基因組印跡（Genomic imprinting）是一種表觀遺傳（Epigenetic）現(xiàn)象,是指哺乳動物的一少部分基因優(yōu)先表達(dá)來自父系或者母系的等位基因。印跡基因在哺乳動物的生長發(fā)育和胎盤功能中起著重要的作用,印跡基因表達(dá)紊亂常伴隨疾病的發(fā)生。牛由于具有實驗動物（如嚙齒動物）所不具備的諸多優(yōu)勢,成為后基因組時代人類疾病研究的新型模式生物。目前,印記研究主要集中在人和小鼠中,而牛中被鑒定的印記基因數(shù)量較少。本研究以牛的NTM、ZNF597、NAA60、GLIS3基因為研究對象,分析了這些基因在牛中的印記狀態(tài)。Neurotrimin（NTM）對神經(jīng)發(fā)育中有重要影響,在人類相關(guān)研究中是印記基因,但是在牛中的印記狀態(tài)尚未揭示。我們分析了牛NTM基因的序列特征和編碼蛋白結(jié)構(gòu),并鑒定NTM基因在成年牛組織和胎盤中的印記狀態(tài)。本研究首先應(yīng)用cDNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)（rapid amplification of cDNA ends,RACE）技術(shù),得到1個牛NTM基因新的剪接體NTMxd（GenBank No.:MH037574）,通過對其編碼氨基酸序列進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)其N端具有更完整的跨膜信號。為了... 

【文章來源】：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

Dnmt基因家族維持基因組印記Fig.1.3Dnmtgenefamilymaintainsgenomicimprinting

從提取的成年牛肝臟組織提取的DNA基因組、胎盤組織DNA基因組、精子DNA基因組和血液DNA基因組中吸取1 μL與核酸染料混合，用1%的瓊脂糖凝膠檢測DNA基因組提取效果（圖3.1）。膠圖中可見提取DNA基因組條帶單一，且測定OD260與OD280的比值介于1.8-1.9之間，說明提取DNA基因組純度較好。再測定DNA的濃度，制備100 ng/μL的稀釋液用于后續(xù)實驗。圖3.1 牛總DNA的提取Fig.3.1 Total DNA of bovine泳道 1-9: 成年牛 1-9 號基因組Lane 1-9：Adult cattle 1-9 total DNA.圖3.2為1.5%瓊脂糖凝膠電泳檢測牛組織和胎盤RNA基因組提取效果圖，位于1000-2000bp間的條帶為28S而另一條為18S。由圖中可見，提取RNA基因組條帶整齊沒有拖帶現(xiàn)象。所有RNA基因組測定OD260和OD280，OD260/OD280的比值介于1.9-2.0之間，提取的RNA純度較好

泳道 1-9: 成年牛 1-9 號基因組Lane 1-9：Adult cattle 1-9 total DNA.圖3.2為1.5%瓊脂糖凝膠電泳檢測牛組織和胎盤RNA基因組提取效果圖，位于1000-2000bp間的條帶為28S而另一條為18S。由圖中可見，提取RNA基因組條帶整齊沒有拖帶現(xiàn)象。所有RNA基因組測定OD260和OD280，OD260/OD280的比值介于1.9-2.0之間，提取的RNA純度較好，可以用于后續(xù)實驗。再分別測定RNA的濃度，制備1000ng/μL的稀釋液用于RT-PCR反應(yīng)。圖3.2 牛總RNA的提取Fig.3.2 Total RNA of bovine泳道 1-7：分別為大腦、心、肝、肺、腎、脾、肌肉.泳道 8-15:胎盤組織Lane 1-7：Total RNA obtained from brain, heart

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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