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犬DEA1.1血型抗體間接ELISA檢測方法的建立

發(fā)布時間:2022-01-04 06:40
  為探求減少寵物臨床中犬因血型錯配發(fā)生的輸血反應(yīng),本試驗以DEA1.1陽性紅細(xì)胞膜作為抗原建立能檢測DEA1.1抗體的間接ELISA方法。試驗以犬DEA1.1血型為主要研究對象,提取犬紅細(xì)胞膜,以DEA1.1陽性紅細(xì)胞膜作為抗原,用醛化技術(shù)包被抗原,優(yōu)化間接ELISA反應(yīng)條件。結(jié)果顯示,最佳固定劑為濃度0.062 5%和0.125%的戊二醛,最佳抗原包被量為4~8μg/孔,最佳封閉液為5%的脫脂奶粉,最佳溫度為37℃,最適反應(yīng)時間為90 min。與間接抗球蛋白試驗相比,優(yōu)化后的間接ELISA法有更高的靈敏性,本試驗建立的間接ELISA方法可以對犬DEA1.1血型抗體進(jìn)行高通量檢測。 

【文章來源】:中國獸醫(yī)雜志. 2020,56(06)北大核心

【文章頁數(shù)】:5 頁

【部分圖文】:

犬DEA1.1血型抗體間接ELISA檢測方法的建立


P/N值隨戊二醛濃度變化

包被,抗原


表2 抗原包被濃度的優(yōu)化Table 2 Optimize the concentration of antigen-coated 抗原包被量(μg/孔) 1 2 4 8 16 32 P/N 1.5±0.07 1.65±0.12 2.16±0.11 2.3±0.12 2.15±0.51 2.16±0.33圖3 間接ELISA方法靈敏度測定

靈敏度,方法,包被,抗原


圖2 抗原包被量的優(yōu)化表3 間接ELISA方法靈敏度測定Table 3 Sensitivity measurement of ELISA 血清稀釋倍數(shù) 100 200 400 800 1 600 3 200 P/N 2.90±0.49 2.82±0.26 2.15±0.36 2.03±0.16 1.10±0.26 0.79±0.28

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]犬血型DEA1.1抗原生化特性的研究[J]. 王雪,姜忠玲,曹榮峰,田文儒,李華濤.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2017(19)
[2]犬輸血安全及血型檢測問題探討[J]. 殷珂,姜忠玲,叢霞,曹榮峰,田文儒,李華濤.  中國獸醫(yī)雜志. 2017(08)
[3]IgG抗-A/BELISA檢測方法的初探[J]. 張敏,蘆慧霞,辛琪.  中國輸血雜志. 2011(05)
[4]不同醛化劑對紅細(xì)胞性能及其保存時間的影響[J]. 王麗榮,董永軍,劉麗艷.  河北畜牧獸醫(yī). 2003(04)
[5]ABC-ELISA法定量檢測紅細(xì)胞相關(guān)IgG及臨床意義[J]. 楊國元,王昌富,張萬勝,黃知平,虞詠知,李良鳳,魯志英,鄧明鳳.  中華血液學(xué)雜志. 2000(10)

碩士論文
[1]紅細(xì)胞冰凍干燥保存研究[D]. 陳燕.第一軍醫(yī)大學(xué) 2006



本文編號:3567868

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