犬副流感病毒的分離鑒定及結(jié)構(gòu)蛋白基因的克隆與序列分析
發(fā)布時間:2022-01-08 08:19
犬傳染性呼吸系統(tǒng)疾。╟anine infectious respiratory disease, CIRD)是由犬副流感病毒(Canine Parainfluenza Virus, CPIV)引起的一種嚴(yán)重危害犬業(yè)的感染性疾病。CPIV已在世界范圍內(nèi)廣泛流行。本研究旨鑒定并分離目前國內(nèi)的犬副流感流行毒株,并與其他分離株的F基因序列進(jìn)行比較,篩選出新的保護(hù)性抗原位點(diǎn),為亞單位疫苗的制備提供理論基礎(chǔ)。本研究收集2011-2012年CPIV感染疑似病例標(biāo)本14份,用Vero細(xì)胞進(jìn)行病毒的分離培養(yǎng),并通過紅細(xì)胞吸附實(shí)驗(yàn)、動物回歸試驗(yàn)、RT-PCR反應(yīng)及序列測定對其進(jìn)行鑒定。對鑒定出的菌株進(jìn)行F基因的擴(kuò)增,構(gòu)建克隆載體,對篩選出的陽性克隆進(jìn)行測序,并與國內(nèi)外其他分離株構(gòu)建生物進(jìn)化樹。本實(shí)驗(yàn)成功分離出一株CPIV分離株,命名為CPIV-CC。通過對其鑒定發(fā)現(xiàn),該病毒接種于Vero細(xì)胞后48h可出現(xiàn)明顯的細(xì)胞病變,具有吸附豚鼠紅細(xì)胞的能力,動物回歸實(shí)驗(yàn)表明該毒株可使健康動物出現(xiàn)CPIV感染的癥狀。成功構(gòu)建F基因的克隆載體,經(jīng)目的基因測序及同源性分析發(fā)現(xiàn)該病毒分離株與Genbank上已有的病毒分離株...
【文章來源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省
【文章頁數(shù)】:48 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
第一章 犬副流感病毒研究進(jìn)展
1.1 犬副流感病毒的概述
1.2 病原學(xué)特征
1.3 分子生物學(xué)特征
1.4 流行病學(xué)
1.5 臨床癥狀及病理變化
1.6. 實(shí)驗(yàn)室診斷
1.7. 預(yù)防與控制
第二章 疫苗研究進(jìn)展
第二篇 研究內(nèi)容
第一章 犬副流感病毒分離鑒定
引言
1.1 材料與方法
1.2 結(jié)果
1.3 討論
1.4 小結(jié)
第二章 犬副流感病毒的F基因的克隆表達(dá)與序列分析
引言
2.1 材料與方法
2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.3 討論
2.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]兩種單負(fù)鏈RNA呼吸道病毒——流感病毒和呼吸道合胞病毒感染對粘蛋白1表達(dá)調(diào)控差異的研究[J]. 盧昕,倪淑媛,李煜生. 病毒學(xué)報(bào). 2012(06)
[2]犬副流感病毒NP基因的克隆與原核表達(dá)[J]. 劉騰飛,馬素貞,申衛(wèi)紅,陶玉成,陳勝男,簡子健. 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2010(02)
[3]犬流感病毒RT-LAMP快速檢測方法的建立[J]. 高曉宇,曹榮峰,張桂紅,李守軍. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2010(01)
[4]犬副流感病毒單克隆抗體的研制及其特性鑒定[J]. 焦庫華,岑皓,張小榮,吳艷濤. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2009(12)
[5]高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒YA株的分離鑒定及動物回歸試驗(yàn)[J]. 王福廣,孫彥偉,趙志權(quán),王連想,余小利,蘇丹萍,羅滿林,賀東生. 中國獸醫(yī)雜志. 2009(05)
[6]犬瘟熱病毒h基因克隆測序與原核表達(dá)[J]. 孫園園,宮文妮,黃娟,趙鵬,單虎. 中國畜牧獸醫(yī). 2009(05)
