仔豬病毒性腹瀉是豬場常發(fā)且危害嚴(yán)重的一類傳染病,主要表現(xiàn)為腸炎或敗血癥,是新生仔豬死亡的主要病因之一,給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。引起仔豬腹瀉常見的病毒有TGEV、PEDV和RV,其中TGEV和PEDV同屬Ⅰ群冠狀病毒。TGEV受體為豬氨肽酶,Bestatin可以抑制豬氨肽酶的活性。目前尚無有效預(yù)防以上兩種疾病的商品化藥物。已知多種益生菌可以抑制細(xì)菌性腹瀉,部分益生菌具有抗病毒作用。益生菌具有安全性高、可增加營養(yǎng)物質(zhì)吸收和提高機(jī)體免疫力等優(yōu)點。益生菌在抗病毒過程中多種成分發(fā)揮作用,有研究表明部分益生菌的S-層蛋白可以與病毒受體結(jié)合,阻礙病毒對細(xì)胞的感染。本研究旨在篩選出可抑制TGEV和PEDV的益生菌株。研究其S-層蛋白對TGEV在ST細(xì)胞上增殖的影響,初步探究其S-層蛋白與TGEV受體豬氨肽酶之間的作用,以此探討益生菌抗病毒的機(jī)制。為進(jìn)一步研究益生菌抗病毒機(jī)制和研發(fā)抗病毒益生菌制劑奠定理論基礎(chǔ)。本研究從實驗室自篩益生菌株中篩選出具有抗TGEV和抗PEDV特性的益生菌株,選擇其中具有S-層蛋白的益生菌菌株作為實驗菌株。以病毒受體已確定的TGEV為研究的病毒,以細(xì)胞表面含有豬氨肽酶的ST... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省211工程院校

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
CONTENTS
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 益生菌的概況
        1.1.1 益生菌定義
        1.1.2 益生菌菌株的選擇標(biāo)準(zhǔn)
        1.1.3 益生菌抑制腹瀉機(jī)制
    1.2 益生菌抗病毒研究進(jìn)展
        1.2.1 具有抗病毒功效的益生菌菌株
        1.2.2 篩選抗病毒功效的益生菌菌株的方法
        1.2.3 益生菌抗病毒中起作用的主要成分
    1.3 引起仔豬腹瀉的常見病毒
        1.3.1 常見引起腹瀉的冠狀病毒概述
        1.3.2 冠狀病毒受體研究進(jìn)展
    1.4 研究目的與意義
2 材料和方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 毒株、菌株和細(xì)胞
        2.1.2 主要材料與試劑
        2.1.3 主要儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 抗病毒菌株篩選
        2.2.2 S-層蛋白、代謝產(chǎn)物、牛血清白蛋白和代謝產(chǎn)物對TGEV在ST細(xì)胞增殖的抑制
        2.2.3 各成分對TGEV吸附和入侵ST細(xì)胞的影響
        2.2.4 Bestatin與不同成分組合預(yù)處理ST細(xì)胞對TGEV的抑制
        2.2.5 檢測指標(biāo)及方法
        2.2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
3 結(jié)果
    3.1 抗病毒菌株的篩選
        3.1.1 病毒感染細(xì)胞
        3.1.2 病毒在細(xì)胞的增殖及RT-PCR檢測結(jié)果
        3.1.3 病毒滴度測定
        3.1.4 MTT法篩選菌株
        3.1.5 S-層蛋白基因的鑒定
        3.1.6 S-層蛋白SDS-PAGE的檢測
        3.1.7 篩選結(jié)果
        3.1.8 食淀粉乳桿菌生長曲線的測定
        3.1.9 S-層蛋白、牛血清白蛋白、代謝產(chǎn)物和Bestatin細(xì)胞毒性結(jié)果
    3.2 食淀粉乳桿菌S-層蛋白對TGEV在ST細(xì)胞增殖影響
        3.2.1 不同濃度S-層蛋白、牛血清白蛋白、代謝產(chǎn)物和Bestatin對TGEV的抑制
        3.2.2 各成分不同添加時序?qū)GEV在ST細(xì)胞增殖的影響
        3.2.3 食淀粉乳桿菌S-層蛋白和代謝產(chǎn)物對TGEV滴度的影響
        3.2.4 各成分對TGEV吸附和侵入ST細(xì)胞的影響
    3.3 Bestatin與不同成分組合預(yù)處理ST細(xì)胞對TGEV增殖的影響
4 討論
    4.1 食淀粉乳桿菌S-層蛋白具有抗TGEV作用
    4.2 食淀粉乳桿菌S-層蛋白可干擾TGEV吸附ST細(xì)胞
    4.3 Bestatin和食淀粉乳桿菌S-層蛋白組合可增強(qiáng)對細(xì)胞保護(hù)
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3634641