本研究通過建立人肝微粒體體外孵育試驗,考察泰妙菌素對4種CYP450亞酶的探針底物睪酮、非那西丁、氯唑沙宗、氫溴酸右美沙芬代謝的影響,以反映泰妙菌素對人CYP3A4、CYP1A2、CYP2E1、CYP2D6酶活性的作用。試驗分為3組:藥物試驗組、陽性對照組（不含NADPH）、陰性對照組（不含CYP450抑制劑）,孵育體系為100μL,孵育試驗在96孔板中進(jìn)行。終止反應(yīng)后使用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀（LC-MS/MS）,以內(nèi)標(biāo)法檢測96孔板中孵育液的剩余探針底物濃度。根據(jù)藥物試驗組與陰性對照組的探針?biāo)幬锎x濃度之比,計算藥物試驗組的探針?biāo)幬锎x率。使用Graphpad Prism 6.0軟件,以藥物試驗組相對代謝率為縱坐標(biāo),藥物濃度對數(shù)值為橫坐標(biāo)作圖,計算試驗組藥物IC₅₀值。針對泰妙菌素與CYP3A4的孵育試驗設(shè)置多個孵育時間點觀察孵育時間對IC₅₀值的影響。試驗結(jié)果顯示,酮康唑?qū)YP3A4的IC₅₀值為0.044μmol/L,α-萘黃酮對CYP1A2的IC₅₀值為0.030μmol/L、4-甲基吡... 

【文章來源】：中國畜牧獸醫(yī). 2020,47(04)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

公認(rèn)抑制劑對4種亞酶的抑制曲線

預(yù)試驗結(jié)果顯示,泰妙菌素濃度為50 μmol/L時,對CYP2D6及CYP1A2的相對抑制率分別為10.5%～15.3%、19.3%～23.0%,表明泰妙菌素對CYP2D6及CYP1A2的IC50值>50 μmol/L。由圖2A可知,孵育10 min時,泰妙菌素對CYP3A4的IC50值為1.609 μmol/L;由圖2B可知,泰妙菌素對CYP2E1的IC50值為0.045 μmol/L。2.4 泰妙菌素不同孵育時間對CYP3A4 IC50值的變化

以睪酮為底物,取終濃度為0.125、0.25、0.5、1、2、4、8、16、32 μmol/L的泰妙菌素與肝微粒體分別孵育10、20、30、40、50、60 min,檢測睪酮剩余量,數(shù)據(jù)處理后得到各時間點泰妙菌素對CYP3A4的IC50值分別為1.609、3.703、4.493、5.770、8.657、8.466 μmol/L,以IC50值對孵育時間作圖(圖3),結(jié)果顯示泰妙菌素對CYP3A4的IC50值隨孵育時間的延長而逐漸增大,即抑制作用減弱。3 討 論

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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[2]創(chuàng)新藥物對人肝微粒體CYP450酶體外抑制評價體系的建立與應(yīng)用[D]. 趙秀紅.天津醫(yī)科大學(xué) 2016
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本文編號：3619880