IBDV感染對(duì)腸道相關(guān)淋巴組織中T細(xì)胞亞群動(dòng)態(tài)變化及炎性細(xì)胞因子表達(dá)影響的研究
發(fā)布時(shí)間:2022-02-05 00:46
傳染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)是家禽類養(yǎng)殖中重要病害之一,具有高致病率,高傳染性和免疫抑制性等特點(diǎn)。其病原體為傳染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV),屬雙鏈RNA(ds RNA)病毒科(Birnaviridae),主要侵染禽的中樞免疫器官法氏囊(bursa of Fabricius,BFs),并引起T細(xì)胞浸潤。禽腸相關(guān)性免疫組織(gut associated-lymphoid tissues,GALTs)主要包括盲腸扁桃體(cecal tonsils,CTs)、食道扁桃體(esophageal tonsils,ETs)、幽門扁桃體(pyloric tonsils,PTs)、梅克爾憩室(Meckel’s diverticulum)等,在抵御外界細(xì)菌和病毒中發(fā)揮著重要作用。然而,IBDV對(duì)禽腸相關(guān)性免疫組織的感染及致病作用還不是很清楚。基于此,本課題主要探究了IBDV感染對(duì)雞腸道相關(guān)免疫組織中不同T細(xì)胞群動(dòng)態(tài)變化、T細(xì)胞表面的免疫抑制受體分子和一些重要相關(guān)的炎性細(xì)胞因子表達(dá)的影響。在IBD...
【文章來源】:浙江農(nóng)林大學(xué)浙江省
【文章頁數(shù)】:54 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
對(duì)照組和IBDV感染家禽(1dpi)的BF石蠟切片用IBDV抗體(紅色)和DAPI(藍(lán)色)進(jìn)行熒光IHC染色和HE染色
IBDV感染誘導(dǎo)BFs中CD4+和CD4+CD
第5天的法氏囊組織及其所對(duì)應(yīng)的對(duì)照組(n=3),經(jīng)過Trizol抽提RNA,反轉(zhuǎn)錄成cDNA并qRT-PCR檢測(cè),chGAPDH作為內(nèi)參。同樣用GraphPadPrism軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,統(tǒng)計(jì)結(jié)果如圖1.3所示:盡管在1dpi病毒感染的早期階段所檢測(cè)的基因均不受影響,但I(xiàn)BDV在感染后期(5dpi),IL-10(p<0.0001)和IFN-γ表達(dá)量(p<0.01)顯著上升(圖1.3A),除此之外T細(xì)胞表面受體LAG-3基因表達(dá)量(5dpi)也顯著上升(圖1.3B,p<0.01)。以上結(jié)果表明,在IBDV感染后期,BF的炎癥相關(guān)的基因和與T細(xì)胞相關(guān)的檢查點(diǎn)受體的基因的mRNA表達(dá)上調(diào)。AB圖1.3IBDV感染雞BFs細(xì)胞中炎癥相關(guān)基因和T細(xì)胞相關(guān)受體的不同mRNA表達(dá)模式。將SPF雞(n=12)感染0.2mL含IBDV的DMEM(TCID50=7×107/mL)或無菌DMEM(對(duì)照)。在1和5dpi時(shí),通過qPCR測(cè)定炎癥相關(guān)基因IL-2,IL-10,IFN-γ,IFN-β和TGF-β的mRNA表達(dá)水平(A),以及與T細(xì)胞相關(guān)的檢查點(diǎn)受體LAG-3和CTLA-4(B)。*,p<0.05,**,p<0.01,****,p<0.0001。Figure1.3DistinctmRNAexpressionpatternofinflammation-relatedgenesandTcellassociatedreceptorsincellsofBFsfromIBDVinfectedchickens.SPFchickens(n=12)wereeitherinfectedwith0.2mLIBDV-containingDMEM(TCID50=7×107/mL)ormock-infectedwithsterileDMEM.At1and5dpi,themRNAexpressionlevelsofinflammation-relatedgenesIL-2,IL-10,IFN-γ,IFN-βandTGF-β(A),aswellastheT-cellassociatedcheckpointreceptorsLAG-3andCTLA-4(B)inBFs.*,p<0.05,**,p<0.01,****,p<0.0001.
本文編號(hào):3614252
【文章來源】:浙江農(nóng)林大學(xué)浙江省
【文章頁數(shù)】:54 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
對(duì)照組和IBDV感染家禽(1dpi)的BF石蠟切片用IBDV抗體(紅色)和DAPI(藍(lán)色)進(jìn)行熒光IHC染色和HE染色
IBDV感染誘導(dǎo)BFs中CD4+和CD4+CD
第5天的法氏囊組織及其所對(duì)應(yīng)的對(duì)照組(n=3),經(jīng)過Trizol抽提RNA,反轉(zhuǎn)錄成cDNA并qRT-PCR檢測(cè),chGAPDH作為內(nèi)參。同樣用GraphPadPrism軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,統(tǒng)計(jì)結(jié)果如圖1.3所示:盡管在1dpi病毒感染的早期階段所檢測(cè)的基因均不受影響,但I(xiàn)BDV在感染后期(5dpi),IL-10(p<0.0001)和IFN-γ表達(dá)量(p<0.01)顯著上升(圖1.3A),除此之外T細(xì)胞表面受體LAG-3基因表達(dá)量(5dpi)也顯著上升(圖1.3B,p<0.01)。以上結(jié)果表明,在IBDV感染后期,BF的炎癥相關(guān)的基因和與T細(xì)胞相關(guān)的檢查點(diǎn)受體的基因的mRNA表達(dá)上調(diào)。AB圖1.3IBDV感染雞BFs細(xì)胞中炎癥相關(guān)基因和T細(xì)胞相關(guān)受體的不同mRNA表達(dá)模式。將SPF雞(n=12)感染0.2mL含IBDV的DMEM(TCID50=7×107/mL)或無菌DMEM(對(duì)照)。在1和5dpi時(shí),通過qPCR測(cè)定炎癥相關(guān)基因IL-2,IL-10,IFN-γ,IFN-β和TGF-β的mRNA表達(dá)水平(A),以及與T細(xì)胞相關(guān)的檢查點(diǎn)受體LAG-3和CTLA-4(B)。*,p<0.05,**,p<0.01,****,p<0.0001。Figure1.3DistinctmRNAexpressionpatternofinflammation-relatedgenesandTcellassociatedreceptorsincellsofBFsfromIBDVinfectedchickens.SPFchickens(n=12)wereeitherinfectedwith0.2mLIBDV-containingDMEM(TCID50=7×107/mL)ormock-infectedwithsterileDMEM.At1and5dpi,themRNAexpressionlevelsofinflammation-relatedgenesIL-2,IL-10,IFN-γ,IFN-βandTGF-β(A),aswellastheT-cellassociatedcheckpointreceptorsLAG-3andCTLA-4(B)inBFs.*,p<0.05,**,p<0.01,****,p<0.0001.
本文編號(hào):3614252
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