4株NDV流行株的全基因測序分析及鴨源NDV HN蛋白的原核表達(dá)
發(fā)布時(shí)間:2022-02-17 16:30
新城疫(Newcastle disease,ND)是由新城疫病毒引起的能夠感染多種禽類的一種急性、高度傳染性疫病,是危害世界養(yǎng)禽業(yè)的重要傳染病之一,給許多國家的養(yǎng)禽業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。NDV對(duì)多種禽類都具有致病性,除家禽外,至少250種鳥類可自然或?qū)嶒?yàn)感染NDV;颌餍蚇DV是我國當(dāng)前流行最廣的毒株。為研究近年來NDV的遺傳進(jìn)化趨勢(shì),本文通過克隆測序測定了兩株基因Ⅶ型雞源新城疫分離株Chicken/China/SD04/2011和Chicken/China/SDWF07/2011及兩株基因Ⅵ型鴿源新城疫分離株P(guān)igeon/China/SDLC/2011和Pigeon/China/SDS/2011的全基因序列。4株病毒與中國標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒F48E8、國外標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒Herts/33及疫苗株chicken/N.Ireland/Ulster/67、B1、Clone30、LaSota、Mukteswar核苷酸序列同源性在80%87%之間;其F蛋白前體F0裂解位點(diǎn)附近的氨基酸序列均為112RRQKRF117,符合NDV強(qiáng)毒株的特征;兩株雞源病毒屬于基因Ⅶd亞型變異株;兩株鴿源毒株...
【文章來源】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省
【文章頁數(shù)】:69 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
符號(hào)說明
中文摘要
Abstract
1 前言
1.1 NDV 一般生物學(xué)特性
1.1.1 NDV 的分類地位與形態(tài)
1.1.2 NDV 的理化特性
1.1.3 NDV 的培養(yǎng)特性
1.1.4 NDV 的生物學(xué)活性
1.1.5 NDV 的血清型
1.1.6 NDV 的毒力與致病性
1.1.7 NDV 的毒株分類
1.2 NDV 的基因組結(jié)構(gòu)
1.3 NDV 各個(gè)基因結(jié)構(gòu)蛋白的分子生物學(xué)研究
1.3.1 F 蛋白分子生物學(xué)研究
1.3.2 HN 蛋白的分子生物學(xué)研究
1.3.3 M 蛋白的分子生物學(xué)研究
1.3.4 NP 蛋白、P 蛋白和 L 蛋白及其分子生物學(xué)研究
1.4 NDV 的分子流行病學(xué)
2 材料與方法
2.1 試驗(yàn)材料
2.1.1 毒株、單抗和載體
2.1.2 主要試驗(yàn)試劑與耗材
2.1.3 主要試驗(yàn)設(shè)備和儀器
2.2 方法
2.2.1 4 株新城疫病毒的全基因測序
2.2.2 抗原變異分析
2.2.3 鴿源分離株的人工感染試驗(yàn)
2.2.4 鴨新城疫 HN 蛋白原核表達(dá)載體構(gòu)建和表達(dá)
3 結(jié)果
3.1 4 株新城疫病毒的全基因測序
3.1.1 生物學(xué)特性測定
3.1.2 全基因組分析
3.1.3 同源性及遺傳進(jìn)化分析
3.2 抗原變異分析
3.2.1 抗原變異分析反應(yīng)性
3.2.2 HN 蛋白抗原線性位點(diǎn)氨基酸位點(diǎn)變異分析
3.3 鴿源 NDV 的人工感染試驗(yàn)
3.4 鴨 NDV HN 蛋白原核表達(dá)
3.4.1 HN 基因 RT-PCR 擴(kuò)增結(jié)果
3.4.2 HN 基因表達(dá)載體的構(gòu)建與鑒定
3.4.3 表達(dá)產(chǎn)物的 SDS-PAGE 電泳分析
3.4.4 HN 蛋白的純化及 Western blotting 分析結(jié)果
4 討論
4.1 4 株新城疫病毒的全基因測序
4.2 抗原變異分析
4.3 鴿源新城疫的人工感染試驗(yàn)
4.4 鴨 NDV HN 蛋白的原核表達(dá)
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡介及發(fā)表論文情況
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]免疫鴿群中2株新城疫病毒的分離鑒定及遺傳進(jìn)化分析[J]. 朱杰,趙晴晴,陳廣仁,宋慶慶,胡順林,王曉泉,李群輝,劉秀梵. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2012(10)
[2]新城疫LaSota活疫苗對(duì)基因Ⅶ型分離株的免疫保護(hù)性試驗(yàn)[J]. 胡北俠,楊少華,許傳田,張琳,黃艷艷,張秀美. 廣東畜牧獸醫(yī)科技. 2012(03)
[3]三株新城疫病毒強(qiáng)毒株的生物學(xué)特性及全基因組序列分析[J]. 楊少華,胡北俠,許傳田,顏世敢,張琳,黃艷艷,張秀美. 病毒學(xué)報(bào). 2012(02)
[4]新城疫病毒的進(jìn)化及其新型疫苗的研制[J]. 劉秀梵,胡順林. 中國獸藥雜志. 2010(01)
[5]2008年江蘇地區(qū)基因Ⅶd亞型新城疫病毒遺傳變異分析[J]. 吳雙,黃偉平,王偉偉,胡順林,王曉泉,劉秀梵. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2009(12)
[6]中國水禽新城疫病毒F和HN基因的變異趨勢(shì)[J]. 徐懷英,秦卓明,王友令,歐陽文軍,譚雷濤,何葉峰,金維江,袁小遠(yuǎn). 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2009(03)
[7]3株單抗對(duì)新城疫病毒HN抗原變異的分析[J]. 胡北俠,黃艷艷,張秀美,何葉峰,秦卓明,黃慶華. 中國獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2008(11)
