寧夏和青海羊源大腸桿菌的分離鑒定和耐藥性及β-內(nèi)酰胺類耐藥基因的檢測
發(fā)布時間:2022-02-04 23:20
大腸桿菌是一種人獸共患的條件性致病菌,在人或動物體內(nèi)菌群失調(diào)或免疫力低下時,可引發(fā)機體感染大腸桿菌,造成大腸桿菌病。寧夏、青海兩個地區(qū)是我國牛羊養(yǎng)殖業(yè)大省,對羊源大腸桿菌做耐藥性及耐藥基因的監(jiān)測和流行病學(xué)調(diào)查研究,有助于了解大腸桿菌耐藥性的流行及傳播機制,為臨床用藥提供指導(dǎo)。通過麥康凱、伊紅美藍(lán)、生化鑒定及聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)等方式分離、鑒定大腸桿菌;對320株大腸桿菌進(jìn)行4種抗菌藥物的MIC測定;使用紙片法藥敏試驗檢測48株具有耐藥表型的菌株對4種β-內(nèi)酰胺類藥物的耐藥性;采用PCR方法檢測β-內(nèi)酰胺酶類耐藥基因;選取耐藥菌株做接合試驗,初步探討揭示大腸桿菌耐藥基因的流行及傳播機制,獲得結(jié)果如下:(1)2018年4月-2018年12月期間采集寧夏、青海部分地區(qū)羊的組織、拭子和糞便,培養(yǎng)、分離、純化大腸桿菌,通過分離、鑒定大腸桿菌320株,分離率達(dá)65.43%(320/489),其中寧夏210株,青海110株;(2)MIC試驗結(jié)果顯示,對氨芐西林(AMP)、頭孢他啶(CAZ)、慶大霉素(GEN)、壯觀霉素(SPT)的耐藥率分別為30.93%、4.37%、15.62%、9.68%;對...
【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省211工程院校985工程院校教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 大腸桿菌病原及耐藥性研究進(jìn)展
1.1 大腸桿菌病原學(xué)
1.1.1 形態(tài)特征
1.1.2 抗原特征
1.1.3 培養(yǎng)特征
1.1.4 生化特征
1.2 大腸桿菌致病性
1.3 大腸桿菌的耐藥現(xiàn)狀與耐藥機制
1.3.1 大腸桿菌的耐藥現(xiàn)狀
1.3.2 抗菌藥物的作用機制
1.3.3 大腸桿菌的耐藥機制
1.4 β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物的研究現(xiàn)狀
1.4.1 大腸桿菌對β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物耐藥現(xiàn)狀
1.4.2 大腸桿菌對β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物的耐藥機制
1.4.3 產(chǎn)ESBLs和 AmpC酶動物源腸桿菌的流行情況
1.5 研究的目的和意義
第二章 羊源大腸桿菌分離鑒定
2.1 材料
2.1.1 試驗材料
2.1.2 主要儀器
2.1.3 培養(yǎng)基和常用溶液配制
2.2 方法
2.2.1 樣本采集
2.2.2 大腸桿菌的分離純化
2.2.3 大腸桿菌的鑒定
2.2.3.1 染色鏡檢
2.2.3.2 生化鑒定
2.2.3.3 16S rRNA PCR 鑒定
2.3 結(jié)果
2.3.1 分離情況
2.3.2 菌落形態(tài)
2.3.3 生化試驗
2.3.4 分子生物學(xué)鑒定
2.4 討論
2.5 小結(jié)
第三章 大腸桿菌的耐藥性及β-內(nèi)酰胺類酶耐藥基因檢測
3.1 材料
3.1.1 試驗材料
3.1.2 主要儀器
3.1.3 培養(yǎng)基和常用溶液配制
3.2 試驗方法
3.2.1 菌液MIC測定
3.2.2 紙片法藥敏試驗
3.2.3 耐藥基因的檢測
3.3 結(jié)果
3.3.1 大腸桿菌的耐藥情況
3.3.2 紙片法藥敏試驗結(jié)果
3.3.3 耐藥基因的檢測結(jié)果
3.4 討論
3.4.1 大腸桿菌的耐藥表型分析
3.4.2 大腸桿菌的ESELs和 AmpC酶基因流行情況
3.5 小結(jié)
第四章 大腸桿菌的耐藥基因轉(zhuǎn)移試驗
4.1 材料
