為研究GTHR及其mRNA在母犬生殖器官內(nèi)的分布和表達(dá),本試驗(yàn)以卵泡期和黃體期母犬卵巢、子宮和輸卵管為研究對(duì)象,采用免疫組織化學(xué)SABC法與原位雜交技術(shù),對(duì)處于發(fā)情周期不同階段的母犬生殖器官組織內(nèi)FSHR和LHR進(jìn)行定位并在mRNA水平上的進(jìn)行半定量表達(dá)分析。結(jié)果表明：1.在母犬卵泡期和黃體期的卵巢以及各級(jí)卵泡處均能觀察到FSHR和LHR的陽(yáng)性細(xì)胞分布,FSHR陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)為卵泡期中成熟卵泡最多（178.6±3.026）,顯著高于其他各級(jí)陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)；LHR陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)為黃體期中次級(jí)卵泡最多（104.0±0.9129）,顯著高于其他各級(jí)陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)。在子宮卵泡期和黃體期中均可見FSHR和LHR的陽(yáng)性細(xì)胞分布；在輸卵管的兩期中可見LHR陽(yáng)性細(xì)胞分布,但FSHR陽(yáng)性染色在僅卵泡期輸卵管中可見,黃體期未見陽(yáng)性反應(yīng)。2.使用原位雜交技術(shù)在兩期的生殖器官中均觀察到FSHR mRNA和LHR mRNA雜交信號(hào);半定量結(jié)果分析顯示,在卵泡期中, FSHR mRNA的表達(dá)量卵巢內(nèi)最高（120.408±1.768）,且顯著高于輸卵管,LHR mRNA的表達(dá)量子宮內(nèi)最高（117.032±0.151）,且顯... 

【文章來(lái)源】：延邊大學(xué)吉林省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：45 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
    1 卵泡刺激素及其受體
        1.1 FSH的結(jié)構(gòu)與功能
        1.2 FSHR的結(jié)構(gòu)與功能
    2 黃體生成素及其受體
        2.1 LH結(jié)構(gòu)與功能
        2.2 LHR的分子結(jié)構(gòu)與功能
    3 發(fā)情周期的劃分
    4 原位雜交技術(shù)
    5 GTHR及其mRNA的研究概況
材料與方法
    1 材料
        1.1 取材
        1.2 主要藥品
        1.3 主要儀器設(shè)備
        1.4 藥品的配制
    2 方法
        2.1 組織固定
        2.2 切片制作
        2.3 免疫組化SABC染色程序
        2.4 原位雜交技術(shù)
結(jié)果
    1 原雜交方法的建立
        1.1 切片最佳厚度
        1.2 HRP祛除效果
        1.3 原位雜交效果
    2 免疫組織化學(xué)結(jié)果
        2.1 卵巢中FSHR和LHR免疫反應(yīng)物質(zhì)分布
        2.2 子宮中FSHR和LHR免疫反應(yīng)物質(zhì)分布
        2.3 輸卵管中FSHR、LHR的分布
    3 原位雜交試驗(yàn)結(jié)果
        3.1 犬生殖器官中GTHR mRNA的定位
        3.2 犬生殖器官中GTHR mRNA的半定量
討論
    1 FSHR、LHR在犬發(fā)情周期生殖器官中的分布
    2 免疫組化與原位雜交技術(shù)對(duì)受體分布與定位的研究對(duì)比
    3 FSHR mRNA、LHR mRNA在母犬發(fā)情周期生殖器官中的半定量表達(dá)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]沂蒙黑山羊發(fā)情周期不同階段卵巢中FSHR和LHR基因表達(dá)規(guī)律的研究[J]. 李泰云,韓小康,丁彥紅,王樹迎,王麗,石中強(qiáng).  中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2011(09)
[2]動(dòng)態(tài)添加FSH對(duì)綿羊卵巢皮質(zhì)組織體外培養(yǎng)的影響[J]. 彭夏雨,楊梅,陳童,汪立芹,郭志勤.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2010(11)
[3]原位雜交和免疫組化技術(shù)檢測(cè)尖銳濕疣的比較[J]. 陳玨.  中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志. 2010(09)
[4]犬發(fā)情周期的人工模擬和陰道細(xì)胞觀察[J]. 秦清明,程浩,周勁松,李德如,黃群山.  中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2010(04)
[5]促卵泡素受體和促黃體素受體在豬子宮中的定位研究[J]. 梁鴻雁,周虛,李純錦,孫博興.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2009(04)
[6]FSHR與LHR的研究進(jìn)展[J]. 孫明亮,馬金成.  黑龍江動(dòng)物繁殖. 2008(04)
[7]間接免疫酶組織化學(xué)檢測(cè)豬繁殖與呼吸綜合征病毒在人工感染仔豬體內(nèi)的分布規(guī)律[J]. 張平英,程安春,汪銘書,劉伍梅,李雪梅,陳希文,劉菲,周毅,陳孝躍.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2007(07)
[8]促性腺激素受體在子宮和輸卵管中分布和作用的研究進(jìn)展[J]. 申穎,侯志高,王樹迎.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2007(06)
[9]豬FSHβ亞基基因的研究進(jìn)展[J]. 蔣岸岸,李學(xué)偉.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2005(05)
[10]促性腺激素對(duì)豬卵母細(xì)胞體外成熟的影響[J]. 盧晟盛,盧克煥.  西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2004(06)

碩士論文
[1]山羊發(fā)情周期中卵巢內(nèi)FSHR的定位及其mRNA表達(dá)規(guī)律的研究[D]. 劉曉東.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[2]高繁山羊發(fā)情周期不同階段子宮FSHRmRNA表達(dá)的定量分析及FSHR免疫陽(yáng)性細(xì)胞分析研究[D]. 魏軍強(qiáng).山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3571873