豬流行性腹瀉病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）是引起仔豬腹瀉的主要病原之一,主要通過吸附于腸道上皮細(xì)胞進(jìn)行感染。各年齡階段的豬均可感染,對幼齡仔豬危害最為嚴(yán)重,隨著日齡的增長致死率降低。仔豬感染PEDV后,出現(xiàn)以水樣腹瀉、嘔吐和脫水為主要特征的臨床癥狀。PEDV感染可刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)引起免疫應(yīng)答,其中分泌型Ig A（secretory Ig A,SIg A）是腸道粘膜中主要的效應(yīng)分子之一,在粘膜免疫中發(fā)揮重要作用。SIg A分子由分泌成分（secretory component,SC）、兩分子Ig A和連接鏈（Joining Chain,J）構(gòu)成。與血清Ig A和二聚體Ig A（dimer Ig A,d Ig A）相比,SC是SIg A的特有組成成分,因此檢測SC可以較好反映體內(nèi)SIg A的水平。目前PEDV的檢測方法主要有病毒分離、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）、間接免疫熒光（indirect immuninofluorescence,IFA）、病毒中和試驗(yàn)以及PCR等,... 

【文章來源】：黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)黑龍江省

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

PEDV基因組結(jié)構(gòu)（Song，2012）

因此局部粘膜免疫是機(jī)體防御病原體線[60]，具有十分重要的作用。在粘膜免疫反omasi 等人首先在人體的外分泌液中發(fā)現(xiàn)將其命名為 SIgA[61]。SIgA 主要存在于乳汁生的外分泌液中。固有層漿細(xì)胞產(chǎn)生和釋放的抗體，它調(diào)控一條 J 鏈和一個分泌成分 SC 組成的，其結(jié)連接在一起，形成 dIgA，SC 纏繞在 dIgA粘膜上發(fā)揮作用。

分別為 1.5 mg/mL，1 mg/mL，0.75 mg/mL，0.5 mg/mL。確定 T 線和 C 線最佳噴濃度。2.2.13 膠體金試紙條的組裝膠體金試紙條主要由 PVC 底板、硝酸纖維素膜（NC 膜）、樣品墊、金標(biāo)墊和吸水五部分組成，組裝圖如 4-1 所示。暴露 PVC 底板的粘面后先將 NC 膜粘在 PVC 底板上金標(biāo)墊和吸水墊分別置于 NC 膜的兩端，且與 NC 膜兩端各有 1 mm 的重疊，樣品墊置金標(biāo)墊的另一側(cè)，與金標(biāo)墊有 1 mm 的重疊。其中 NC 膜上劃有 T 線（噴涂 PEDV）和線（噴涂 SPA）。滴加陽性樣品后，樣品中的 SIgA 經(jīng)層析作用向吸水墊方向流動，在標(biāo)墊處與金標(biāo)抗體結(jié)合物結(jié)合，形成 SIgA-金標(biāo)抗體三者結(jié)合的復(fù)合物，該復(fù)合物經(jīng)層作用到達(dá)檢測線，與 PEDV 作用后形成肉眼可見的紅條帶。未結(jié)合 SIgA 的金標(biāo)抗體結(jié)物在質(zhì)控線處與 SPA 結(jié)合，出現(xiàn)肉眼可見的紅條帶。膠體金的 T 線、C 線的噴涂以及膠體金試紙條的組裝由公司完成。

【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
[1]芘和萘單克隆抗體的制備及免疫檢測技術(shù)的研究[D]. 孟星宇.吉林大學(xué) 2015

碩士論文
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本文編號：3599295