4.1.1 試驗材料
4.1.1.1 樣品來源
4.1.1.2 主要試劑和藥品
4.1.2 主要儀器
4.1.3 培養(yǎng)基和常用溶液配制
4.2 方法
4.2.1 接合試驗
4.2.2 接合子的MIC測定
4.2.3 接合子ESBLs和 AmpC基因的檢測
4.3 結(jié)果
4.3.1 接合試驗結(jié)果
4.3.2 接合子的MIC測定
4.3.3 接合子ESBLs和 AmpC基因的檢測
4.4 討論
4.4.1 接合子的MIC測定
4.4.2 ESBLs和 AmpC基因的檢測
4.5 小結(jié)
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]河南省規(guī);i場ESBLs大腸桿菌耐藥基因檢測及分析[J]. 張成東,曲久燕,李德喜,郭海巖,劉夢龍,崔松濤. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2019(03)
[2]陜西關(guān)中地區(qū)豬大腸桿菌的分離鑒定與耐藥性檢測[J]. 魏恒,王韋華,李娟娟,趙毅. 陜西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2019(01)
[3]新疆伊犁地區(qū)不同動物源大腸桿菌耐藥性調(diào)查[J]. 陳月月,王凱,王舒豐,姚曉慧,軒慧勇,馬木爾,夏利寧. 新疆農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(08)
[4]8省市雞肉源性大腸桿菌分離鑒定及其耐藥性檢測[J]. 李穗霞,席美麗,王盼盼,吳倩,吳聰明,沈建忠,付騁宇,張鵬飛,王新. 中國人獸共患病學(xué)報. 2018(02)
[5]河南省豬源大腸桿菌的分離鑒定與耐藥性分析[J]. 艾偉昌,李金磊,董鵬,狄元冉,方忠意,高延玲,周紅霞,吳志明. 上海畜牧獸醫(yī)通訊. 2017(06)
[6]兔源產(chǎn)ESBLs大腸桿菌耐藥性與優(yōu)勢基因型研究[J]. 坤清芳,耿毅,余澤輝,汪開毓,李亞軍,牟維豪,鄧釗賓,張雨薇. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2018(01)
[7]陜西林麝肺源致病性大腸埃希菌分離鑒定及藥敏試驗[J]. 張慧慧,仇薪鑫,王興龍,楊增岐. 動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2017(08)
[8]大腸桿菌耐藥現(xiàn)狀的嚴(yán)峻性[J]. 高海濤,韓俊麗,關(guān)道明. 生命科學(xué). 2017(05)
[9]內(nèi)蒙古地區(qū)羊源大腸桿菌耐藥性研究[J]. 劉正明,李金泉,黃德浩,郝欣蔚,郝普國,吳莉芩,吳燁挺,楊奇妙,趙紅霞. 中國畜牧獸醫(yī). 2017(03)
[10]新疆犢牛源大腸桿菌系統(tǒng)進(jìn)化及其耐藥特性[J]. 張星星,喬軍,孟慶玲,陳誠,劉田莉,孟丹,于偉偉,才學(xué)鵬,陳創(chuàng)夫. 家畜生態(tài)學(xué)報. 2016(06)
博士論文
[1]雞糞便菌耐藥基因及其產(chǎn)ESBLs大腸桿菌耐藥性的研究[D]. 佟盼盼.吉林大學(xué) 2015
[2]牦牛、牧民源大腸桿菌分離鑒定、耐藥基因檢測、PFGE分析及耐藥性傳遞的研究[D]. 羊云飛.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
碩士論文
[1]揚州地區(qū)寵物源大腸桿菌耐藥性分析及耐藥基因檢測[D]. 吳立婷.揚州大學(xué) 2017
[2]大腸桿菌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶種類及相關(guān)基因檢測[D]. 劉日昂.貴州大學(xué) 2017
[3]貴州省豬源大腸桿菌四環(huán)素耐藥基因檢測及轉(zhuǎn)移的研究[D]. 韋嬪.貴州大學(xué) 2016
[4]腸出血性大腸桿菌O157:H7鞭毛蛋白的原核表達(dá)及單克隆抗體的制備[D]. 吳超.揚州大學(xué) 2014
