藍(lán)舌�。˙luetongue，BT）是由呼腸孤病毒科環(huán)狀病毒屬藍(lán)舌病病毒（BTV）引起的可感染山羊、綿羊、牛、鹿和駱駝等反芻動物的傳染病。該病可經(jīng)媒介昆蟲（如庫蠓、伊蚊等）傳播，病畜以口腔、鼻腔和胃腸道黏膜發(fā)生潰瘍性炎癥變化為特征。BTV血清型眾多，目前已至少存在26個血清型。由于BT各個血清學(xué)之間沒有交叉保護(hù)作用，因此，盡早鑒別診斷爆發(fā)的BT血清型并在該病流行區(qū)域接種相應(yīng)的疫苗是防治本病的關(guān)鍵。BTV基因組由10個雙股正鏈RNA組成，10個節(jié)段基因編碼7種結(jié)構(gòu)蛋白（VP1～VP7）和4種非結(jié)構(gòu)蛋白（NS1、NS2、NS3、NS3a）。其中VP2蛋白和VP5蛋白是BT的血清型特異性抗原。根據(jù)Genbank中BTV1L2基因序列（登錄號：JN848760.1）和M5基因序列（登錄號：JN848763.1）各設(shè)計1對引物，從感染BTV1的BHK-21細(xì)胞沉淀中提取病毒RNA，經(jīng)RT-PCR擴增L2基因和M5基因。將這兩段基因酶切后分別克隆至pMAL-c4x原核表達(dá)載體和pFastBacHTA真核表達(dá)載體，分別表達(dá)重組的VP2蛋白和VP5蛋白。分別以原核系統(tǒng)表達(dá)的VP2蛋白和VP5蛋白免疫4... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

M5、L2基因的PCR擴增Fig.2-2PCRamplificationofM5andL2gene

重組質(zhì)粒pC4X-VP2、pC4X-VP5的酶切鑒定和PCR鑒定Fig.2-3IdentificationoftherecombinantplasmidpC4X-VP5andplasmidpC4X-VP2byrestrictedenzymedigestionandPCRM:DNAMarker;1、8:pMAL-C4Xcontrol;2:pC4X-VP2;3:pMAL-C4XdigestedbyBamHⅠandHindⅢ;4:pC4X-VP2digestedbyBamHI;5:pC4X-VP2digestedbyHindⅢ;6:pC4X-VP2digestedbyBamHⅠandHindⅢ;7:Identificationofthe

重組VP2蛋白、VP5蛋白的Western-Blot分析

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]抗藍(lán)舌病病毒VP6和VP7蛋白單克隆抗體的制備及鑒定[J]. 魏鵬,孫恩成,劉霓紅,楊濤,徐青元,秦永麗,趙晶,馮瑜菲,王文世,張翠云,吳東來.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2012(05)
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碩士論文
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[2]藍(lán)舌病病毒17型VP2蛋白單克隆抗體的制備及其抗原表位的鑒定[D]. 王凌鳳.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2011
[3]西尼羅病毒NS1蛋白單克隆抗體的制備及B細(xì)胞表位鑒定[D]. 馬健男.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2010



本文編號：3595065