為研制雞Ⅰ群禽腺病毒血清4型（FAdV-4）油乳劑滅活疫苗,試驗(yàn)采用雞肝癌細(xì)胞（LMH）擴(kuò)增FAdV-4,測定FAdV-4最佳滅活條件和疫苗最佳油水比,研制了FAdV-4油乳劑滅活苗。按《中華人民共和國獸藥典》進(jìn)行疫苗質(zhì)量、安全性和臨床效力檢驗(yàn)。結(jié)果顯示:LMH細(xì)胞接種FAdV-4 72h后其毒力最高,TCID50=10-7.78/0.1mL;終濃度0.15%的甲醛溶液37℃24h可滅活FAdV-4;油水比為2∶1的疫苗性狀最穩(wěn)定,質(zhì)量和安全性檢驗(yàn)均合格;疫苗最小免疫劑量為0.4 mL/只;抗體水平在免疫后第2周開始上升,第4周達(dá)到最高,而后緩慢下降。對疫苗免疫雞14 d后注射0.2 mL FAdV-4病毒液（含10-5.78TCID50/0.1 mL）,經(jīng)14 d觀察可見雞全部存活,剖檢后無病理變化且攻毒后第3、5、7、10、14天PCR檢測均為陰性,臨床保護(hù)率為100%。研究提示:LMH細(xì)胞可有效提高FAdV-4毒價,通過優(yōu)化FAdV-4滅活條件和疫苗油水比,所研制的疫苗安全性高,保存期長,能有效預(yù)防FAdV-4感染,為雞心包積液綜合征防控提供參考。 

【文章來源】：中國家禽. 2020,42(07)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試驗(yàn)材料
    1.2 主要試劑及儀器
    1.3 FAdV-4增殖
        1.3.1 LMH細(xì)胞擴(kuò)增病毒
        1.3.2 病毒最佳收取時間測定
    1.4 引物設(shè)計(jì)與PCR擴(kuò)增
    1.5 病毒最佳滅活條件測定
    1.6 油乳劑滅活苗的制備與最佳油水比測定
    1.7 油乳劑滅活苗質(zhì)量檢驗(yàn)
    1.8 安全性檢驗(yàn)
    1.9 油乳劑滅活疫苗最小免疫劑量試驗(yàn)
    1.1 0 免疫抗體水平檢測
    1.1 1 油乳劑滅活疫苗攻毒保護(hù)試驗(yàn)
2 結(jié)果與分析
    2.1 病毒最佳收取時間測定結(jié)果
    2.2 病毒最佳滅活條件測定結(jié)果
    2.3 油乳劑滅活疫苗最佳油水比測定結(jié)果
    2.4 油乳劑滅活疫苗質(zhì)量檢驗(yàn)結(jié)果
    2.5 安全性檢驗(yàn)結(jié)果
    2.6 油乳劑滅活疫苗最小免疫劑量試驗(yàn)結(jié)果
    2.7 免疫抗體水平檢測結(jié)果
    2.8 油乳劑滅活疫苗攻毒保護(hù)試驗(yàn)結(jié)果
3 討論
    3.1 病毒培養(yǎng)方法
    3.2 病毒最佳滅活條件
    3.3 油乳劑滅活疫苗的最佳油水比
    3.4 油乳劑滅活疫苗的免疫效力
4 結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]雞源禽腺病毒的LMH細(xì)胞傳代及細(xì)胞傳代毒株對SPF雞的致病性[J]. 魏燕鳴,龔文孝,楊影,馬季,鄒忠,金梅林.  華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2020(02)
[2]禽腺病毒增殖方法的優(yōu)化研究[J]. 周花艷,陸瑋,王安妮,姜勇,黃亞奇,魏若瑤,劉林,徐建生.  中國家禽. 2018(22)
[3]禽腺病毒Ⅰ群的研究現(xiàn)狀[J]. 王亞楠,韓濤,李純玲,劉中奇,宋楠,劉瑞鑿,雷娜,吳培星.  中國動物保健. 2017(01)
[4]Ⅰ群禽腺病毒雙價油乳劑滅活苗的研究[J]. 韋悠,謝芝勛,范晴,劉加波,謝麗基,龐耀珊,鄧顯文,謝志勤.  南方農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2011(12)
[5]禽流感滅活疫苗的標(biāo)準(zhǔn)化研究[J]. 田國斌,于康震,唐秀英,馮菊艷.  中國獸藥雜志. 2002(04)
[6]雞腺病毒病診斷[J]. 王慶.  中國家禽. 1989(02)

碩士論文
[1]Ⅰ群4型禽腺病毒滅活疫苗及卵黃抗體的研制[D]. 殷國政.聊城大學(xué) 2019
[2]我國現(xiàn)流行Ⅰ亞群禽腺病毒四價油乳劑滅活苗的研制[D]. 趙勐堯.揚(yáng)州大學(xué) 2017



本文編號：3582659