發(fā)布時(shí)間：2022-01-05 03:59

　　抑制素（inhibin，INH）是由綿羊的卵巢顆粒細(xì)胞和睪丸支持細(xì)胞分泌的糖蛋白質(zhì)激素，它是由一個(gè)α亞基和一個(gè)β亞基通過(guò)二硫鍵構(gòu)成的，其中抑制素α亞基（INHA）是抑制素發(fā)揮生理功能必不可少的。抑制素能抑制雌性動(dòng)物促卵泡素（FSH）的釋放，調(diào)節(jié)卵泡的生成；對(duì)雄性動(dòng)物表現(xiàn)為抑制精子的發(fā)生，降低睪丸的生精能力�？梢�(jiàn)，可通過(guò)抑制抑制素α亞基基因的表達(dá)，來(lái)降低動(dòng)物體內(nèi)的抑制素水平，從而促進(jìn)卵泡發(fā)育和精子的生成，繼而提高動(dòng)物的繁殖力。RNA干擾技術(shù)是內(nèi)源性或外源性雙鏈RNA誘發(fā)的mRNA水平上的基因沉默技術(shù)，具有高度的特異性。然而，根據(jù)以前的研究報(bào)告顯示shRNA表達(dá)載體只能轉(zhuǎn)錄生成一種特異性的小干擾RNA，來(lái)阻斷單一靶點(diǎn)的表達(dá)，干擾效率比較低。為了提高shRNA的干擾效率，我們?cè)谝粋�(gè)載體上插入兩個(gè)靶點(diǎn)shRNA表達(dá)序列，即構(gòu)建含有雙啟動(dòng)子的shRNA表達(dá)載體，并將其與單個(gè)靶點(diǎn)shRNA載體的干擾效率作比較。本研究利用RNA干擾技術(shù)，根據(jù)綿羊INHA基因的cDNA序列設(shè)計(jì)構(gòu)建shRNA重組質(zhì)粒，通過(guò)雙重PCR方法擴(kuò)增啟動(dòng)子序列，構(gòu)建含有U6和H1雙啟動(dòng)子的不同靶特異干擾序列shRNA表達(dá)載體pG... 

【文章來(lái)源】：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)河北省

【文章頁(yè)數(shù)】：51 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

RNAi作用機(jī)制Fig.l-1RNAinterferencemechanism

pGenesil1.2質(zhì)粒載體結(jié)構(gòu)圖

pUC18-4p質(zhì)粒載體結(jié)構(gòu)圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]雙啟動(dòng)子shRNA干擾的協(xié)同效應(yīng)[J]. 崔文靜,張矯,馬祥敏,王雯雯,王欣.  山東醫(yī)藥. 2013(11)
[2]抑制素免疫對(duì)初產(chǎn)母羊排卵率的影響[J]. 劉月琴,劉彥彬,張英杰,王雙,董李學(xué).  今日畜牧獸醫(yī). 2013(02)
[3]用免疫抑制素提高水牛超排效果的初步研究[J]. 覃廣勝,李德如,韋英明,覃永長(zhǎng),蔣欽楊,蔣和生,施振旦.  畜牧與獸醫(yī). 2012(06)
[4]雙啟動(dòng)子shRNA表達(dá)載體對(duì)hTERT和bcl-2基因表達(dá)的抑制作用[J]. 張金曉,張瑞,汪蓓蕾,郭剛.  天津醫(yī)藥. 2012(05)
[5]水牛抑制素α亞基基因RNAi載體構(gòu)建與檢測(cè)[J]. 謝琴,蔣建榮,王丹,石德順,謝體三,陳施蓓,劉慶友.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(07)
[6]綿羊抑制素shRNA慢病毒干擾載體的構(gòu)建與鑒定[J]. 張瑞杰,苗向陽(yáng).  華北農(nóng)學(xué)報(bào). 2011(03)
[7]雙啟動(dòng)子shRNA真核表達(dá)載體的構(gòu)建[J]. 娜仁,郭剛,張瑞,趙郁,汪蓓蕾,梁東春,楊宇虹.  天津醫(yī)藥. 2010(10)
[8]串聯(lián)抑制素基因免疫誘導(dǎo)綿羊?qū)\生的研究[J]. 郭憲,岳耀敬,焦碩,曹學(xué)亮,馮瑞林,趙興緒.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2009(08)
[9]抑制素α基因表達(dá)下調(diào)對(duì)鵝卵泡顆粒細(xì)胞凋亡和增殖的影響（英文）[J]. 陳鋒劍,姜?jiǎng)灼?陳秀萍,劉桂瓊,丁家桐.  遺傳學(xué)報(bào). 2007(12)
[10]CD40發(fā)夾siRNA真核表達(dá)質(zhì)粒與siRNA表達(dá)框架對(duì)CA46細(xì)胞CD40表達(dá)的影響[J]. 陳凌,鄭祥雄.  福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2006(04)

碩士論文
[1]黃牛和水牛INHA基因RNAi慢病毒載體的構(gòu)建與鑒定及功能研究[D]. 趙延森.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[2]雙啟動(dòng)子shRNA表達(dá)載體的構(gòu)建及其在抑制腫瘤增殖研究中的應(yīng)用[D]. 娜仁.天津醫(yī)科大學(xué) 2010
[3]體外構(gòu)建U6/H1雙啟動(dòng)子SECs及其對(duì)HepG2細(xì)胞端粒酶活性抑制的研究[D]. 張琴.中南大學(xué) 2008
[4]水牛抑制素α亞基基因的克隆[D]. 謝體三.廣西大學(xué) 2005



本文編號(hào)：3569679