[8]一株信鴿新城疫強(qiáng)毒的分離鑒定和分子特性分析[J]. 袁小遠(yuǎn),王友令,徐懷英,歐陽文軍,賈強(qiáng),何葉峰,秦卓明. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2007(06)
[9]雞新城疫強(qiáng)毒分離株SC01的分子特性及與La Sota和F48E8的交叉保護(hù)[J]. 湯承,岳華,吳宣,楊澤林,傅安靜. 西南民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2006(04)
[10]番鴨副粘病毒1型的分離鑒定[J]. 黃瑜,李文楊,程龍飛,施少華,彭春香,傅光華. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2005(02)
本文編號(hào):3629739
【文章來源】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省
【文章頁數(shù)】:69 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
符號(hào)說明
中文摘要
Abstract
1 前言
1.1 NDV 一般生物學(xué)特性
1.1.1 NDV 的分類地位與形態(tài)
1.1.2 NDV 的理化特性
1.1.3 NDV 的培養(yǎng)特性
1.1.4 NDV 的生物學(xué)活性
1.1.5 NDV 的血清型
1.1.6 NDV 的毒力與致病性
1.1.7 NDV 的毒株分類
1.2 NDV 的基因組結(jié)構(gòu)
1.3 NDV 各個(gè)基因結(jié)構(gòu)蛋白的分子生物學(xué)研究
1.3.1 F 蛋白分子生物學(xué)研究
1.3.2 HN 蛋白的分子生物學(xué)研究
1.3.3 M 蛋白的分子生物學(xué)研究
1.3.4 NP 蛋白、P 蛋白和 L 蛋白及其分子生物學(xué)研究
1.4 NDV 的分子流行病學(xué)
2 材料與方法
2.1 試驗(yàn)材料
2.1.1 毒株、單抗和載體
2.1.2 主要試驗(yàn)試劑與耗材
2.1.3 主要試驗(yàn)設(shè)備和儀器
2.2 方法
2.2.1 4 株新城疫病毒的全基因測序
2.2.2 抗原變異分析
2.2.3 鴿源分離株的人工感染試驗(yàn)
2.2.4 鴨新城疫 HN 蛋白原核表達(dá)載體構(gòu)建和表達(dá)
3 結(jié)果
3.1 4 株新城疫病毒的全基因測序
3.1.1 生物學(xué)特性測定
3.1.2 全基因組分析
3.1.3 同源性及遺傳進(jìn)化分析
3.2 抗原變異分析
3.2.1 抗原變異分析反應(yīng)性
3.2.2 HN 蛋白抗原線性位點(diǎn)氨基酸位點(diǎn)變異分析
3.3 鴿源 NDV 的人工感染試驗(yàn)
3.4 鴨 NDV HN 蛋白原核表達(dá)
3.4.1 HN 基因 RT-PCR 擴(kuò)增結(jié)果
3.4.2 HN 基因表達(dá)載體的構(gòu)建與鑒定
3.4.3 表達(dá)產(chǎn)物的 SDS-PAGE 電泳分析
3.4.4 HN 蛋白的純化及 Western blotting 分析結(jié)果
4 討論
4.1 4 株新城疫病毒的全基因測序
4.2 抗原變異分析
4.3 鴿源新城疫的人工感染試驗(yàn)
4.4 鴨 NDV HN 蛋白的原核表達(dá)
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡介及發(fā)表論文情況
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]免疫鴿群中2株新城疫病毒的分離鑒定及遺傳進(jìn)化分析[J]. 朱杰,趙晴晴,陳廣仁,宋慶慶,胡順林,王曉泉,李群輝,劉秀梵. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2012(10)
[2]新城疫LaSota活疫苗對(duì)基因Ⅶ型分離株的免疫保護(hù)性試驗(yàn)[J]. 胡北俠,楊少華,許傳田,張琳,黃艷艷,張秀美. 廣東畜牧獸醫(yī)科技. 2012(03)
[3]三株新城疫病毒強(qiáng)毒株的生物學(xué)特性及全基因組序列分析[J]. 楊少華,胡北俠,許傳田,顏世敢,張琳,黃艷艷,張秀美. 病毒學(xué)報(bào). 2012(02)
[4]新城疫病毒的進(jìn)化及其新型疫苗的研制[J]. 劉秀梵,胡順林. 中國獸藥雜志. 2010(01)
[5]2008年江蘇地區(qū)基因Ⅶd亞型新城疫病毒遺傳變異分析[J]. 吳雙,黃偉平,王偉偉,胡順林,王曉泉,劉秀梵. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2009(12)
[6]中國水禽新城疫病毒F和HN基因的變異趨勢(shì)[J]. 徐懷英,秦卓明,王友令,歐陽文軍,譚雷濤,何葉峰,金維江,袁小遠(yuǎn). 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2009(03)
[7]3株單抗對(duì)新城疫病毒HN抗原變異的分析[J]. 胡北俠,黃艷艷,張秀美,何葉峰,秦卓明,黃慶華. 中國獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2008(11)
[8]一株信鴿新城疫強(qiáng)毒的分離鑒定和分子特性分析[J]. 袁小遠(yuǎn),王友令,徐懷英,歐陽文軍,賈強(qiáng),何葉峰,秦卓明. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2007(06)
[9]雞新城疫強(qiáng)毒分離株SC01的分子特性及與La Sota和F48E8的交叉保護(hù)[J]. 湯承,岳華,吳宣,楊澤林,傅安靜. 西南民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2006(04)
[10]番鴨副粘病毒1型的分離鑒定[J]. 黃瑜,李文楊,程龍飛,施少華,彭春香,傅光華. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2005(02)
本文編號(hào):3629739
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