雞傳染性貧血病毒（chicken infectious anemia virus，CIAV）是引起家禽免疫抑制病的一種重要病原體。該病在世界主要養(yǎng)禽國(guó)家都有報(bào)道,已在世界范圍內(nèi)廣泛分布,給養(yǎng)禽業(yè)帶來(lái)巨大經(jīng)濟(jì)損失。本論文就雞傳染性貧血病毒的分離鑒定及CIAV-CZC1602的全基因測(cè)序、雞傳染性貧血病毒VP3蛋白原核表達(dá)載體的構(gòu)建以及抗CIAV-VP3蛋白單克隆抗體的研制三個(gè)方面展開(kāi)研究,對(duì)CIAV流行規(guī)律、遺傳變異以及檢測(cè)方法建立具有重要意義。1、雞傳染性貧血病毒的分離鑒定以及CIAV-CZC1602株的遺傳演化分析本研究對(duì)江蘇地區(qū)養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)發(fā)生的疑似雞傳染性貧血病毒（CIAV）感染病例以及疑似污染有CIAV的疫苗進(jìn)行檢測(cè)與診斷。首先對(duì)送檢病例及疫苗進(jìn)行了 CIAV病毒特異性DNA片段的PCR擴(kuò)增。然后將PCR陽(yáng)性組織樣品及疫苗樣品處理后接種CIAV易感細(xì)胞MDCC-MSB1細(xì)胞進(jìn)行了病毒分離。成功分離到了四株CIAV病毒,分別命名為CIAV-CZC1602,CIAV-LHC1710,CIAV-HJC1709 和 CIAV-YC1711。同時(shí)為了解 CIAV 分離株的全基因變異情況,對(duì)C... 

【文章來(lái)源】：揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：79 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１雞傳染性貧血病毒電鏡照片??Ｆｉｇｕｒｅ?１?Ｅｌｅｃｔｒｏｎ?ｍｉｃｒｏｇｒａｐｈ?ｏｆ?ｃｈｉｃｋｅｎ?ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ?ａｎｅｍｉａ?ｖｉｒｕｓ??

?？＜—３６６ｂｐ??２５０ｂｐ?■■??圖１－１邗江，六合，疫苗ＰＣＲ檢測(cè)結(jié)果?圖１－２常州ＰＣＲ檢測(cè)結(jié)果??Ｆｉｇｕｒｅ?１－１?Ｈａｎｊｉａｎｇ，?Ｌｉｕｈｅ，?ｖａｃｃｉｎｅ?ＰＣＲ?ｔｅｓｔ?ｒｅｓｕｌｔｓ?Ｆｉｇｕｒｅ?１－２?Ｃｈａｎｇｚｈｏｕ?ＰＣＲ?ｔｅｓｔ?ｒｅｓｕｌｔｓ??１：陽(yáng)性；２：邗江病料；３：六合病料；?Ｍ：?ＤＬ２０００；?１．？常州病料；??４：疫苗毒；５：陰性?２＿＿陽(yáng)性；３：陰性??３．２細(xì)胞病毒分離結(jié)果??

３．３細(xì)胞病變結(jié)果??通過(guò)顯微鏡對(duì)接毒后的細(xì)胞進(jìn)行觀察發(fā)現(xiàn)，剛開(kāi)始的細(xì)胞病變并不是十分明顯，只有??部分細(xì)胞現(xiàn)腫大變圓的形態(tài)特征（如圖１－７紅色箭頭所示），而未感染的正常細(xì)胞呈的為圓??潤(rùn)形態(tài)（如圖１－７黑色箭頭所示）。??３．４全基因擴(kuò)增結(jié)果??將提取的ＣＩＡＶ－ＣＺＣ１６０２基因組，分別用合成的三段引物進(jìn)行擴(kuò)增，片段１擴(kuò)增片??段大小約為１００４ｂｐ，片段２擴(kuò)增片段大小約為１０３９ｂｐ，片段３擴(kuò)增片段大小為６０２ｂｐ，??擴(kuò)增產(chǎn)物與預(yù)期大小一致（如圖１－８所示）。??■邏??圖１－７細(xì)胞病變結(jié)果?圖１－８三個(gè)片段ＰＣＲ擴(kuò)增結(jié)果??Ｆｉｇｕｒｅ?１－７?ｔｈｅ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?Ｃｅｌｌｕｌａｒ?ｌｅｓｉｏｎ?Ｆｉｇｕｒｅ?１－８?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｔｈｒｅｅ?ｆｒａｇｍｅｎｔｓ??Ｍ：?ｌｋｂＤＮＡＬａｄｄｅｒ；?１：片段?１?（１００４ｂｐ）；??２：片段?２?（１０３９ｂｐ）；?３：片段?３?（６０２ｂｐ）??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]雞傳染性貧血病毒衣殼蛋白的截短表達(dá)及其兔抗血清制備[J]. 孫芬芬,高玉龍,潘偉,王笑梅.  江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(17)
[2]不同分子生物學(xué)方法檢測(cè)雞傳染性貧血病病毒的比較分析[J]. 張玉標(biāo),李曉晗,孟凡峰,董桂偉,任衍倍,崔治中,常爽,趙鵬.  中國(guó)家禽. 2018(07)
[3]雞傳染性貧血病病毒在MDCC-MSB1細(xì)胞的傳代致弱研究[J]. 李鴻鑫,吳波良,張新珩,楊瑞杰,藺文成,陳偉國(guó),謝青梅.  中國(guó)家禽. 2017(15)
[4]雞傳染性貧血病病毒與三種致家禽腫瘤病毒混合感染的流行病學(xué)研究[J]. 王仙,閆彩虹,羊揚(yáng),金文杰.  中國(guó)家禽. 2017(13)
[5]家禽活疫苗中雞傳染性貧血病毒PCR檢測(cè)方法的建立[J]. 邵紅霞,王平平,武敏,金文杰,錢琨,秦愛(ài)建.  中國(guó)家禽. 2012(21)
[6]一種載體構(gòu)建的新方法:一步克隆法[J]. 歐陽(yáng)平,李玉,嚴(yán)紅,馬立新.  湖北大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2007(02)
[7]雞傳染性貧血病毒VP3蛋白單克隆抗體的制備[J]. 陸桂麗,高玉龍,高宏雷,冉多良,王笑梅.  中國(guó)生物工程雜志. 2006(09)
[8]免疫抑制雞群雞傳染性貧血病毒和網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥病毒共感染檢測(cè)[J]. 吉榮,劉岳龍,秦愛(ài)建,丁家波,金文杰,趙文明,崔治中,段素華,高海萍,韓方偉.  中國(guó)獸藥雜志. 2001(04)
[9]PCR和斑點(diǎn)雜交檢測(cè)雞傳染性貧血病毒[J]. 劉岳龍,崔治中,段玉友.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 1996(01)
[10]雞傳染性貧血病病毒的鑒定[J]. 崔現(xiàn)蘭,幸桂香,吳東來(lái),馮菊艷,李鋒,曲立新.  中國(guó)畜禽傳染病. 1992(06)

碩士論文
[1]一株雞傳染性貧血病毒野毒株致病性及其全基因組序列比較[D]. 李延鵬.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



本文編號(hào)：3598483