本研究通過建立人肝微粒體體外孵育試驗(yàn),考察泰妙菌素對(duì)4種CYP450亞酶的探針底物睪酮、非那西丁、氯唑沙宗、氫溴酸右美沙芬代謝的影響,以反映泰妙菌素對(duì)人CYP3A4、CYP1A2、CYP2E1、CYP2D6酶活性的作用。試驗(yàn)分為3組:藥物試驗(yàn)組、陽(yáng)性對(duì)照組（不含NADPH）、陰性對(duì)照組（不含CYP450抑制劑）,孵育體系為100μL,孵育試驗(yàn)在96孔板中進(jìn)行。終止反應(yīng)后使用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀（LC-MS/MS）,以內(nèi)標(biāo)法檢測(cè)96孔板中孵育液的剩余探針底物濃度。根據(jù)藥物試驗(yàn)組與陰性對(duì)照組的探針?biāo)幬锎x濃度之比,計(jì)算藥物試驗(yàn)組的探針?biāo)幬锎x率。使用Graphpad Prism 6.0軟件,以藥物試驗(yàn)組相對(duì)代謝率為縱坐標(biāo),藥物濃度對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo)作圖,計(jì)算試驗(yàn)組藥物IC₅₀值。針對(duì)泰妙菌素與CYP3A4的孵育試驗(yàn)設(shè)置多個(gè)孵育時(shí)間點(diǎn)觀察孵育時(shí)間對(duì)IC₅₀值的影響。試驗(yàn)結(jié)果顯示,酮康唑?qū)YP3A4的IC₅₀值為0.044μmol/L,α-萘黃酮對(duì)CYP1A2的IC₅₀值為0.030μmol/L、4-甲基吡... 

【文章來源】：中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2020,47(04)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【部分圖文】：

公認(rèn)抑制劑對(duì)4種亞酶的抑制曲線

預(yù)試驗(yàn)結(jié)果顯示,泰妙菌素濃度為50 μmol/L時(shí),對(duì)CYP2D6及CYP1A2的相對(duì)抑制率分別為10.5%～15.3%、19.3%～23.0%,表明泰妙菌素對(duì)CYP2D6及CYP1A2的IC50值>50 μmol/L。由圖2A可知,孵育10 min時(shí),泰妙菌素對(duì)CYP3A4的IC50值為1.609 μmol/L;由圖2B可知,泰妙菌素對(duì)CYP2E1的IC50值為0.045 μmol/L。2.4 泰妙菌素不同孵育時(shí)間對(duì)CYP3A4 IC50值的變化

以睪酮為底物,取終濃度為0.125、0.25、0.5、1、2、4、8、16、32 μmol/L的泰妙菌素與肝微粒體分別孵育10、20、30、40、50、60 min,檢測(cè)睪酮剩余量,數(shù)據(jù)處理后得到各時(shí)間點(diǎn)泰妙菌素對(duì)CYP3A4的IC50值分別為1.609、3.703、4.493、5.770、8.657、8.466 μmol/L,以IC50值對(duì)孵育時(shí)間作圖(圖3),結(jié)果顯示泰妙菌素對(duì)CYP3A4的IC50值隨孵育時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸增大,即抑制作用減弱。3 討 論

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]全球獸用抗菌藥物使用情況[J]. 王媛媛,孫淑芳,龐素芬,宋建德,姜雯,魏榮,黃保續(xù).  中國(guó)動(dòng)物檢疫. 2018(04)
[2]Cocktail探針?biāo)幬锓ㄔu(píng)價(jià)辣椒素對(duì)大鼠CYP450亞型的影響[J]. 舒舟,翟學(xué)佳,劉金梅,呂永寧.  中國(guó)藥師. 2014(10)

碩士論文
[1]氯美噻唑抑制CYP2E1預(yù)防二乙基亞硝胺誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化[D]. 王高舉.鄭州大學(xué) 2017
[2]創(chuàng)新藥物對(duì)人肝微粒體CYP450酶體外抑制評(píng)價(jià)體系的建立與應(yīng)用[D]. 趙秀紅.天津醫(yī)科大學(xué) 2016
[3]CYP酶抑制試驗(yàn)中低溶解度抑制劑IC50偏高問題的解決方案研究[D]. 徐振興.蘇州大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3619880