陜北白絨山羊是絨肉兼用型的地方培育品種,其皮膚次級毛囊所生長的毛發(fā)纖維（羊絨）因其優(yōu)良的性狀而具有極高的經(jīng)濟(jì)價值。miRNA是一類在大多數(shù)情況下結(jié)合在靶基因3’-UTR區(qū)引起靶基因降解或抑制mRNA翻譯,進(jìn)行轉(zhuǎn)錄后調(diào)控的非編碼小分子。研究表明多種miRNAs對毛囊周期性發(fā)育過程進(jìn)行調(diào)控,然而對于miRNAs如何調(diào)控陜北白絨山羊絨毛生長發(fā)育相關(guān)機(jī)制尚不清楚。本課題組前期對絨山羊毛乳頭細(xì)胞和毛乳頭來源外泌體的miRNAs測序分析發(fā)現(xiàn)miR-1在外泌體中特異性表達(dá),且表達(dá)量較高。為了解析miR-1對絨山羊皮膚毛囊干細(xì)胞（HFSCs,Hair follical stem cells）生長發(fā)育的影響,本研究利用相關(guān)分子生物學(xué)手段來探究miR-1在毛囊周期性發(fā)育中的作用機(jī)理。試驗過程及具體結(jié)果如下:1.過表達(dá)miR-1后,分別利用CCK8、EdU和流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期技術(shù)來探究miR-1對陜北白絨山羊HFSCs增殖、凋亡等的調(diào)控作用。結(jié)果表明,過表達(dá)miR-1后HFSCs增殖能力顯著減弱（p<0.01）,處于S期的細(xì)胞比例顯著減少（p<0.01）,而處于G0-G1期的細(xì)胞比例顯著增加... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省211工程院校985工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 毛囊干細(xì)胞及miRNA對毛囊干細(xì)胞調(diào)控的研究進(jìn)展
    1.1 毛囊的結(jié)構(gòu)和形態(tài)發(fā)育
    1.2 毛囊干細(xì)胞的功能及定位
    1.3 毛囊干細(xì)胞的標(biāo)記物
    1.4 miRNA在毛囊發(fā)育中的作用
        1.4.1 miRNA的功能
        1.4.2 miRNA與毛囊發(fā)育相關(guān)的研究進(jìn)展
        1.4.3 miRNA參與毛囊發(fā)育的信號通路
        1.4.4 miRNA對毛囊干細(xì)胞調(diào)控的影響
    1.5 miR-1 的研究進(jìn)展
        1.5.1 miR-1 與細(xì)胞增殖、凋亡的相關(guān)研究
        1.5.2 miR-1 與毛囊生長發(fā)育相關(guān)的研究
    1.6 研究目的與意義
第二章 miR-1 對陜北白絨山羊毛囊干細(xì)胞增殖和分化的影響
    2.1 材料與方法
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 實驗耗材、試劑及儀器
        2.1.3 實驗方法
    2.2 實驗結(jié)果
        2.2.1 過表達(dá)miR-1 對毛囊干細(xì)胞增殖的影響
        2.2.2 過表達(dá)miR-1 對毛囊干細(xì)胞分化的影響
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
第三章 miR-1 的靶基因分析及驗證
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實驗材料
        3.1.2 實驗試劑、耗材及儀器
        3.1.3 實驗方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 miR-1 的靶基因預(yù)測
        3.2.2 陜北白絨山羊皮膚的總RNA純度及完整性鑒定
        3.2.3 靶基因3’-UTR表達(dá)載體構(gòu)建
        3.2.4 靶基因3’UTR及其突變表達(dá)載體的驗證
        3.2.5 雙熒光素酶報告基因檢測
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
第四章 總結(jié)
    4.1 結(jié)論
    4.2 創(chuàng)新點
    4.3 還需進(jìn)一步探討的問題
參考文獻(xiàn)
附錄
    實驗儀器
    實驗耗材
    實驗方法
縮略詞表
致謝
作者簡介



本文編號：3641527