八眉豬皮下和肌內(nèi)前體脂肪細(xì)胞分離培養(yǎng)及生脂基因組織表達
發(fā)布時間:2022-02-09 10:34
豬作為主要的肉用動物其脂肪組織在體內(nèi)的分布及脂肪沉積是影響其胴體品質(zhì)和肉質(zhì)風(fēng)味的關(guān)鍵因素,皮下脂肪影響胴體品質(zhì),肌內(nèi)脂肪與肌肉的風(fēng)味品質(zhì)密切相關(guān)。皮下和肌內(nèi)前體脂肪細(xì)胞增殖分化和代謝的調(diào)控機制存在差異致使皮下脂肪組織與肌內(nèi)脂肪組織脂質(zhì)代謝的不同。因此,研究皮下和肌內(nèi)前體脂肪細(xì)胞分化以及分化過程中生脂相關(guān)基因的表達,對于闡明其調(diào)控脂肪合成的分子機制及控制脂肪形成有重要意義。此外,八眉豬作為優(yōu)良的地方豬種其不同組織的生脂相關(guān)基因表達也可能存在較大差異,這種差異與脂肪代謝和脂肪沉積有關(guān)。本文以3日齡的八眉豬仔豬為試驗動物,利用膠原酶消化法從其皮下脂肪組織和背最長肌獲得皮下和肌內(nèi)前體脂肪細(xì)胞,采用MTT比色和細(xì)胞計數(shù)等方法研究豬皮下和肌內(nèi)前體脂肪細(xì)胞生長增殖特性;利用油紅O染色提取法測定脂肪含量;以熒光定量PCR檢測皮下脂肪細(xì)胞和肌內(nèi)脂肪細(xì)胞生脂相關(guān)基因FAS、ACC1、SCD、 ChREBP和SREBP-1c表達的差異,同時分析了其在八眉豬仔豬肝臟、皮下脂肪組織、背最長肌、腎臟、心臟以及小腸等組織的表達變化,為地方豬種優(yōu)良性狀基因的利用提供基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:1.采用膠原酶消化法從八眉豬...
【文章來源】:西北民族大學(xué)甘肅省
【文章頁數(shù)】:63 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
皮下前體脂肪細(xì)胞培養(yǎng)(lOOx)
2.3.4.2肌內(nèi)前體脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化后的形態(tài)學(xué)觀察當(dāng)細(xì)胞匯合后,部分細(xì)胞開始自發(fā)充脂(如圖2-6-A所示)。當(dāng)加入誘導(dǎo)培養(yǎng)基分化誘導(dǎo)后,細(xì)胞體積逐漸變大,形態(tài)從纖維樣變?yōu)殚獔A形;誘導(dǎo)2d后細(xì)胞內(nèi)開始出現(xiàn)葡萄串狀的脂滴,(如圖2-6-B所示);隨著誘導(dǎo)時間的增加,細(xì)胞內(nèi)的脂滴不斷聚集,誘導(dǎo)第4 d充脂速度加快(如圖2-6-C所示);誘導(dǎo)10 d后,細(xì)胞內(nèi)脂肪分布以大脂滴為主,周圍分布著小脂滴,脂滴已經(jīng)充滿細(xì)胞內(nèi)部(圖2-6-E所示)。18
利用突光定量PCR檢測皮下和肌內(nèi)前體脂肪細(xì)胞分化過程中生脂相關(guān)基因的表達,從圖2-15可看出,ChREBP在誘導(dǎo)分化的第4 d,表達量顯著增加(PO.Ol),且皮下脂肪細(xì)胞的表達量顯著高于肌內(nèi)脂肪(PO.Ol),隨著誘導(dǎo)時間的延長,ChREBP的表達顯著增加,到第8d,其表達量達到峰值。細(xì)胞在誘導(dǎo)24h后,22
【參考文獻】:
期刊論文
[1]ChREBP基因siRNA表達質(zhì)粒構(gòu)建及對原代培養(yǎng)豬脂肪細(xì)胞生脂的影響[J]. 盧建雄,張國華,李昌輝,陳妍,霍生東,郭鵬輝,蔡勇. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(24)
[2]民豬和大白豬背最長肌差異表達基因的篩選與注釋[J]. 張冬杰,劉娣,汪亮,何鑫淼,王文濤. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2013(02)
[3]皮下脂肪和肌內(nèi)脂肪對豬肉風(fēng)味的作用[J]. 黃業(yè)傳,賀稚非,李洪軍,秦剛,王庭,馬明輝. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(10)
[4]豬肌內(nèi)前體脂肪細(xì)胞的體外培養(yǎng)[J]. 張艷芳,任陽,朱琳娜,單體中,汪以真. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2011(01)
[5]仔豬組織基因表達中實時定量PCR內(nèi)參基因的選擇[J]. 臺玉磊,韓立強,楊國慶,王艷玲,常磊,臧猛,武宇曉,王靜,張志強,楊國宇. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2010(04)
[6]鱖魚基因表達轉(zhuǎn)錄分析中的內(nèi)參選擇比較(英文)[J]. 周瑞雪,蒙濤,孟海波,陳敦學(xué),賓石玉,成嘉,符貴紅,褚武英,張建社. 動物學(xué)研究. 2010(02)
[7]豬肌內(nèi)脂肪前體細(xì)胞與皮下脂肪前體細(xì)胞分化過程中基因差異表達分析[J]. 張罕星,朱曉彤,束剛,周桂炫,高萍,高淑靜,張常明,江青艷,陳瑤生. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(11)
[8]PPAR-γ在八眉豬不同組織中的表達差異[J]. 王博,吳江維,楊公社. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2008(03)
[9]八眉豬、長白豬及長×八雜交豬肌肉組織中FoxO1基因的表達[J]. 楊燕軍,龐衛(wèi)軍,白亮,楊公社. 遺傳. 2008(02)
[10]基因表達轉(zhuǎn)錄分析中內(nèi)參基因的選擇[J]. 張艷君,朱志峰,陸融,徐瓊,石琳熙,簡序,劉俊燕,姚智. 生物化學(xué)與生物物理進展. 2007(05)
博士論文
