苜蓿（Alfalfa）作為反芻動(dòng)物最主要的粗飼料蛋白來(lái)源,可通過(guò)青貯保持其較高的飼用價(jià)值。本研究旨在通過(guò)制作青貯苜蓿飼料,分析其主要微生物組成,根據(jù)分析結(jié)果從中篩選青貯苜蓿的主要發(fā)酵菌種,選取青貯苜蓿的優(yōu)勢(shì)菌種調(diào)制高水分青貯苜蓿,評(píng)估菌種和不同組合比例對(duì)青貯苜蓿品質(zhì)的影響。試驗(yàn)首先采用半干青貯技術(shù)調(diào)制青貯苜蓿并對(duì)其評(píng)分,根據(jù)宏基因組測(cè)序技術(shù)對(duì)青貯苜蓿中的微生物種群數(shù)量和群落組成進(jìn)行分析。根據(jù)分析結(jié)果利用MRS、NA、LB、PDA以及麥?zhǔn)吓囵B(yǎng)基,采用好氧和厭氧兩種培養(yǎng)方式從天然青貯苜蓿飼料中篩選微生物菌種;對(duì)篩選到的微生物菌種進(jìn)行形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)的鑒定確定其種屬。結(jié)果表明:在感官評(píng)分為優(yōu)良的半干青貯苜蓿中,主要微生物群落（鑒定到屬的水平）為海洋桿菌屬（oceanobacillus）、乳桿菌屬（Lactobacillis）和芽孢桿菌屬（Bacillis）,分別占到24.9%、14.3%、13.9%。在37℃有氧和厭氧條件下以不同培養(yǎng)基共分離出30株菌株,經(jīng)過(guò)形態(tài)學(xué)和保守序列比對(duì)確定,其中15株為植物乳桿菌（L.plantarum）,8株為枯草芽孢桿菌（B.subtilis）;2株地衣芽孢... 

【文章來(lái)源】：河南科技大學(xué)河南省

【文章頁(yè)數(shù)】：54 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

技術(shù)路線圖

GC 含量值為 38.2%。 宏基因組文庫(kù)物種信息分析結(jié)果利用宏基因組測(cè)序技術(shù)測(cè)定青貯苜蓿中微生物群落，經(jīng)相似性比對(duì)，相 95%的基因共有 53587 個(gè)。他們分為 18 個(gè)門，28 個(gè)綱，59 個(gè)目，87 個(gè)7 個(gè)屬和 672 個(gè)微生物種群。采用 mothur 軟件平臺(tái)對(duì)基因豐度>0.1%的行分析，結(jié)果用可視化圖片進(jìn)行展現(xiàn)，如圖 2-1，厚壁菌門（Firmicute基因豐度可達(dá) 99.4%，為主要優(yōu)勢(shì)微生物群落。測(cè)序獲得基于目水平的群落數(shù)為 51822 個(gè)，主要以芽孢桿菌目（Bacillales）和乳酸菌目（Lactobac主，分別占到目水平微生物群落總數(shù)的 64.5%和 18.9%。基于屬的水平的微生物群落總數(shù)為 43502 個(gè)，其主 要微生物群落為海洋桿ceanobacillus)、乳桿菌屬、芽孢桿菌屬、枝芽孢桿菌屬（Virgibacillus）、屬（Lactococcus）以及部分梭菌屬（clostridium）等。其所占比例分別達(dá).9%、14.3%、13.9%、13.2%、5.8%、4.1%。

河南科技大學(xué)碩士學(xué)位論文3.2.2 菌株的菌落特征鑒定結(jié)果從青貯苜蓿中分離出的菌株 MRS1~13、MC1~3 以及 NA1 的菌落特征為圓形、邊緣整齊、表面光滑、中央凸起的乳白色單菌落（圖 3-1-A）。菌株 P5、P8、LB2、LB5、LB6 菌落表面不光滑，邊緣不整齊，有明顯的皺褶（圖 3-1-B）。菌株 P1~P4、P6、P7、LB7 和 NA3 的菌落成白色，邊緣不整齊，表面不光滑，有突起的皺褶（圖 3-1-C）。

【參考文獻(xiàn)】：
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