斷奶仔豬腹瀉是影響?zhàn)B豬業(yè)發(fā)展的重要疾病,現(xiàn)如今已經(jīng)成為全球范圍內(nèi)養(yǎng)豬產(chǎn)業(yè)的重要難題之一。由于其發(fā)病率高而且危害嚴(yán)重,給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌（Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC）則是造成斷奶仔豬腹瀉的重要病原體,流行病學(xué)調(diào)查顯示,F4⁺ETEC占據(jù)優(yōu)勢(shì)地位。研究表明,斷奶仔豬腹瀉發(fā)生時(shí),仔豬腸道出現(xiàn)明顯的氧化應(yīng)激,已有報(bào)道顯示乳酸菌可以緩解氧化應(yīng)激,但作用機(jī)制尚未完全明確。從抗氧化損傷的角度探討提高防控?cái)嗄套胸i腹瀉的效果有望成為一個(gè)新的途徑。所以本試驗(yàn)在篩選抗氧化益生菌株的基礎(chǔ)上,應(yīng)用細(xì)胞氧化應(yīng)激模型、產(chǎn)腸毒素大腸桿菌感染細(xì)胞模型,從細(xì)胞和分子水平探究Nrf2信號(hào)通路在具有強(qiáng)抗氧化能力的益生乳酸菌抗細(xì)胞氧化應(yīng)激、抵抗產(chǎn)腸毒素大腸桿菌損傷中的作用。所得出的主要結(jié)果如下:首先,通過(guò)初步分菌,經(jīng)過(guò)革蘭氏染色、形態(tài)觀(guān)察和觸酶試驗(yàn)的初步篩選,從中國(guó)東北傳統(tǒng)手工奶酪中共得到322株符合標(biāo)準(zhǔn)的菌株。再次篩選通過(guò)模擬體外胃腸道環(huán)境,進(jìn)行耐受強(qiáng)酸、膽鹽和胰蛋白酶的測(cè)定,篩選出符合標(biāo)準(zhǔn)的菌株。符合標(biāo)準(zhǔn)的23株菌株對(duì)常見(jiàn)的... 

【文章來(lái)源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：75 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同乳酸菌各組分體外抗氧化能力的測(cè)定結(jié)果

東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)碩士學(xué)位論文表 3-9 不同濃度的 27197 在不同時(shí)間與 IPEC-J2 培養(yǎng)的細(xì)胞存活率3-9 Cell viability of IPEC-J2 after different time incubation with different concentration27197時(shí)間 control 1MOI 2MOI 3MOI1.5 h 100±0.00 99.87±3.23 98.98±1.87 92.34±2.17*3 h 100±0.00 99.23±1.89 91.56±2.89* 80.59±1.09**6 h 100±0.00 98.71±2.01 84.32±2.01** 69.12±1.23**12 h 100±0.00 96.54±1.79 70.79±3.02** 59.89±1.78**24 h 100±0.00 98.72±2.01 60.23±1.23** 39.45±2.11**0.05，**p<0.01 與 control 相比較

圖 3-3 不同感染倍數(shù)的 27197 與 IPEC-J2 細(xì)胞孵化 3 h 后的形態(tài)學(xué)變化 3-3 Morphological changes of IPEC-J2 after 3 h incubation with different MOI 不同濃度 H2O2對(duì) IPEC-J2 細(xì)胞存活率的影響K-8 結(jié)果顯示：在 H2O2與細(xì)胞互作模型中，400 μmol/L、800 μmol/L、1200ol/L、2000 μmol/L 和 2500 μmol/L 時(shí)任何時(shí)間段對(duì) IPEC-J2 均無(wú)明顯的增殖活性正常，與對(duì)照組比較并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）。而 1200 μmol/L、16具有明顯的細(xì)胞毒作用，在反應(yīng) 6 h 時(shí)能夠抑制細(xì)胞增長(zhǎng)，降低細(xì)胞活性。0 μmol/L H2O2對(duì)細(xì)胞有明顯的損傷作用，并且存活率顯著性降低，與對(duì)照異。結(jié)果表明：隨著 H2O2濃度增加，作用時(shí)間增長(zhǎng)，細(xì)胞存活率越低；最定 H2O2與 IPEC-J2 氧化應(yīng)激互作模型的最佳條件為 2000 μmol/L，3 h（如

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]紅車(chē)軸草總黃酮對(duì)H2O2誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用[J]. 高蒙蒙,孫桂波,斯建勇,秦蒙,羅云,孟祥寶,王敏,孫曉波.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2013(02)
[2]梔子苷對(duì)氧化應(yīng)激損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用[J]. 丁嵩濤,劉洪濤,李文明,李秀英,于超.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2009(06)
[3]過(guò)氧化氫酶對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠腸黏膜內(nèi)細(xì)胞因子表達(dá)和NF-κB激活的影響[J]. 王群英,王繼德,鐘慧閩,史蕓,張振書(shū),張亞歷.  解放軍醫(yī)學(xué)雜志. 2006(02)
[4]線(xiàn)粒體細(xì)胞色素C釋放在H2O2誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡中的作用[J]. 袁建成,程君濤,秦孝健,肖光夏.  中華燒傷雜志. 2001(06)

博士論文
[1]植物乳桿菌調(diào)節(jié)豬腸上皮細(xì)胞屏障功能和轉(zhuǎn)運(yùn)載體的研究[D]. 吳云鵬.華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]產(chǎn)腸毒素大腸桿菌、腸上皮細(xì)胞和乳酸菌相互關(guān)系的研究[D]. 朱晶.上海交通大學(xué) 2011
[3]1，25-二羥基維生素D3對(duì)實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎腸黏膜屏障的保護(hù)作用與機(jī)制研究[D]. 趙紅偉.河北醫(yī)科大學(xué) 2011

碩士論文
[1]動(dòng)物腸道源抗鉛益生乳酸菌的分離、鑒定及其緩解鉛毒性的機(jī)理研究[D]. 夏爽.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]N-乙�；�-D-半乳糖胺緩解大豆凝集素對(duì)豬小腸上皮屏障損傷的研究[D]. 郭楠.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[3]乳酸桿菌對(duì)LPS致敏小腸上皮細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)及機(jī)制研究[D]. 高侃.浙江農(nóng)林大學(xué) 2015
[4]益生菌對(duì)脂多糖刺激仔豬組織中氧化相關(guān)指標(biāo)和有關(guān)基因表達(dá)的影響[D]. 趙迪.武漢輕工大學(xué) 2014
[5]參附注射液對(duì)H2O2氧化應(yīng)激誘導(dǎo)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用[D]. 郭發(fā)先.南昌大學(xué) 2014
[6]益生菌對(duì)傳染性法氏囊病疫苗免疫雛雞氧化—抗氧化平衡的影響[D]. 景龍.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[7]Nrf2與肝細(xì)胞凋亡在非酒精性脂肪性肝病小鼠中的作用及相互關(guān)系[D]. 孫健.山東大學(xué) 2011
[8]ETEC腸毒素SYBR Green Ⅰ熒光定量PCR檢測(cè)方法的建立[D]. 王芳.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2011



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