為了建立快速可視化檢測綿羊生長分化因子9基因（Growth differentiation factor 9,GDF9）G1突變的方法,針對(duì)綿羊GDF9基因G1突變?cè)O(shè)計(jì)擴(kuò)增阻滯突變系統(tǒng)（Amplification refractory mutation system,ARMS）特異性引物,并在其下游引物3′端的第2—4位堿基處設(shè)計(jì)額外的錯(cuò)配以篩選特異性最佳的引物對(duì),將改良的ARMS與核酸染料SYBR GreenⅠ結(jié)合,可視化檢測GDF9基因G1突變。結(jié)果顯示,改良的ARMS特異性引物能夠區(qū)分突變型和野生型,通過整合改良的ARMS與SYBR GreenⅠ可視化檢測G1突變,發(fā)現(xiàn)已知突變型樣本顯示亮綠色,而已知野生型樣本顯示橙黃色,兩者顏色變化明顯。采用建立的可視化檢測綿羊GDF9基因G1突變的方法檢測25個(gè)小尾寒羊樣本,結(jié)果表明,該方法能夠準(zhǔn)確區(qū)分綿羊GDF9基因G1突變的野生型和突變型,其檢測結(jié)果與測序結(jié)果相符,準(zhǔn)確度高達(dá)100%�？梢�,建立的可視化檢測方法可用于檢測綿羊GDF9基因G1突變。 

【文章來源】：河南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2020,49(08)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 試驗(yàn)材料
        1.1.1 供試樣本
        1.1.2 主要試劑
    1.2 試驗(yàn)方法
        1.2.1 DNA提取
        1.2.2 引物設(shè)計(jì)
        1.2.3 ARMS PCR及最佳引物對(duì)的篩選
        1.2.4 ARMS和SYBR Green
        1.2.5 可視化檢測系統(tǒng)的準(zhǔn)確度檢測
2 結(jié)果與分析
    2.1 GDF9基因G1突變可視化檢測最佳引物對(duì)的篩選
    2.2 GDF9基因G1突變可視化檢測結(jié)果
    2.3 GDF9基因G1突變可視化檢測系統(tǒng)的準(zhǔn)確度
3 結(jié)論與討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]7種綿羊和4種山羊GDF9基因G1突變檢測[J]. 古麗格娜,艾買提·買買提,於建國,郝耿,楊會(huì)國,儲(chǔ)明星,買買提明,郭曉飛,潘章源,狄冉,劉秋月.  中國草食動(dòng)物科學(xué). 2015(04)
[2]利用AIMs分析亞洲9個(gè)綿羊群體的群體結(jié)構(gòu)[J]. 張媛媛,韓德平,鄧衛(wèi)東,毛華明,鄧學(xué)工,鄧學(xué)梅.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2015(07)
[3]山羊生長分化因子9基因外顯子2的PCR-SSCP分析[J]. 吳澤輝,儲(chǔ)明星,李學(xué)偉,方麗,葉素成,劉忠慧,陳國宏.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2006(04)



本文編號(hào)：3633072