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旋毛蟲感染早期引發(fā)小鼠免疫調(diào)控機(jī)制的研究

發(fā)布時間:2022-02-18 13:31
  旋毛蟲在感染早期即可引發(fā)BALB/c鼠免疫應(yīng)答,啟動免疫調(diào)控機(jī)制,但多數(shù)研究停留在感染中期或晚期,對感染早期的現(xiàn)象及潛在機(jī)制的研究仍不夠深入。為了探究旋毛蟲感染早期如何誘導(dǎo)腸道病理變化及免疫調(diào)節(jié)標(biāo)識性細(xì)胞因子表達(dá)情況,通過顯微鏡下雌雄蟲鑒別方法,純化蟲體并計數(shù),不同劑量肌幼蟲攻蟲感染計算旋毛蟲繁殖力指數(shù)。通過蘇木素伊紅染色方法觀察旋毛蟲感染BALB/c鼠早期腸道病理變化,采用電化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測感染早期腸系膜淋巴結(jié)及脾臟標(biāo)識性細(xì)胞因子表達(dá)情況,流式細(xì)胞術(shù)檢測旋毛蟲感染早期與宿主免疫系統(tǒng)互作相關(guān)免疫細(xì)胞調(diào)節(jié)情況。旋毛蟲繁殖力指數(shù)結(jié)果顯示,隨機(jī)250條肌幼蟲感染時繁殖力穩(wěn)定,確定為本實驗最適攻蟲感染劑量。腸道蘇木素伊紅染色結(jié)果顯示,腸粘膜增厚,嗜酸性粒細(xì)胞浸潤,數(shù)量明顯增多。MSD結(jié)果顯示,脾臟在感染后3 d Th1型免疫細(xì)胞標(biāo)識性細(xì)胞因子IL-2、IFN-γ表達(dá)顯著升高,感染后6 d表達(dá)呈下降趨勢;Th2型免疫細(xì)胞標(biāo)識性細(xì)胞因子IL-4、IL-10在感染后3 d及6 d表達(dá)顯著升高;腸系膜淋巴結(jié)在感染后6 d IL-4表達(dá)顯著升高。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示,感染后30 h CD4... 

【文章來源】:內(nèi)蒙古民族大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】:46 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略語表
1 引言
    1.1 旋毛蟲生活史及流行概況
    1.2 旋毛蟲病診斷現(xiàn)狀
    1.3 旋毛蟲抗原遞呈與宿主免疫應(yīng)答
    1.4 免疫細(xì)胞增殖與分化
    1.5 細(xì)胞免疫與體液免疫
    1.6 旋毛蟲免疫抑制現(xiàn)象的產(chǎn)生
    1.7 旋毛蟲免疫抑制機(jī)制
        1.7.1 直接毒性機(jī)制
        1.7.2 間接免疫調(diào)節(jié)機(jī)制
    1.8 旋毛蟲免疫抑制機(jī)制與相關(guān)疾病
2 實驗材料
    2.1 蟲株來源
    2.2 實驗動物
    2.3 實驗分組
    2.4 主要試劑
    2.5 主要儀器及耗材
    2.6 主要試劑配制
3 實驗方法
    3.1 消化法收集旋毛蟲ML
    3.2 旋毛蟲ML雌雄鑒定
    3.3 旋毛蟲ML不同數(shù)量感染BALB/c鼠RCI統(tǒng)計
    3.4 旋毛蟲ML攻蟲感染
    3.5 蘇木素伊紅染色組織切片觀察
        3.5.1 實驗樣本采集
        3.5.2 組織包埋及切片
        3.5.3 組織切片染色及封片
    3.6 電化學(xué)發(fā)光技術(shù)檢測細(xì)胞因子表達(dá)
        3.6.1 實驗樣本采集
        3.6.2 電化學(xué)發(fā)光檢測方法
        3.6.3 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析
    3.7 流式細(xì)胞術(shù)檢測免疫細(xì)胞調(diào)節(jié)水平
        3.7.1 實驗樣本采集
        3.7.2 細(xì)胞表面染色
        3.7.3 胞內(nèi)染色
        3.7.4 細(xì)胞洗滌
        3.7.5 重懸細(xì)胞及上機(jī)檢測
        3.7.6 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析
4 實驗結(jié)果
    4.1 RCI統(tǒng)計結(jié)果
    4.2 蘇木素伊紅染色結(jié)果
    4.3 電化學(xué)發(fā)光技術(shù)檢測結(jié)果
        4.3.1 腸系膜淋巴結(jié)細(xì)胞因子表達(dá)情況
        4.3.2 脾臟細(xì)胞因子表達(dá)情況
    4.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果
        4.4.1 T淋巴細(xì)胞檢測結(jié)果
        4.4.2 IFN-γ檢測結(jié)果
        4.4.3 IL-17檢測結(jié)果
        4.4.4 Foxp3+檢測結(jié)果
        4.4.5 IL-4檢測結(jié)果
5 討論
6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]豬旋毛蟲病的流行、檢疫及防治措施[J]. 景旭昌.  飼料博覽. 2018(01)
[2]旋毛蟲肌幼蟲排泄分泌物激活的巨噬細(xì)胞和成肌細(xì)胞共培養(yǎng)對成肌細(xì)胞分化的影響[J]. 王艷鳳,王楠,丁靜,孫堯,劉曉雷,王學(xué)林,劉明遠(yuǎn),白雪.  中國人獸共患病學(xué)報. 2014(09)
[3]1964-2011年中國大陸人體旋毛蟲病流行分析[J]. 鄭德福,肖寧,馮萍,許光榮,歐陽清,廖琳,葉萍,陳漪瀾.  寄生蟲病與感染性疾病. 2011(03)
[4]小鼠實驗感染不同種旋毛蟲后血清IgG抗體水平的變化[J]. 王潔,崔晶,王中全.  中國病原生物學(xué)雜志. 2007(04)
[5]全國人體重要寄生蟲病現(xiàn)狀調(diào)查報告[J]. 許隆祺,陳穎丹,孫鳳華,蔡黎,方悅怡,王麗萍,劉新,李莉莎,馮宇,李輝.  中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2005(S1)
[6]感染旋毛蟲大鼠免疫功能的動態(tài)觀察[J]. 邢杰,李鵬,閻玉文.  中國寄生蟲病防治雜志. 2005(01)



本文編號:3630925

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