[5]雞源性大腸桿菌耐藥性檢測及相關(guān)耐藥基因的研究[D]. 張飛燕.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[6]四川省動物源大腸桿菌質(zhì)粒介導(dǎo)ESBLs和AmpC酶耐藥基因的檢測[D]. 鐘欽卿.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[7]豬源大腸桿菌和沙門氏菌耐藥表型與基因型的研究[D]. 唐一鳴.浙江大學(xué) 2010
[8]鴨源大腸桿菌ESBLs的基因型檢測[D]. 李鳳娟.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
本文編號:3614130
【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省211工程院校985工程院校教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 大腸桿菌病原及耐藥性研究進(jìn)展
1.1 大腸桿菌病原學(xué)
1.1.1 形態(tài)特征
1.1.2 抗原特征
1.1.3 培養(yǎng)特征
1.1.4 生化特征
1.2 大腸桿菌致病性
1.3 大腸桿菌的耐藥現(xiàn)狀與耐藥機制
1.3.1 大腸桿菌的耐藥現(xiàn)狀
1.3.2 抗菌藥物的作用機制
1.3.3 大腸桿菌的耐藥機制
1.4 β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物的研究現(xiàn)狀
1.4.1 大腸桿菌對β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物耐藥現(xiàn)狀
1.4.2 大腸桿菌對β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物的耐藥機制
1.4.3 產(chǎn)ESBLs和 AmpC酶動物源腸桿菌的流行情況
1.5 研究的目的和意義
第二章 羊源大腸桿菌分離鑒定
2.1 材料
2.1.1 試驗材料
2.1.2 主要儀器
2.1.3 培養(yǎng)基和常用溶液配制
2.2 方法
2.2.1 樣本采集
2.2.2 大腸桿菌的分離純化
2.2.3 大腸桿菌的鑒定
2.2.3.1 染色鏡檢
2.2.3.2 生化鑒定
2.2.3.3 16S rRNA PCR 鑒定
2.3 結(jié)果
2.3.1 分離情況
2.3.2 菌落形態(tài)
2.3.3 生化試驗
2.3.4 分子生物學(xué)鑒定
2.4 討論
2.5 小結(jié)
第三章 大腸桿菌的耐藥性及β-內(nèi)酰胺類酶耐藥基因檢測
3.1 材料
3.1.1 試驗材料
3.1.2 主要儀器
3.1.3 培養(yǎng)基和常用溶液配制
3.2 試驗方法
3.2.1 菌液MIC測定
3.2.2 紙片法藥敏試驗
3.2.3 耐藥基因的檢測
3.3 結(jié)果
3.3.1 大腸桿菌的耐藥情況
3.3.2 紙片法藥敏試驗結(jié)果
3.3.3 耐藥基因的檢測結(jié)果
3.4 討論
3.4.1 大腸桿菌的耐藥表型分析
3.4.2 大腸桿菌的ESELs和 AmpC酶基因流行情況
3.5 小結(jié)
第四章 大腸桿菌的耐藥基因轉(zhuǎn)移試驗
4.1 材料
4.1.1 試驗材料
4.1.1.1 樣品來源
4.1.1.2 主要試劑和藥品
4.1.2 主要儀器
4.1.3 培養(yǎng)基和常用溶液配制
4.2 方法
4.2.1 接合試驗
4.2.2 接合子的MIC測定
4.2.3 接合子ESBLs和 AmpC基因的檢測
4.3 結(jié)果
4.3.1 接合試驗結(jié)果
4.3.2 接合子的MIC測定
4.3.3 接合子ESBLs和 AmpC基因的檢測
4.4 討論
4.4.1 接合子的MIC測定
4.4.2 ESBLs和 AmpC基因的檢測
4.5 小結(jié)
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]河南省規(guī);i場ESBLs大腸桿菌耐藥基因檢測及分析[J]. 張成東,曲久燕,李德喜,郭海巖,劉夢龍,崔松濤. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2019(03)
