本研究通過構(gòu)建轉(zhuǎn)A-FABP基因小鼠模型，來測定A-FABP基因在小鼠體內(nèi)表達量,檢測A-FABP基因?qū)π∈蟾鹘M織內(nèi)脂肪沉積量以及對其他功能基因組的影響。通過轉(zhuǎn)基因小鼠與野生型小鼠之間的比較，來研究FABP基因?qū)π∈笾境练e及生長發(fā)育指標的影響，為今后轉(zhuǎn)基因動物的建立提供科學依據(jù)。本實驗首先構(gòu)建了牛A-FABP基因超表達載體并將這個載體轉(zhuǎn)入小鼠體內(nèi)。超表達載體是對載體pEGFP-c1進行HindIII/BamHI雙酶切，在酶切位點處插入優(yōu)化過的牛的A-FABP基因，處理后的載體經(jīng)線性化后通過原核顯微注射技術(shù)導入FVB小鼠受精卵內(nèi)，從而得到轉(zhuǎn)A-FABP基因小鼠。在得到轉(zhuǎn)A-FABP基因小鼠模型后通過對小鼠親代及其后代F1、F2、F3代小鼠生長發(fā)育指標、血清生化指標、傅里葉紅外光譜分析、轉(zhuǎn)基因小鼠組織切片、A-FABP蛋白含量、A-FABP基因表達量等方面的測定來驗證A-FABP基因的功能特性。本實驗結(jié)果表明：1.根據(jù)對轉(zhuǎn)A-FABP基因小鼠DNA和RNA水平的檢測以及基因表達量的檢測結(jié)果可以看出FBAP基因在小鼠體內(nèi)能夠穩(wěn)定表達；2.根據(jù)對轉(zhuǎn)FABP基因小鼠生長發(fā)育指標的檢測，可以看出... 

【文章來源】：天津農(nóng)學院天津市

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 引言
    1.動物轉(zhuǎn)基因技術(shù)的研究進展
        1.1 主要的動物轉(zhuǎn)基因技術(shù)研究進展
            1.1.1 顯微注射技術(shù)
            1.1.2 精子載體法
            1.1.3 逆轉(zhuǎn)錄病毒載體法
            1.1.4 體細胞核移植法
        1.2 動物轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應用現(xiàn)狀
            1.2.1 生物制藥
            1.2.2 動物模型
            1.2.3 器官移植
            1.2.4 培育優(yōu)良品種
    2.FABP 基因的研究進展
        2.1 FABP 基因概況
        2.2 FABP 基因的定位、結(jié)構(gòu)以及蛋白質(zhì)特性
        2.3 A-FABP 基因的功能
            2.3.1 A-FABP 與脂類代謝的關系
            2.3.2 A-FABP 與代謝綜合征的關系
            2.3.3 A-FABP 與二型糖尿病的關系
            2.3.4 A-FABP 與炎癥的關系
    3.關于轉(zhuǎn)入基因的檢測與評價方法
        3.1 組織樣化學組成的檢測
        3.2 轉(zhuǎn)基因小鼠組織樣的顯微結(jié)構(gòu)分析
    4.本研究的目的及意義
第二章 FABP 轉(zhuǎn)基因小鼠模型的建立及鑒定
    1.實驗材料和方法
        1.1 實驗材料
            1.1.1 主要試劑
            1.1.2 序列合成
            1.1.3 主要儀器和設備
            1.1.4 實驗動物
        1.2 方法
            1.2.1 轉(zhuǎn) FABP 基因小鼠模型的建立
            1.2.2 轉(zhuǎn) FABP 基因小鼠 DNA 水平的鑒定
            1.2.3 轉(zhuǎn) FABP 基因小鼠 RNA 水平的鑒定
            1.2.4 轉(zhuǎn)基因小鼠繁殖性能的檢測
            1.2.5 轉(zhuǎn) FABP 基因小鼠內(nèi) FABP 基因定量
    2.結(jié)果與討論
        2.1 轉(zhuǎn)基因小鼠的鑒定
        2.2 轉(zhuǎn)基因小鼠繁殖性能的檢測
        2.3 轉(zhuǎn)基因小鼠 FABP 基因表達量的檢測
        2.4 討論
第三章 生長發(fā)育指標的檢測
    1.實驗材料和方法
        1.1 實驗材料
            1.1.1 主要試劑
            1.1.2 主要儀器和設備
            1.1.3 實驗動物
        1.2 實驗方法
            1.2.1 生長發(fā)育、繁殖指標和生化指標的測定
            1.2.2 組織樣化學成分的分析
            1.2.3 轉(zhuǎn)基因小鼠組織樣的顯微結(jié)構(gòu)分析
    2.結(jié)果與討論
        2.1 結(jié)果
            2.1.1 轉(zhuǎn)基因小鼠的生長繁殖情況的測定
            2.1.2 小鼠體重的測量及腹脂率的測量
            2.1.3 小鼠生化指標的測量
            2.1.4 轉(zhuǎn)基因小鼠組織樣的顯微結(jié)構(gòu)分析
            2.1.5 組織樣化學成分分析
        2.4 討論
第四章 A-FABP 基因?qū)π∈篌w內(nèi)脂肪沉積的影響
    1.實驗材料和方法
        1.1 實驗材料
            1.1.1 主要試劑
            1.1.2 主要儀器和設備
            1.1.3 實驗動物
        1.2 實驗方法
            1.2.1 FABP 蛋白的檢定
            1.2.2 甘油三酯的測定
    2.結(jié)果與討論
        2.1 結(jié)果
            2.1.1 FABP 蛋白含量的測定
            2.1.7 小鼠甘油三酯含量的測量
        2.2 討論
第五章 結(jié)論
    1.牛 A-FABP 基因超表達載體的構(gòu)建及轉(zhuǎn) A-FABP 基因小鼠模型的建立
    2.對轉(zhuǎn) A-FABP 基因小鼠生長發(fā)育指標和生化指標的測定
    3.對轉(zhuǎn) A-FABP 基因小鼠傅里葉紅外光譜的檢測
    4.對轉(zhuǎn) A-FABP 基因小鼠脂肪沉積的檢測
    5.轉(zhuǎn) A-FABP 基因小鼠遺傳穩(wěn)定性的研究
參考文獻
附錄


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號：3597467