高致病性H5和H7亞型禽流感的暴發(fā)不僅給養(yǎng)禽業(yè)造成重大損失,也給人類的生命健康構(gòu)成嚴重威脅,而疫苗免疫是預防禽流感的主動措施、關(guān)鍵環(huán)節(jié)和最后防線。因此,為了防止H5和H7亞型禽流感在中國的肆虐,重組禽流感病毒（H5+H7）二價滅活疫苗（H5N1 Re-8株+H7N9H7-Re1株）于2017年在養(yǎng)殖場中廣泛應(yīng)用。但是,2017年底以來的全國禽流感流行病學調(diào)查結(jié)果顯示,我國H5亞型禽流感病毒以2.3.2.1和2.3.4.4分支為主,并且2.3.4.4d分支和2.3.2.1d分支病毒已成為當前威脅我國養(yǎng)禽業(yè)的主要流行株。進一步的抗原性分析和攻毒試驗結(jié)果表明,Re-8株疫苗株與2018年分離到的2.3.4.4d和2.3.2.1d分支代表病毒株均存在較大抗原性差異,并且在臨床上所使用的二價滅活疫苗不能對當時流行的H5亞型高致病性禽流感病毒提供完全保護作用,因此需要將H5N1 Re-8株疫苗種毒進行更新。此外,H7N9 H7-Re1株與分離到的部分H7N9病毒的抗原性差異較大,并且這種差異還在不斷增加,因此將H7N9 H7-Re1株疫苗種毒一并進行更新。本研究將構(gòu)建的H5亞型Re-11株、Re-... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學院北京市

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

種毒免疫原性HI抗體測定結(jié)果

中國農(nóng)業(yè)科學院碩士學位論文第三章重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗的實驗室研究25擾。圖3-1不同滅活疫苗免疫后HI抗體測定結(jié)果Fig3-1HIantibodytitersafterimmunizationwithdifferentvaccines3.3.2成品物理性狀的檢驗對制備的3批（20180322、20180326、20180329）三價滅活疫苗進行物理性狀檢驗，結(jié)果表明，3批疫苗均為乳白色均勻乳劑，油包水型，離心后管底無水量析出，具有較好的穩(wěn)定性，黏度分別在65.3cp、66.5cp、68.6cp之間，符合黏度低于200cp的標準。詳見表3-1。表3-13批三價滅活疫苗性狀檢驗結(jié)果Table3-1Theresultsofthreebatchesoftrivalentvaccine疫苗批次外觀劑型穩(wěn)定性黏度（cp）20180322乳白色均勻乳劑油包水型無水析出66.520180326乳白色均勻乳劑油包水型無水析出68.620180329乳白色均勻乳劑油包水型無水析出65.33.3.33批三價滅活疫苗安全性試驗將各疫苗以2mL/只的劑量免疫SPF雞、SPF鴨和商品鵝后，均觀察14d，各免疫禽免疫部位無炎癥反應(yīng)，疫苗吸收良好，僅有少量殘留，采食、飲水和精神狀態(tài)均正常，無不良臨床癥狀。3.3.43批三價滅活疫苗免疫效力試驗3.3.4.13批三價滅活疫苗對雞的免疫效力評估3批三價滅活疫苗（20180322、20180326、20180329）以0.3mL/只的劑量免疫3周齡SPF雞，免疫后3周測所有免疫雞的HI抗體效價。結(jié)果表明，免疫3批滅活疫苗3周時的SPF雞的H5

中國農(nóng)業(yè)科學院碩士學位論文第三章重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗的實驗室研究26亞型Re-11株HI抗體效價平均值分別為8.0log2、7.8log2和8.1log2，Re-12株HI抗體效價平均值分別為7.9log2、7.7log2和7.7log2，H7-Re2株HI抗體效價平均值分別為8.2log2、7.9log2和8.0log2，詳情見圖3-2。分別用3株高致病性親本毒株進行攻毒，結(jié)果表明，免疫組雞均健活，病毒分離陰性數(shù)均為10/10；對照組全部發(fā)并死亡，而且10/10病毒分離陽性，詳情見表3-2。圖3-2SPF雞免疫3批滅活疫苗抗體測定結(jié)果Fig3-2TheantibodytestresultsofSPFchickensimmunizedwith3batchesofvaccine表3-23批滅活疫苗免疫SPF雞后攻毒結(jié)果Table3-2ThechallengetestresultsofSPFchickensimmunizedwith3batchesofvaccine注：“*”表示雞死亡。疫苗批次（接種方式）攻毒毒株攻毒后3d和5d排毒率保護數(shù)/存活數(shù)/總數(shù)3d喉頭3d泄殖腔5d喉頭5d泄殖腔20180322（頸部皮下）DK/GZ/S4184/17(H5N6)0/100/100/100/1010/10/10CK/LN/SD007/17(H5N1)0/100/100/100/1010/10/10CK/GX/SD098/17(H7N9)0/100/100/100/1010/10/1020180326（頸部皮下）DK/GZ/S4184/17(H5N6)0/100/100/100/1010/10/10CK/LN/SD007/17(H5N1)0/100/100/100/1010/10/10CK/GX/SD098/17(H7N9)0/100/100/100/1010/10/1020180329（肌肉注射）DK/GZ/S4184/17(H5N6)0/100/100/100/1010/10/10CK/LN/SD007/17(H5N1)0/100/100/100/1010/10/10CK/GX/SD098/17(H7N9)0/100/100/100/1010/10/10PBS（對照組）DK/GZ/S4184/17(H5N6)10/1010/10/*/*0/0/10CK/LN/SD007/17(H5N1)10/1010/10/*/*0/0/10CK/GX/SD098/17(H7N9)10/1010/10/*/*0/0/10

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3609191