊絨毛生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)機(jī)制尚不清楚。本課題組前期對(duì)絨山羊毛乳頭細(xì)胞和毛乳頭來(lái)源外泌體的miRNAs測(cè)序分析發(fā)現(xiàn)miR-1在外泌體中特異性表達(dá),且表達(dá)量較高。為了解析miR-1對(duì)絨山羊皮膚毛囊干細(xì)胞(HFSCs,Hair follical stem cells)生長(zhǎng)發(fā)育的影響,本研究利用相關(guān)分子生物學(xué)手段來(lái)探究miR-1在毛囊周期性發(fā)育中的作用機(jī)理。試驗(yàn)過(guò)程及具體結(jié)果如下:1.過(guò)表達(dá)miR-1后,分別利用CCK8、EdU和流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期技術(shù)來(lái)探究miR-1對(duì)陜北白絨山羊HFSCs增殖、凋亡等的調(diào)控作用。結(jié)果表明,過(guò)表達(dá)miR-1后HFSCs增殖能力顯著減弱(p<0.01),處于S期的細(xì)胞比例顯著減少(p<0.01),而處于G0-G1期的細(xì)胞比例顯著增加...
【文章來(lái)源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省211工程院校985工程院校教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:65 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 毛囊干細(xì)胞及miRNA對(duì)毛囊干細(xì)胞調(diào)控的研究進(jìn)展
1.1 毛囊的結(jié)構(gòu)和形態(tài)發(fā)育
1.2 毛囊干細(xì)胞的功能及定位
1.3 毛囊干細(xì)胞的標(biāo)記物
1.4 miRNA在毛囊發(fā)育中的作用
1.4.1 miRNA的功能
1.4.2 miRNA與毛囊發(fā)育相關(guān)的研究進(jìn)展
1.4.3 miRNA參與毛囊發(fā)育的信號(hào)通路
1.4.4 miRNA對(duì)毛囊干細(xì)胞調(diào)控的影響
1.5 miR-1 的研究進(jìn)展
1.5.1 miR-1 與細(xì)胞增殖、凋亡的相關(guān)研究
1.5.2 miR-1 與毛囊生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)的研究
1.6 研究目的與意義
第二章 miR-1 對(duì)陜北白絨山羊毛囊干細(xì)胞增殖和分化的影響
2.1 材料與方法
2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.2 實(shí)驗(yàn)耗材、試劑及儀器
2.1.3 實(shí)驗(yàn)方法
2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.2.1 過(guò)表達(dá)miR-1 對(duì)毛囊干細(xì)胞增殖的影響
2.2.2 過(guò)表達(dá)miR-1 對(duì)毛囊干細(xì)胞分化的影響
2.3 討論
2.4 小結(jié)
第三章 miR-1 的靶基因分析及驗(yàn)證
3.1 材料與方法
3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑、耗材及儀器
3.1.3 實(shí)驗(yàn)方法
3.2 結(jié)果
3.2.1 miR-1 的靶基因預(yù)測(cè)
3.2.2 陜北白絨山羊皮膚的總RNA純度及完整性鑒定
3.2.3 靶基因3’-UTR表達(dá)載體構(gòu)建
3.2.4 靶基因3’UTR及其突變表達(dá)載體的驗(yàn)證
3.2.5 雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)
3.3 討論
3.4 小結(jié)
第四章 總結(jié)
4.1 結(jié)論
4.2 創(chuàng)新點(diǎn)
4.3 還需進(jìn)一步探討的問(wèn)題
參考文獻(xiàn)
附錄
實(shí)驗(yàn)儀器
實(shí)驗(yàn)耗材
實(shí)驗(yàn)方法
縮略詞表
致謝
作者簡(jiǎn)介
本文編號(hào):3641527
【文章來(lái)源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省211工程院校985工程院校教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:65 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 毛囊干細(xì)胞及miRNA對(duì)毛囊干細(xì)胞調(diào)控的研究進(jìn)展
1.1 毛囊的結(jié)構(gòu)和形態(tài)發(fā)育
1.2 毛囊干細(xì)胞的功能及定位
1.3 毛囊干細(xì)胞的標(biāo)記物
1.4 miRNA在毛囊發(fā)育中的作用
1.4.1 miRNA的功能
1.4.2 miRNA與毛囊發(fā)育相關(guān)的研究進(jìn)展
1.4.3 miRNA參與毛囊發(fā)育的信號(hào)通路
1.4.4 miRNA對(duì)毛囊干細(xì)胞調(diào)控的影響
1.5 miR-1 的研究進(jìn)展
1.5.1 miR-1 與細(xì)胞增殖、凋亡的相關(guān)研究
1.5.2 miR-1 與毛囊生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)的研究
1.6 研究目的與意義
第二章 miR-1 對(duì)陜北白絨山羊毛囊干細(xì)胞增殖和分化的影響
2.1 材料與方法
2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.2 實(shí)驗(yàn)耗材、試劑及儀器
2.1.3 實(shí)驗(yàn)方法
2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.2.1 過(guò)表達(dá)miR-1 對(duì)毛囊干細(xì)胞增殖的影響
2.2.2 過(guò)表達(dá)miR-1 對(duì)毛囊干細(xì)胞分化的影響
2.3 討論
2.4 小結(jié)
第三章 miR-1 的靶基因分析及驗(yàn)證
3.1 材料與方法
3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑、耗材及儀器
3.1.3 實(shí)驗(yàn)方法
3.2 結(jié)果
3.2.1 miR-1 的靶基因預(yù)測(cè)
3.2.2 陜北白絨山羊皮膚的總RNA純度及完整性鑒定
3.2.3 靶基因3’-UTR表達(dá)載體構(gòu)建
3.2.4 靶基因3’UTR及其突變表達(dá)載體的驗(yàn)證
3.2.5 雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)
3.3 討論
3.4 小結(jié)
第四章 總結(jié)
4.1 結(jié)論
4.2 創(chuàng)新點(diǎn)
4.3 還需進(jìn)一步探討的問(wèn)題
參考文獻(xiàn)
附錄
實(shí)驗(yàn)儀器
實(shí)驗(yàn)耗材
實(shí)驗(yàn)方法
縮略詞表
致謝
作者簡(jiǎn)介
本文編號(hào):3641527
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