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豬源鏈球菌耐藥性檢測及質粒P69生物信息學分析

發(fā)布時間:2022-01-10 22:30
  豬鏈球菌(Streptococcus suis)是豬只上呼吸道常在的革蘭氏陽性球菌,可引起豬敗血癥、腦膜炎和心內膜炎等多種疾病,通常存在于豬的鼻腔、扁桃體、生殖器和消化道等幾個部位。在過去幾十年內,豬鏈球菌感染一直是困擾全球養(yǎng)豬業(yè)的主要問題,給養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失,已被列為國家二類動物疫病。同時可通過傷口及呼吸道等途徑感染人,引發(fā)人的化膿性關節(jié)炎、腦膜腦炎及心內膜炎等,嚴重的可致人死亡,使得豬鏈球菌感染成為嚴重的公共衛(wèi)生問題。我國曾在四川、江蘇等地爆發(fā)過人感染豬鏈球菌的疫情。豬鏈球菌廣泛的存在,對人類和動物健康造成了極大的威脅?股氐氖褂门c耐藥病原菌密切相關,多重耐藥菌的出現(xiàn)對公眾健康構成嚴重威脅。國內外對豬鏈球菌耐藥性的調查結果顯示其耐藥情況已經(jīng)十分嚴重,其中optrA耐藥基因可介導惡唑烷酮類和酰胺醇類藥物耐藥,而惡唑烷酮類代表性藥物利奈唑胺(LZD)作為抗革蘭氏陽性菌的“最后一道防線”,可用于治療包括耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)和耐萬古霉素腸球菌(VRE)在內的革蘭氏陽性菌感染。為了解豬鏈球菌在健康豬群中的血清型、耐藥性以及optrA基因在豬鏈球菌中的流行情況。本研... 

【文章來源】:西南大學重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:72 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

豬源鏈球菌耐藥性檢測及質粒P69生物信息學分析


革蘭氏染色結果圖

鏈球菌,基因


第3章豬鏈球菌的分離鑒定17豬鏈球菌在選擇性培養(yǎng)基上形成針尖大小溶血單菌落單菌落。3.3.2革蘭氏染色結果豬鏈球菌經(jīng)革蘭染色,在油鏡下觀察,為紫色成對或短鏈狀排列的革蘭氏陽性球菌(圖3-2)。圖3-1革蘭氏染色結果圖Fig.3-1Theresultofgramstain3.3.3分子生物學鑒定結果豬鏈球菌分離株擴增出689bp大小gdh基因片段(圖3-3)。M:DL2000;1:ddH2O;2-23:臨床分離菌株;24:標準株M:DL2000;1:ddH2O;2-23:isolates;24:Streptococcussuistype2圖3-2豬鏈球菌特異性gdh基因鑒定結果Fig.3-2DetectionofStreptococcussuisspecificgdhgene3.3.4豬鏈球菌的采集及分離情況

示意圖,基因,氟苯尼考,鏈球菌


第6章質粒P69的生物信息學分析43在研究體外誘導鑒定耐藥基因對豬鏈球菌耐藥水平的影響實驗中,采用氟苯尼考升高濃度連續(xù)誘導體系進行誘導,具體方法如下圖:圖6-1豬鏈球菌氟苯尼考體外誘導示意圖Fig.6-1TheinvitroinductionofStreptococcussuisFlorfenicol6.3實驗結果6.3.1耐藥基因檢測結果對58株豬鏈球菌進行optrA基因的檢測,optrA陽性率為1.7%(1/58)。圖6-1optrA基因PCR擴增結果Fig.6-1AmplificationofoptrAgenebyPCR圖6-2optrA基因PCR擴增結果Fig.6-2AmplificationofoptrAgenebyPCR6.3.2體外誘導結果篩選攜帶optrA與不攜帶optrA的豬鏈球菌測定菌株對氟苯尼考的MIC值劃線于含相應濃度氟苯尼考的血平板以1/2MIC、MIC、2MIC、4MIC…誘導豬鏈球菌將誘導后的菌株劃線于血平板傳代10次測定其對氟苯尼考的MIC值和檢測optrA

【參考文獻】:
期刊論文
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博士論文
[1]豬鏈球菌致STSLS相關轉錄因子的篩選及其調控機制的研究[D]. 許仲旻.華中農業(yè)大學 2018

碩士論文
[1]天津地區(qū)豬鏈球菌2型流行情況調查及耐藥性檢測[D]. 王穎.吉林大學 2017
[2]江蘇部分地區(qū)2016年健康豬群豬鏈球菌流行病學調查[D]. 賀亞楠.南京農業(yè)大學 2017
[3]2015年蘇南地區(qū)健康豬群豬鏈球菌流行病學調查[D]. 周明瑤.南京農業(yè)大學 2016
[4]豬鏈球菌的耐藥性及豬鏈球菌在健康豬群中分布特征的研究[D]. 何宏魁.華中農業(yè)大學 2010
[5]重慶市豬鏈球菌流行病學調查及GDH基因的克隆和序列分析[D]. 譚世君.西南大學 2007



本文編號:3581535

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