馬傳染性貧血病毒（equine infectious anemia virus, EIAV）是巨噬細(xì)胞嗜性的慢病毒。EIAV與其它慢病毒成員的基因組結(jié)構(gòu)、生命周期及抗原漂移規(guī)律等相似,但EIAV基因組最小,同時(shí)遺傳物質(zhì)也最為簡單。除編碼Gag、Pol及Env等結(jié)構(gòu)蛋白之外,EIAV僅編碼Tat、Rev、S2、Ttm四種輔助蛋白。目前,對于EIAV編碼蛋白的功能性研究多從病原學(xué)角度著手,而它們與宿主細(xì)胞因子相互作用方面的研究相對有限。EIAV感染后能引起馬匹持續(xù)性感染,與其它慢病毒不同,90%的EIAV感染馬匹能轉(zhuǎn)歸為無癥狀攜帶狀態(tài),這可能源于感染宿主細(xì)胞對EIAV復(fù)制的良好免疫控制。因此,EIAV成為研究如何實(shí)現(xiàn)對慢病毒感染和致病進(jìn)行天然免疫控制的重要慢病毒模型。病毒感染宿主細(xì)胞后,可激活干擾素應(yīng)答反應(yīng),誘導(dǎo)產(chǎn)生干擾素刺激基因（interferon stimulated genes, ISGs）。其中它們中的部分成員即為天然免疫限制因子。這些限制性因子分別作用于病毒生命周期的不同階段,對逆轉(zhuǎn)錄病毒的侵入、復(fù)制和出芽存在限制作用,形成良好的種間屏障。但病毒在長期進(jìn)化過程中利用自身編碼蛋白... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省211工程院校

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
1 前言
    1.1 EIAV的發(fā)現(xiàn)
    1.2 EIAV的傳播與控制
    1.3 EIAV的病毒粒子結(jié)構(gòu)與構(gòu)成
    1.4 EIAV的編碼蛋白與功能
        1.4.1 結(jié)構(gòu)蛋白
        1.4.2 輔助蛋白
    1.5 EIAV的細(xì)胞嗜性
    1.6 EIAV的生命周期
        1.6.1 EIAV的入侵過程
        1.6.2 EIAV的脫衣殼過程
        1.6.3 EIAV的反轉(zhuǎn)錄過程
        1.6.4 EIAV的整合過程
        1.6.5 EIAV的轉(zhuǎn)錄與翻譯過程
        1.6.6 EIAV的出芽與組裝過程
    1.7 天然免疫限制因子研究進(jìn)展
        1.7.1 APOBEC3
        1.7.2 TRIM5α
        1.7.3 SAMHD1
        1.7.4 MoV10
    1.8 Tetherin的抗病毒及病毒拮抗機(jī)制研究
        1.8.1 Tetherin的分子特征
        1.8.2 Tetherin的抗病毒作用機(jī)制
        1.8.3 Tetherin的拮抗蛋白
    1.9 本研究的目的與意義
2 材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 細(xì)胞與病毒
        2.1.2 質(zhì)粒與菌株
        2.1.3 試劑與耗材
        2.1.4 主要儀器
        2.1.5 試劑配制
    2.2 方法
        2.2.1 馬巨噬細(xì)胞的分離培養(yǎng)
        2.2.2 RNA的提取與反轉(zhuǎn)錄
        2.2.3 普通PCR與定點(diǎn)突變PCR反應(yīng)
        2.2.4 Real-time RT-PCR
        2.2.5 siRNA干擾實(shí)驗(yàn)
        2.2.6 病毒一步生長曲線的繪制
        2.2.7 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.2.8 Western Blotting
        2.2.9 激光共聚焦檢測
        2.2.10 免疫共沉淀
        2.2.11 數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果
    3.1 馬tetherin基因的克隆及結(jié)構(gòu)分析
    3.2 馬干擾素對馬tetherin的誘導(dǎo)調(diào)控研究
        3.2.1 馬tetherin啟動(dòng)子序列的分析
        3.2.2 馬干擾素對馬tetherin的誘導(dǎo)表達(dá)
    3.3 馬tetherin的抗病毒活性研究
        3.3.1 馬巨噬細(xì)胞內(nèi)源性表達(dá)tetherin的抗病毒活性研究
        3.3.2 馬tetherin的抗逆轉(zhuǎn)錄病毒活性分析
        3.3.3 馬tetherin與EIAV病毒粒子的相互作用
        3.3.4 馬tetherin抗病毒關(guān)鍵功能域的分析
    3.4 EIAV對馬tetherin抗病毒活性的拮抗機(jī)制研究
        3.4.1 野生型EIAV對不同種屬tetherin抗病毒活性的敏感性
        3.4.2 HIV-1 Vpu對馬tetherin抗病毒活性的拮抗作用
        3.4.3 EIAV Rev與S2蛋白對馬tetherin抗病毒活性的拮抗作用
        3.4.4 EIAV Env蛋白對馬tetherin抗病毒活性的拮抗作用
4 討論
    4.1 馬tetherin蛋白的分子結(jié)構(gòu)及功能
    4.2 馬tetherin廣譜抗病毒活性的探討
    4.3 EIAV拮抗馬tetherin抗病毒活性的分析
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]EIAV減毒疫苗誘導(dǎo)的特異性細(xì)胞免疫應(yīng)答[J]. 張曉燕,李紅梅,梁華,沈弢,馬燕,相文華,沈榮顯,邵一鳴.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2006(01)
[2]馬傳染性貧血病毒囊膜蛋白GP90的表達(dá)及其免疫效果研究[J]. 戴傳斌,肖瑤,陸紅,沈榮顯,邵一鳴.  中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志. 2003(01)

碩士論文
[1]馬、驢、人、恒河猴四種屬Tetherin蛋白對馬傳染性貧血病毒抑制作用的研究[D]. 谷勤雍.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]干擾素應(yīng)答分子Tetherin對抗馬傳染性貧血病毒的作用機(jī)制研究[D]. 吳星亮.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2013



本文編號：3622198