豬流行性腹瀉病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）是引起仔豬腹瀉的主要病原之一,主要通過(guò)吸附于腸道上皮細(xì)胞進(jìn)行感染。各年齡階段的豬均可感染,對(duì)幼齡仔豬危害最為嚴(yán)重,隨著日齡的增長(zhǎng)致死率降低。仔豬感染PEDV后,出現(xiàn)以水樣腹瀉、嘔吐和脫水為主要特征的臨床癥狀。PEDV感染可刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)引起免疫應(yīng)答,其中分泌型Ig A（secretory Ig A,SIg A）是腸道粘膜中主要的效應(yīng)分子之一,在粘膜免疫中發(fā)揮重要作用。SIg A分子由分泌成分（secretory component,SC）、兩分子Ig A和連接鏈（Joining Chain,J）構(gòu)成。與血清Ig A和二聚體Ig A（dimer Ig A,d Ig A）相比,SC是SIg A的特有組成成分,因此檢測(cè)SC可以較好反映體內(nèi)SIg A的水平。目前PEDV的檢測(cè)方法主要有病毒分離、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）、間接免疫熒光（indirect immuninofluorescence,IFA）、病毒中和試驗(yàn)以及PCR等,... 

【文章來(lái)源】：黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)黑龍江省

【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

PEDV基因組結(jié)構(gòu)（Song，2012）

因此局部粘膜免疫是機(jī)體防御病原體線[60]，具有十分重要的作用。在粘膜免疫反omasi 等人首先在人體的外分泌液中發(fā)現(xiàn)將其命名為 SIgA[61]。SIgA 主要存在于乳汁生的外分泌液中。固有層漿細(xì)胞產(chǎn)生和釋放的抗體，它調(diào)控一條 J 鏈和一個(gè)分泌成分 SC 組成的，其結(jié)連接在一起，形成 dIgA，SC 纏繞在 dIgA粘膜上發(fā)揮作用。

分別為 1.5 mg/mL，1 mg/mL，0.75 mg/mL，0.5 mg/mL。確定 T 線和 C 線最佳噴濃度。2.2.13 膠體金試紙條的組裝膠體金試紙條主要由 PVC 底板、硝酸纖維素膜（NC 膜）、樣品墊、金標(biāo)墊和吸水五部分組成，組裝圖如 4-1 所示。暴露 PVC 底板的粘面后先將 NC 膜粘在 PVC 底板上金標(biāo)墊和吸水墊分別置于 NC 膜的兩端，且與 NC 膜兩端各有 1 mm 的重疊，樣品墊置金標(biāo)墊的另一側(cè)，與金標(biāo)墊有 1 mm 的重疊。其中 NC 膜上劃有 T 線（噴涂 PEDV）和線（噴涂 SPA）。滴加陽(yáng)性樣品后，樣品中的 SIgA 經(jīng)層析作用向吸水墊方向流動(dòng)，在標(biāo)墊處與金標(biāo)抗體結(jié)合物結(jié)合，形成 SIgA-金標(biāo)抗體三者結(jié)合的復(fù)合物，該復(fù)合物經(jīng)層作用到達(dá)檢測(cè)線，與 PEDV 作用后形成肉眼可見(jiàn)的紅條帶。未結(jié)合 SIgA 的金標(biāo)抗體結(jié)物在質(zhì)控線處與 SPA 結(jié)合，出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的紅條帶。膠體金的 T 線、C 線的噴涂以及膠體金試紙條的組裝由公司完成。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]膠體金免疫層析技術(shù)在獸醫(yī)領(lǐng)域的應(yīng)用[J]. 呂春華,舒展,漆月,黃楊波.  中國(guó)畜禽種業(yè). 2015(11)
[2]我國(guó)豬病毒性腹瀉的診斷與流行病學(xué)調(diào)查研究概況[J]. 楊麗梅,馬力,徐倩倩,王艷,張穎,郭時(shí)金,沈志強(qiáng),王艷萍,張志美.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2014(02)
[3]膠體金免疫層析技術(shù)在臨床疾病診斷中的研究進(jìn)展[J]. 林一民,王云龍,胡永芳,吳立翔.  重慶醫(yī)學(xué). 2013(01)
[4]豬初乳中SIgA純化及其單抗制備[J]. 馮志新,王海燕,劉茂軍,甘源,吳敘蘇,邵國(guó)青.  江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2011(05)
[5]豬偽狂犬病病毒gE抗體膠體金免疫層析檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用[J]. 廖文軍,吳健敏,譚攀,覃紹敏,陳鳳蓮,馬玲,張偉.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2010(09)
[6]檢測(cè)豬瘟病毒野毒株膠體金免疫層析方法的建立[J]. 王向鵬,孫元,楊增岐,仇華吉.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2010(06)
[7]檢測(cè)豬圓環(huán)病毒2型抗體SPA膠體金免疫層析方法的建立[J]. 范曉娟,李剛,史利軍,張錦秀,李偉.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2009(07)
[8]膠體金免疫層析法檢測(cè)豬鏈球菌2型的研究[J]. 鞠瑩,熊?chē)?guó)華,曹遠(yuǎn)銀.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2009(10)
[9]膠體金免疫層析法檢測(cè)豬PRVgE抗體方法的建立及應(yīng)用[J]. 白靜,于新和,邊傳周.  河南科技學(xué)院學(xué)報(bào). 2009(01)
[10]口蹄疫病毒O、A、AsiaⅠ型定型診斷膠體金免疫層析方法的建立[J]. 蔣韜,梁仲,陳涓,何繼軍,呂律,馬維民,劉在新,劉湘濤.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(11)

博士論文
[1]芘和萘單克隆抗體的制備及免疫檢測(cè)技術(shù)的研究[D]. 孟星宇.吉林大學(xué) 2015

碩士論文
[1]豬瘟病毒抗體膠體金免疫層析快速檢測(cè)試紙條的研制及初步應(yīng)用[D]. 尹梅.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]豬瘟C株單克隆抗體制備和豬瘟膠體金快速診斷試紙條的研制[D]. 楊明.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[3]A群輪狀病毒單克隆抗體及免疫膠體金試紙條制備[D]. 崔曉辰.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3599295