大腸桿菌是一種人獸共患的條件性致病菌,在人或動(dòng)物體內(nèi)菌群失調(diào)或免疫力低下時(shí),可引發(fā)機(jī)體感染大腸桿菌,造成大腸桿菌病。寧夏、青海兩個(gè)地區(qū)是我國(guó)牛羊養(yǎng)殖業(yè)大省,對(duì)羊源大腸桿菌做耐藥性及耐藥基因的監(jiān)測(cè)和流行病學(xué)調(diào)查研究,有助于了解大腸桿菌耐藥性的流行及傳播機(jī)制,為臨床用藥提供指導(dǎo)。通過(guò)麥康凱、伊紅美藍(lán)、生化鑒定及聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）等方式分離、鑒定大腸桿菌;對(duì)320株大腸桿菌進(jìn)行4種抗菌藥物的MIC測(cè)定;使用紙片法藥敏試驗(yàn)檢測(cè)48株具有耐藥表型的菌株對(duì)4種β-內(nèi)酰胺類藥物的耐藥性;采用PCR方法檢測(cè)β-內(nèi)酰胺酶類耐藥基因;選取耐藥菌株做接合試驗(yàn),初步探討揭示大腸桿菌耐藥基因的流行及傳播機(jī)制,獲得結(jié)果如下:（1）2018年4月-2018年12月期間采集寧夏、青海部分地區(qū)羊的組織、拭子和糞便,培養(yǎng)、分離、純化大腸桿菌,通過(guò)分離、鑒定大腸桿菌320株,分離率達(dá)65.43%（320/489）,其中寧夏210株,青海110株;（2）MIC試驗(yàn)結(jié)果顯示,對(duì)氨芐西林（AMP）、頭孢他啶（CAZ）、慶大霉素（GEN）、壯觀霉素（SPT）的耐藥率分別為30.93%、4.37%、15.62%、9.68%;對(duì)... 

【文章來(lái)源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省211工程院校985工程院校教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 大腸桿菌病原及耐藥性研究進(jìn)展
    1.1 大腸桿菌病原學(xué)
        1.1.1 形態(tài)特征
        1.1.2 抗原特征
        1.1.3 培養(yǎng)特征
        1.1.4 生化特征
    1.2 大腸桿菌致病性
    1.3 大腸桿菌的耐藥現(xiàn)狀與耐藥機(jī)制
        1.3.1 大腸桿菌的耐藥現(xiàn)狀
        1.3.2 抗菌藥物的作用機(jī)制
        1.3.3 大腸桿菌的耐藥機(jī)制
    1.4 β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物的研究現(xiàn)狀
        1.4.1 大腸桿菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物耐藥現(xiàn)狀
        1.4.2 大腸桿菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物的耐藥機(jī)制
        1.4.3 產(chǎn)ESBLs和 AmpC酶動(dòng)物源腸桿菌的流行情況
    1.5 研究的目的和意義
第二章 羊源大腸桿菌分離鑒定
    2.1 材料
        2.1.1 試驗(yàn)材料
        2.1.2 主要儀器
        2.1.3 培養(yǎng)基和常用溶液配制
    2.2 方法
        2.2.1 樣本采集
        2.2.2 大腸桿菌的分離純化
        2.2.3 大腸桿菌的鑒定
            2.2.3.1 染色鏡檢
            2.2.3.2 生化鑒定
            2.2.3.3 16S rRNA PCR 鑒定
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 分離情況
        2.3.2 菌落形態(tài)
        2.3.3 生化試驗(yàn)
        2.3.4 分子生物學(xué)鑒定
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第三章 大腸桿菌的耐藥性及β-內(nèi)酰胺類酶耐藥基因檢測(cè)
    3.1 材料
        3.1.1 試驗(yàn)材料
        3.1.2 主要儀器
        3.1.3 培養(yǎng)基和常用溶液配制
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 菌液MIC測(cè)定
        3.2.2 紙片法藥敏試驗(yàn)
        3.2.3 耐藥基因的檢測(cè)
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 大腸桿菌的耐藥情況
        3.3.2 紙片法藥敏試驗(yàn)結(jié)果
        3.3.3 耐藥基因的檢測(cè)結(jié)果
    3.4 討論
        3.4.1 大腸桿菌的耐藥表型分析
        3.4.2 大腸桿菌的ESELs和 AmpC酶基因流行情況
    3.5 小結(jié)
第四章 大腸桿菌的耐藥基因轉(zhuǎn)移試驗(yàn)
    4.1 材料
        4.1.1 試驗(yàn)材料
            4.1.1.1 樣品來(lái)源
            4.1.1.2 主要試劑和藥品
        4.1.2 主要儀器
        4.1.3 培養(yǎng)基和常用溶液配制
    4.2 方法
        4.2.1 接合試驗(yàn)
        4.2.2 接合子的MIC測(cè)定
        4.2.3 接合子ESBLs和 AmpC基因的檢測(cè)
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 接合試驗(yàn)結(jié)果
        4.3.2 接合子的MIC測(cè)定
        4.3.3 接合子ESBLs和 AmpC基因的檢測(cè)
    4.4 討論
        4.4.1 接合子的MIC測(cè)定
        4.4.2 ESBLs和 AmpC基因的檢測(cè)
    4.5 小結(jié)
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[4]腸出血性大腸桿菌O157:H7鞭毛蛋白的原核表達(dá)及單克隆抗體的制備[D]. 吳超.揚(yáng)州大學(xué) 2014
[5]雞源性大腸桿菌耐藥性檢測(cè)及相關(guān)耐藥基因的研究[D]. 張飛燕.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[6]四川省動(dòng)物源大腸桿菌質(zhì)粒介導(dǎo)ESBLs和AmpC酶耐藥基因的檢測(cè)[D]. 鐘欽卿.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
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本文編號(hào)：3614130