乳對新生哺乳動物的發(fā)育至關(guān)重要,在能消化固體食物之前是唯一的理想食物。它不僅可以提供營養(yǎng),而且可以提供免疫防御因子。牛乳又是食用乳制品的最主要原料,因而提高牛乳產(chǎn)量改善牛乳品質(zhì)成為泌乳生物學(xué)研究的重點目標(biāo)之一。乳腺泌乳的過程受到神經(jīng)和激素的雙重調(diào)節(jié),隨著泌乳生物學(xué)研究的發(fā)展,泌乳功能相關(guān)基因及其信號通路及表觀遺傳調(diào)控機制對乳腺發(fā)育泌乳的作用越來越受到研究者的關(guān)注。DNA甲基化作為表觀遺傳調(diào)控機制之一,以其可調(diào)控可遺傳的特性而被應(yīng)用于農(nóng)牧業(yè)的遺傳育種試驗中。近些年研究發(fā)現(xiàn)DNA甲基化水平與奶牛的乳品質(zhì)調(diào)控相關(guān),但其作用機制仍在探索中。本研究首先應(yīng)用原代培養(yǎng)的奶牛乳腺上皮細(xì)胞（BMECs）確立DNA去甲基化狀態(tài)奶牛乳腺細(xì)胞上皮模型與DNA甲基化狀態(tài)奶牛乳腺上皮細(xì)胞模型目的在于探究DNA甲基化水平對奶牛乳腺上皮細(xì)胞功能的作用及其機制。實驗應(yīng)用甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑5-Aza確立去甲基化奶牛乳腺細(xì)胞模型,而后應(yīng)用細(xì)胞活力測試與甲基化敏感限制酶切法檢測去甲基化試劑5-Aza對奶牛乳腺上皮細(xì)胞DNA甲基化水平的影響;結(jié)果顯示5-Aza能降低BMECs基因組DNA甲基化水平,而后應(yīng)用過表達(dá)甲基轉(zhuǎn)移酶3α（... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

DNA甲基化過程

基化的活化通路。5-mC能夠在兩個位點進行被化學(xué)修飾：胺基基團能被AID/APOBEC修飾（綠色），將5-mC轉(zhuǎn)移到胸腺嘧啶能夠被加入由 Tet 酶介導(dǎo)的羥基基團，從而形成5-hmC。5-hm胺基基團和羥基甲基基團。AID/APOBEC能夠修飾（綠色）5-一個5-hmC的化學(xué)通路中，Tet酶能后進一步氧化（黃色）5-hm-caC。最終，每條通路的產(chǎn)品（Thy、5-hmU、5-fC、5-caC）SMUG1將其切除，并由裸胞嘧啶替代。所有切除修復(fù)途徑均用 DNA demethylation pathways. 5-mC can be chemically modified nd the methyl group. The amine group of 5-mC can be deami converting 5-mC into thymine (Thy). The methyl group of 5-mC of a hydroxyl group mediated by Tet enzymes to generate 5-hmCodified at two sites：the amine group and the hydroxymethyl grou(green) 5-hmC to produce 5-hmU. In another chemical pathway f oxidize (yellow) 5-hmC to form5-fC and then 5-caC. Eventuallyhy, 5hmU, 5fC, and 5-caC-are recognized and cleaved off to replted by TDG and/or SMUG1, both components of the base excision(red).

圖1-3 DNA甲基化抑制基因轉(zhuǎn)錄。Fig. 1-3 Transcription of genes is inhibited by DNA methylation物學(xué)中 DNA 甲基化研究進展基化在與乳腺發(fā)育方面的影響，一直以來，人們的研究主要


本文編號：3579015