豬鏈球菌（Streptococcus suis, SS）是豬的重要病原菌,同時(shí)也是一種重要的人畜共患病病原。根據(jù)莢膜多糖抗原的不同,SS可分為33個(gè)血清型,其中豬鏈球菌2型（SS2）分布最廣,毒力最強(qiáng)。此外,流行病學(xué)調(diào)查表明,豬鏈球菌9型（SS9）也是一個(gè)重要致病血清型,與斷奶仔豬腦膜炎、敗血癥和肺炎的爆發(fā)相關(guān)。通過分析SS2腦膜炎株SC070731病原特性和研究SS9腦膜炎株5’核苷酸酶（NT）抑制宿主免疫系統(tǒng)及其對(duì)毒力影響,為進(jìn)一步了解豬鏈球菌致病機(jī)制提供依據(jù)。1.SS2腦膜炎株SC070731的病原特性本課題組前期分離一株SS2腦膜炎株SC070731,并對(duì)其進(jìn)行全基因組測(cè)序,發(fā)現(xiàn)該菌株存在96.7%（57/59）的毒力因子,且與其它SS2相比含有一特有105 K基因島。通過斑馬魚模型毒力評(píng)價(jià)、生長曲線、溶血試驗(yàn)及青霉素藥敏試驗(yàn)等進(jìn)一步了解該菌株病原特性。結(jié)果顯示：SC070731對(duì)斑馬魚LD5o是4.95×105CFU/尾,與SS2強(qiáng)毒株HA9801和ZY05719相近,但是顯著強(qiáng)于SS2毒力株P(guān)1/7（P<0.05）；其復(fù)制一代所需時(shí)間為48 min,與HA9801、Z... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省211工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮寫詞表
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 豬鏈球菌毒力因子的研究進(jìn)展
        1 豬鏈球菌病概述
        2 豬鏈球菌的毒力因子概述
            2.1 豬鏈球菌的毒力因子的鑒定
            2.2 豬鏈球菌毒力因子的致病機(jī)理
        參考文獻(xiàn)
    第二章 胞外核苷酸酶的研究進(jìn)展
        1 胞外核苷酸酶的主要功能
        2 胞外核苷酸酶的分類
            2.1 胞外三磷酸核苷酸酶
            2.2 胞外焦磷酸核苷酸酶
            2.3 堿性磷酸酶
            2.4 胞外5'-核苷酸酶
        參考文獻(xiàn)
第二篇 試驗(yàn)研究
    第三章 豬鏈球菌腦膜炎株SC070731的病原特性
        1 材料與方法
            1.1 菌株及培養(yǎng)條件
            1.2 測(cè)定各菌株的生長曲線
            1.3 溶血試驗(yàn)
            1.4 斑馬魚試驗(yàn)
            1.5 青霉素藥敏試驗(yàn)
        2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            2.1 生長曲線比較
            2.2 溶血特性比較
            2.3 斑馬魚毒力比較
            2.4 青霉素藥敏試驗(yàn)
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
    第四章 豬鏈球菌腦膜炎株5'核苷酸酶基因缺失株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性
        1 材料與方法
            1.1 菌株和質(zhì)粒
            1.2 試劑與儀器
            1.3 缺失株的構(gòu)建與鑒定
            1.4 互補(bǔ)株的構(gòu)建與鑒定
            1.5 生長特性分析
            1.6 5'核苷酸酶活性
            1.7 5'核苷酸酶的克隆表達(dá)
            1.8 5'核苷酸酶的細(xì)胞定位
        2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            2.1 缺失載體的構(gòu)建與鑒定
            2.2 缺失株的篩選
            2.3 互補(bǔ)載體的構(gòu)建與鑒定
            2.4 互補(bǔ)株的篩選
            2.5 生長特性分析
            2.6 5'核苷酸酶活性的鑒定
            2.7 表達(dá)載體的鑒定
            2.8 重組蛋白的表達(dá)及純化
            2.9 重組蛋白的免疫原性檢測(cè)
            2.10 兔抗5’核苷酸酶多克隆抗體制備
            2.11 Western blot檢測(cè)5’核苷酸酶細(xì)胞定位
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
    第五章 豬鏈球菌腦膜炎株5'核苷酸酶的分子致病機(jī)制
        1 材料與方法
            1.1 菌株、試劑和儀器
            1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            1.3 豬全血存活試驗(yàn)
            1.4 小鼠臟器分布試驗(yàn)
            1.5 斑馬魚毒力試驗(yàn)
            1.6 小鼠轉(zhuǎn)錄組分析
        2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            2.1 5'核苷酸酶促進(jìn)豬鏈球菌在豬全血中的存活
            2.2 小鼠模型評(píng)價(jià)5'核苷酸酶缺失株毒力
            2.3 斑馬魚模型評(píng)價(jià)5'核苷酸酶缺失株毒力
            2.4 小鼠白細(xì)胞體內(nèi)轉(zhuǎn)錄組揭示5'核苷酸酶分子致病機(jī)制
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
致謝
碩士期間發(fā)表及待發(fā)表論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]用斑馬魚檢測(cè)豬鏈球菌2型的致病力[J]. 濮俊毅,黃新新,陸承平.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2007(11)
[2]豬鏈球菌2型纖連蛋白/血纖蛋白原結(jié)合蛋白全基因的克隆及融合表達(dá)[J]. 孫理云,范紅結(jié),陸承平.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2005(06)



本文編號(hào)：3641143