本研究以梅花鹿角柄骨膜細胞為核供體，MⅡ期牛卵母細胞為受體，擠壓法去核，構建梅花鹿-牛異種重構胚。從電場強度、電脈沖次數(shù)、脈沖持續(xù)時間和融合前恢復培養(yǎng)時間這四個方面，探討了電融合參數(shù)對梅花鹿-牛異種重組胚融合效果和卵裂的影響，結果以融合率、死亡卵率和卵裂率計。主要結果和內容如下：一、梅花鹿角柄骨膜細胞生長曲線及染色體組型分析1.第9代梅花鹿角柄骨膜細胞在38.5℃、5%CO2、飽和濕度、10%FBS培養(yǎng)條件下仍然具有哺乳動物細胞典型的“S”型生長曲線，增殖迅速。該培養(yǎng)條件適宜角柄骨膜細胞的生長。2.對第9代的梅花鹿角柄骨膜細胞進行常規(guī)染色體檢測，統(tǒng)計分析表明染色體組型為2n=66。說明長時間的傳代培養(yǎng)不會改變角柄骨膜細胞遺傳特性，可以作為體細胞核移植的供核細胞。二、電融合參數(shù)對梅花鹿-牛異種重構胚融合效果和卵裂的影響1.2.4KV/cm電場強度重組胚融合率（48.6%）顯著高于其他三組（25.2%、41.0%、31.1%，P＜0.05），但在死亡卵率和卵裂率方面四組差異不顯著（P>0.05）。2.1次電脈沖次數(shù)組和2次、3次組在重組胚融合率、死亡卵率和卵裂率方面差異不顯著（P&g... 

【文章來源】：中國農業(yè)科學院北京市

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

梅花鹿F9代角柄骨膜細胞生長曲線

第9代梅花鹿角柄骨膜細胞染色體Fig.2-2Chromosomesofthe9thgenerationSikaDeerPedicleperiosteumcells

消化好的供體PP細胞（100X）

【參考文獻】：
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本文編號：3615538