為了研究重組雞α干擾素/白細胞介素-2融合蛋白（rChIFN-α-Linker-ChIL-2，重組融合蛋白）在雞體外的生物學活性及在雞體內的最佳使用劑量，從而為重組融合蛋白作為抗病毒制劑和免疫增強劑在臨床上推廣應用提供科學依據(jù)，本研究采用夾心ELISA方法分別檢測重組融合蛋白與抗rChIFN-和rChIL-2單抗發(fā)生特異性免疫反應的活性；采用50%細胞病變抑制法進行了重組融合蛋白和rChIFN-蛋白對照在CEF細胞上抗水泡性口炎病毒（VSV）和傳染性法氏囊病病毒（IBDV） LX強毒株的活性比較研究；采用MTS法進行了重組融合蛋白和rChIFN-α在體外促外周血T淋巴細胞（PBLC）和脾臟淋巴細胞增殖活性實驗。將IBDV LX強毒株人工感染37日齡SPF雞，同時分別選取在CEF細胞上抗VSV活性單位為200IU、1000IU、3000IU、5000IU的重組融合蛋白和rChIFN-蛋白采用注射方式進行雞體內活性比較實驗，以篩選重組融合蛋白和rChIFN-蛋白在雞體內發(fā)揮最佳抗病毒和免疫增強活性的使用劑量；分別通過臨床觀察、檢測攻毒前和攻毒后（dpc）不同時間雞體的排毒率、IBDV在不同... 

【文章來源】：河南科技大學河南省

【文章頁數(shù)】：95 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

rChIFN-蛋白陽性對照與抗ChIFN-單抗反應的ELISA檢測標準曲線

圖 2-1 rChIFN- 蛋白陽性對照與抗 ChIFN- 單抗反應的 ELISA 檢測標準曲線Fig. 2-1 The ELISA detection standard curve of the 2×serial dilution of recombinant chickenpositive control2. 重組融合蛋中 rChIL-2 的定量重組融合蛋白和標準品蛋白都可以和 rChIL-2 單抗反應，測定重組融的 OD450值為 0.637，依據(jù)試劑盒中 rChIL-2 蛋白標準品對照曲線及其標函數(shù)公式 y=43.29x2+161.12x-14.236，計算重組融合蛋白中 rChIL-2 蛋白含量約為 1.06×103pg.mL-1（圖 2-2）。說明重組融合蛋白中的 rChIL-2 具rChIL-2 單抗發(fā)生特異性免疫反應的生物學活性。

0204060801001201400dpc 3dpc 7dpc 14dpc 21dpc 28dpc食量采（g）nIaket fo fodo攻毒后時間（d）Days post challenge200IU第1組第2組第3組第4組第11組第12組圖 3-1 200IU 的重組融合蛋白和 rChIFN- 蛋白實驗組雞攻毒后不同時間采食量變化.3-1 The chickens feed intake changes at different days before and after inoculated by IBDV and 200IrChIFN- -Linker-rChIL-2 complex protein or rChIFN- protein

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3609736