[1]豬脂肪沉積關(guān)鍵基因的篩選及新基因pFAM134B的功能鑒定[D]. 袁章琴.浙江大學(xué) 2013
[2]豬肌內(nèi)脂肪沉積相關(guān)基因的mRNA表達及功能分析[D]. 崔景香.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[3]應(yīng)激影響肉仔雞脂肪沉積的分子生物學(xué)機制[D]. 蔡元麗.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
碩士論文
[1]豬ADD1基因的克隆及其與肉質(zhì)性狀關(guān)系的研究[D]. 李長龍.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004
本文編號:3616853
【文章來源】:西北民族大學(xué)甘肅省
【文章頁數(shù)】:63 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
皮下前體脂肪細(xì)胞培養(yǎng)(lOOx)
2.3.4.2肌內(nèi)前體脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化后的形態(tài)學(xué)觀察當(dāng)細(xì)胞匯合后,部分細(xì)胞開始自發(fā)充脂(如圖2-6-A所示)。當(dāng)加入誘導(dǎo)培養(yǎng)基分化誘導(dǎo)后,細(xì)胞體積逐漸變大,形態(tài)從纖維樣變?yōu)殚獔A形;誘導(dǎo)2d后細(xì)胞內(nèi)開始出現(xiàn)葡萄串狀的脂滴,(如圖2-6-B所示);隨著誘導(dǎo)時間的增加,細(xì)胞內(nèi)的脂滴不斷聚集,誘導(dǎo)第4 d充脂速度加快(如圖2-6-C所示);誘導(dǎo)10 d后,細(xì)胞內(nèi)脂肪分布以大脂滴為主,周圍分布著小脂滴,脂滴已經(jīng)充滿細(xì)胞內(nèi)部(圖2-6-E所示)。18
利用突光定量PCR檢測皮下和肌內(nèi)前體脂肪細(xì)胞分化過程中生脂相關(guān)基因的表達,從圖2-15可看出,ChREBP在誘導(dǎo)分化的第4 d,表達量顯著增加(PO.Ol),且皮下脂肪細(xì)胞的表達量顯著高于肌內(nèi)脂肪(PO.Ol),隨著誘導(dǎo)時間的延長,ChREBP的表達顯著增加,到第8d,其表達量達到峰值。細(xì)胞在誘導(dǎo)24h后,22
【參考文獻】:
期刊論文
[1]ChREBP基因siRNA表達質(zhì)粒構(gòu)建及對原代培養(yǎng)豬脂肪細(xì)胞生脂的影響[J]. 盧建雄,張國華,李昌輝,陳妍,霍生東,郭鵬輝,蔡勇. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(24)
[2]民豬和大白豬背最長肌差異表達基因的篩選與注釋[J]. 張冬杰,劉娣,汪亮,何鑫淼,王文濤. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2013(02)
[3]皮下脂肪和肌內(nèi)脂肪對豬肉風(fēng)味的作用[J]. 黃業(yè)傳,賀稚非,李洪軍,秦剛,王庭,馬明輝. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(10)
[4]豬肌內(nèi)前體脂肪細(xì)胞的體外培養(yǎng)[J]. 張艷芳,任陽,朱琳娜,單體中,汪以真. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2011(01)
[5]仔豬組織基因表達中實時定量PCR內(nèi)參基因的選擇[J]. 臺玉磊,韓立強,楊國慶,王艷玲,常磊,臧猛,武宇曉,王靜,張志強,楊國宇. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2010(04)
[6]鱖魚基因表達轉(zhuǎn)錄分析中的內(nèi)參選擇比較(英文)[J]. 周瑞雪,蒙濤,孟海波,陳敦學(xué),賓石玉,成嘉,符貴紅,褚武英,張建社. 動物學(xué)研究. 2010(02)
[7]豬肌內(nèi)脂肪前體細(xì)胞與皮下脂肪前體細(xì)胞分化過程中基因差異表達分析[J]. 張罕星,朱曉彤,束剛,周桂炫,高萍,高淑靜,張常明,江青艷,陳瑤生. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(11)
[8]PPAR-γ在八眉豬不同組織中的表達差異[J]. 王博,吳江維,楊公社. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2008(03)
[9]八眉豬、長白豬及長×八雜交豬肌肉組織中FoxO1基因的表達[J]. 楊燕軍,龐衛(wèi)軍,白亮,楊公社. 遺傳. 2008(02)
[10]基因表達轉(zhuǎn)錄分析中內(nèi)參基因的選擇[J]. 張艷君,朱志峰,陸融,徐瓊,石琳熙,簡序,劉俊燕,姚智. 生物化學(xué)與生物物理進展. 2007(05)
博士論文
[1]豬脂肪沉積關(guān)鍵基因的篩選及新基因pFAM134B的功能鑒定[D]. 袁章琴.浙江大學(xué) 2013
[2]豬肌內(nèi)脂肪沉積相關(guān)基因的mRNA表達及功能分析[D]. 崔景香.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[3]應(yīng)激影響肉仔雞脂肪沉積的分子生物學(xué)機制[D]. 蔡元麗.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
碩士論文
[1]豬ADD1基因的克隆及其與肉質(zhì)性狀關(guān)系的研究[D]. 李長龍.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004
本文編號:3616853
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