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美洲型PRRSV二價核酸疫苗的制備及小鼠的免疫研究

發(fā)布時間:2022-02-13 08:50
  豬繁殖與呼吸綜合征(Procine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS 最早于1987年在美國報道,自爆發(fā)以來,給養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴重的經(jīng)濟損失。在1995年左右傳入中國,引起該病的的病原為豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Procine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)。我國流行的主要是美洲型PRRSV及其變異株,近些年來我國PRRSV譜系呈多樣化趨勢,增加了我國對PRRS的預防和治療的難度。JXA1-like譜系毒株是PRRS爆發(fā)以來比較流行的高致病性PRRSV(HP-PRRSV),而NADC30-like譜系毒株是近些年流行的HP-PRRSV。通過這兩個譜系構建的二價核酸疫苗將是一種非常理想的防控PRRSV的新型疫苗。從某發(fā)病豬場采集樣本采集到一株PRRSV將其命名為YN-L株。對其進行全基因擴增,然后對其Nsp2、GP5基因和全基因組進行遺傳進化分析及同源性比對,并對其Nsp2、GP5基因編碼的氨基酸的序列進行比對,證實該YN-L株為JX41-like譜系毒株。對YN-L毒株... 

【文章來源】:延邊大學吉林省211工程院校

【文章頁數(shù)】:61 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

美洲型PRRSV二價核酸疫苗的制備及小鼠的免疫研究


圖1豬藍耳病病毒基因組結構??Figl?Genomic?structure?of?porcine?blue?ear?disease?virus??

豬藍耳病,蛋白結構,蛋白酶


延邊大學碩士學位論文-前言蛋白酶能夠抑制I型IFN的轉錄,Nspip則可以通RNA誘導的I型IFN轉錄起下調(diào)作用[62]。Nsp2是乃?兄sr非結構蛋白中最大的蛋白,并且在所有非結插入和缺失等情況[63_651。美洲型Nsp2的同源性是并且Nsp2的N末端與C末端具有一定的相似性。Np2f這三個亞型位于中間的高變區(qū),并且在病毒基因。Nsp4為胰凝乳蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶,該蛋白酶sp9和NsplO能夠增強在中國出現(xiàn)的HP-P/?兄9F的酶活性,并含有一個(CORONA)基序|671,Nspl2

毒株,片段,全基因序列,反轉錄


?株全基因擴增結果??提取疑似陽性樣品的總RNA,再反轉錄成cDNA。進行RT-PCR擴增出該毒株全基因??的各片段,各目的片段與預期片段大小基本一致,結果如圖4所示。將測序結果拼接后獲??得尸狀SKIW-Lg株的全基因序列,全長15320bp,命名為為KV-LP株。??Ml?123456?789?10??2000bp??麵bp??750bp??500bp??:??圖4尸/?兄ST}7V-Z^株全基因各片段的RT-PCR??Fig4?The?amplificatins?of?10?fragments?of?PRRSV?YN-LQ?strain??M1.DL2000?DNA?markenl.^^F-lF;?2.PRRSV-2F;?3.PRRSV-3F;?4.PRRSV-4F;?5.PRRSV-5F;?6.PRRSV-6F;??1.PRRSV-1V;?S.PRRSVSF;?9.PRRSV-9F(\);?\0.PRRSV-9F(2)??1.?2?NsP2和GP5基因進化樹分析及同源性比對??}W-Z^株Nsp2和GP5的核苷酸序列與GenBank收錄的部分經(jīng)典毒株的進化??樹分祈及M源性比對,結果見圖5、6、7和8。??22??

【參考文獻】:
期刊論文
[1]豬繁殖和呼吸系統(tǒng)綜合征的血清學檢測及病毒的分離和鑒定(初報)[J]. 陳博文,孫穎杰,羅長保,孫延峰,潘鳳城,林志雄,蘇永生,李樹根,童昆周.  中國獸醫(yī)雜志. 1996(05)



本文編號:3622883

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