[7]犬副流感病毒血清抗體流行病學(xué)調(diào)查[J]. 閆喜軍,夏咸柱,柴秀麗,田宏宇,王鳳雪,邵西群. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2007(05)
[8]犬副流感病的診治[J]. 王鳳雪,溫永俊. 吉林畜牧獸醫(yī). 2007(05)
[9]猴副流感病毒SV5 PCR檢測方法的建立與初步應(yīng)用[J]. 于浩,蔣虹,佟巍,叢喆,孫敏,馮育芳,王衛(wèi),涂新明,魏強(qiáng). 中國實(shí)驗(yàn)動物學(xué)報(bào). 2006(01)
[10]虎血清中犬副流感病毒的抗體流行病學(xué)調(diào)查研究[J]. 孫賀廷,夏咸柱,高玉偉,賀文琦,王立剛,劉丹,黃耕. 畜牧與獸醫(yī). 2004(09)
本文編號:3576216
【文章來源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省
【文章頁數(shù)】:48 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
第一章 犬副流感病毒研究進(jìn)展
1.1 犬副流感病毒的概述
1.2 病原學(xué)特征
1.3 分子生物學(xué)特征
1.4 流行病學(xué)
1.5 臨床癥狀及病理變化
1.6. 實(shí)驗(yàn)室診斷
1.7. 預(yù)防與控制
第二章 疫苗研究進(jìn)展
第二篇 研究內(nèi)容
第一章 犬副流感病毒分離鑒定
引言
1.1 材料與方法
1.2 結(jié)果
1.3 討論
1.4 小結(jié)
第二章 犬副流感病毒的F基因的克隆表達(dá)與序列分析
引言
2.1 材料與方法
2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.3 討論
2.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]兩種單負(fù)鏈RNA呼吸道病毒——流感病毒和呼吸道合胞病毒感染對粘蛋白1表達(dá)調(diào)控差異的研究[J]. 盧昕,倪淑媛,李煜生. 病毒學(xué)報(bào). 2012(06)
[2]犬副流感病毒NP基因的克隆與原核表達(dá)[J]. 劉騰飛,馬素貞,申衛(wèi)紅,陶玉成,陳勝男,簡子健. 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2010(02)
[3]犬流感病毒RT-LAMP快速檢測方法的建立[J]. 高曉宇,曹榮峰,張桂紅,李守軍. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2010(01)
[4]犬副流感病毒單克隆抗體的研制及其特性鑒定[J]. 焦庫華,岑皓,張小榮,吳艷濤. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2009(12)
[5]高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒YA株的分離鑒定及動物回歸試驗(yàn)[J]. 王福廣,孫彥偉,趙志權(quán),王連想,余小利,蘇丹萍,羅滿林,賀東生. 中國獸醫(yī)雜志. 2009(05)
[6]犬瘟熱病毒h基因克隆測序與原核表達(dá)[J]. 孫園園,宮文妮,黃娟,趙鵬,單虎. 中國畜牧獸醫(yī). 2009(05)
[7]犬副流感病毒血清抗體流行病學(xué)調(diào)查[J]. 閆喜軍,夏咸柱,柴秀麗,田宏宇,王鳳雪,邵西群. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2007(05)
[8]犬副流感病的診治[J]. 王鳳雪,溫永俊. 吉林畜牧獸醫(yī). 2007(05)
[9]猴副流感病毒SV5 PCR檢測方法的建立與初步應(yīng)用[J]. 于浩,蔣虹,佟巍,叢喆,孫敏,馮育芳,王衛(wèi),涂新明,魏強(qiáng). 中國實(shí)驗(yàn)動物學(xué)報(bào). 2006(01)
[10]虎血清中犬副流感病毒的抗體流行病學(xué)調(diào)查研究[J]. 孫賀廷,夏咸柱,高玉偉,賀文琦,王立剛,劉丹,黃耕. 畜牧與獸醫(yī). 2004(09)
本文編號:3576216
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