本研究從IFI204^-/-（干擾素活化基因204缺失）小鼠的糞便中分離得到嗜黏蛋白阿克曼菌（Akkermansia muciniphila,AKK）,探討其在預(yù)防小鼠和比格犬肥胖中的作用,并研制嗜黏蛋白阿克曼菌微膠囊,為其應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。本實(shí)驗(yàn)室前期發(fā)現(xiàn)IFI204^-/-小鼠腸道中嗜黏蛋白阿克曼菌豐度遠(yuǎn)高于野生型對照小鼠,結(jié)合PCR鑒定,本試驗(yàn)從IFI204^-/-小鼠糞便中分離出2株嗜黏蛋白阿克曼菌（編號為AKK1、AKK2）�；�16S rRNA序列構(gòu)建了系統(tǒng)發(fā)育樹,在NCBI中BLAST比對結(jié)果顯示AKK1和AKK2分離株與GenBank中已收錄的Akkermansia muciniphila處于同一分支,是嗜黏蛋白阿克曼菌。隨后,對其進(jìn)行了生物學(xué)基本特性分析,包括生長曲線和穩(wěn)定性分析。發(fā)現(xiàn)其對數(shù)期在72 h左右,且AKK2的峰值略高,達(dá)到1.6×10⁸ CFU/mL;耐受性檢測表明,AKK2的耐酸性強(qiáng)于AKK1;后續(xù)實(shí)驗(yàn)選取對數(shù)期活菌數(shù)高,更耐酸的AKK2作為供試菌株。最近的研究表明,70℃30... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：100 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

疑似嗜黏蛋白阿克曼菌培養(yǎng)菌落觀察

第二篇研究內(nèi)容第1章嗜黏蛋白阿克曼氏菌的分離鑒定30圖1.2疑似嗜黏蛋白阿克曼菌PCR凝膠電泳圖M：DL2000DNAMarker；1-17：PCR凝膠電泳檢測疑似樣品Fig.1.2ThePCRgelelectrophoresisofsuspectedAkkermansiamuciniphilaM:DL2000DNAMarker1-17:IdentificationofsuspectedAkkermansiamuciniphilabyPCRgelelectrophoresis如圖1.3所示，疑似嗜黏蛋白阿克曼菌經(jīng)過反復(fù)劃線純培養(yǎng)傳代后，在BHI固體培養(yǎng)基的菌落形態(tài)為灰白色半透明，表面光滑，中間隆起，邊緣整齊的微小圓形菌落。圖1.3疑似嗜黏蛋白阿克曼菌BHI固體培養(yǎng)基的菌落觀察（A-B）純化后的疑似嗜黏蛋白阿克曼菌形態(tài)學(xué)觀察Fig.1.3TheobservationofsuspectedAkkermansiamuciniphilaonBHIagarplate(A-B)TheobservationofdifferentpurifiedsuspectedAkkermansiamuciniphilaisolates1.3.2嗜黏蛋白阿克曼菌革蘭氏染色如圖1.4所示，在100倍的油鏡下觀察到疑似嗜黏蛋白阿克曼菌株呈紅色短桿狀，為革蘭氏陰性菌。圖1.4疑似嗜黏蛋白阿克曼菌革蘭氏染色結(jié)果（1000×）Fig.1.4GramstrainofsuspectedAkkermansiamuciniphila(1000×)

第二篇研究內(nèi)容第1章嗜黏蛋白阿克曼氏菌的分離鑒定30圖1.2疑似嗜黏蛋白阿克曼菌PCR凝膠電泳圖M：DL2000DNAMarker；1-17：PCR凝膠電泳檢測疑似樣品Fig.1.2ThePCRgelelectrophoresisofsuspectedAkkermansiamuciniphilaM:DL2000DNAMarker1-17:IdentificationofsuspectedAkkermansiamuciniphilabyPCRgelelectrophoresis如圖1.3所示，疑似嗜黏蛋白阿克曼菌經(jīng)過反復(fù)劃線純培養(yǎng)傳代后，在BHI固體培養(yǎng)基的菌落形態(tài)為灰白色半透明，表面光滑，中間隆起，邊緣整齊的微小圓形菌落。圖1.3疑似嗜黏蛋白阿克曼菌BHI固體培養(yǎng)基的菌落觀察（A-B）純化后的疑似嗜黏蛋白阿克曼菌形態(tài)學(xué)觀察Fig.1.3TheobservationofsuspectedAkkermansiamuciniphilaonBHIagarplate(A-B)TheobservationofdifferentpurifiedsuspectedAkkermansiamuciniphilaisolates1.3.2嗜黏蛋白阿克曼菌革蘭氏染色如圖1.4所示，在100倍的油鏡下觀察到疑似嗜黏蛋白阿克曼菌株呈紅色短桿狀，為革蘭氏陰性菌。圖1.4疑似嗜黏蛋白阿克曼菌革蘭氏染色結(jié)果（1000×）Fig.1.4GramstrainofsuspectedAkkermansiamuciniphila(1000×)


本文編號：3604646