[2]陜西關(guān)中地區(qū)豬大腸桿菌的分離鑒定與耐藥性檢測[J]. 魏恒,王韋華,李娟娟,趙毅. 陜西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2019(01)
[3]新疆伊犁地區(qū)不同動物源大腸桿菌耐藥性調(diào)查[J]. 陳月月,王凱,王舒豐,姚曉慧,軒慧勇,馬木爾,夏利寧. 新疆農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(08)
[4]8省市雞肉源性大腸桿菌分離鑒定及其耐藥性檢測[J]. 李穗霞,席美麗,王盼盼,吳倩,吳聰明,沈建忠,付騁宇,張鵬飛,王新. 中國人獸共患病學(xué)報. 2018(02)
[5]河南省豬源大腸桿菌的分離鑒定與耐藥性分析[J]. 艾偉昌,李金磊,董鵬,狄元冉,方忠意,高延玲,周紅霞,吳志明. 上海畜牧獸醫(yī)通訊. 2017(06)
[6]兔源產(chǎn)ESBLs大腸桿菌耐藥性與優(yōu)勢基因型研究[J]. 坤清芳,耿毅,余澤輝,汪開毓,李亞軍,牟維豪,鄧釗賓,張雨薇. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2018(01)
[7]陜西林麝肺源致病性大腸埃希菌分離鑒定及藥敏試驗[J]. 張慧慧,仇薪鑫,王興龍,楊增岐. 動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2017(08)
[8]大腸桿菌耐藥現(xiàn)狀的嚴(yán)峻性[J]. 高海濤,韓俊麗,關(guān)道明. 生命科學(xué). 2017(05)
[9]內(nèi)蒙古地區(qū)羊源大腸桿菌耐藥性研究[J]. 劉正明,李金泉,黃德浩,郝欣蔚,郝普國,吳莉芩,吳燁挺,楊奇妙,趙紅霞. 中國畜牧獸醫(yī). 2017(03)
[10]新疆犢牛源大腸桿菌系統(tǒng)進(jìn)化及其耐藥特性[J]. 張星星,喬軍,孟慶玲,陳誠,劉田莉,孟丹,于偉偉,才學(xué)鵬,陳創(chuàng)夫. 家畜生態(tài)學(xué)報. 2016(06)
博士論文
[1]雞糞便菌耐藥基因及其產(chǎn)ESBLs大腸桿菌耐藥性的研究[D]. 佟盼盼.吉林大學(xué) 2015
[2]牦牛、牧民源大腸桿菌分離鑒定、耐藥基因檢測、PFGE分析及耐藥性傳遞的研究[D]. 羊云飛.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
碩士論文
[1]揚州地區(qū)寵物源大腸桿菌耐藥性分析及耐藥基因檢測[D]. 吳立婷.揚州大學(xué) 2017
[2]大腸桿菌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶種類及相關(guān)基因檢測[D]. 劉日昂.貴州大學(xué) 2017
[3]貴州省豬源大腸桿菌四環(huán)素耐藥基因檢測及轉(zhuǎn)移的研究[D]. 韋嬪.貴州大學(xué) 2016
[4]腸出血性大腸桿菌O157:H7鞭毛蛋白的原核表達(dá)及單克隆抗體的制備[D]. 吳超.揚州大學(xué) 2014
[5]雞源性大腸桿菌耐藥性檢測及相關(guān)耐藥基因的研究[D]. 張飛燕.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[6]四川省動物源大腸桿菌質(zhì)粒介導(dǎo)ESBLs和AmpC酶耐藥基因的檢測[D]. 鐘欽卿.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[7]豬源大腸桿菌和沙門氏菌耐藥表型與基因型的研究[D]. 唐一鳴.浙江大學(xué) 2010
[8]鴨源大腸桿菌ESBLs的基因型檢測[D]. 李鳳娟.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
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