NmpC是沙門菌編碼的外膜蛋白,也是沙門菌誘導(dǎo)體液免疫的主要抗原。為研究沙門菌NmpC蛋白的免疫特性,本試驗(yàn)對(duì)沙門菌nmpC基因進(jìn)行擴(kuò)增,并將其克隆到pET-28a載體上,利用大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)重組蛋白rNmpC,進(jìn)一步將rNmpC免疫小鼠,檢測(cè)特異性抗體水平;用腸炎沙門菌C50336菌株感染rNmpC免疫小鼠評(píng)測(cè)其免疫保護(hù)效果。結(jié)果顯示,成功表達(dá)和純化出腸炎沙門菌NmpC重組蛋白,rNmpC大小為38 000;將rNmpC蛋白免疫小鼠,可以刺激小鼠產(chǎn)生高水平特異性抗體;細(xì)菌感染試驗(yàn)表明,rNmpC蛋白免疫小鼠可使其產(chǎn)生針對(duì)腸炎沙門菌感染的保護(hù)力,保護(hù)率為70%。本試驗(yàn)證實(shí)沙門菌NmpC蛋白的免疫潛力,為進(jìn)一步研制沙門菌新型疫苗提供了參考。 

【文章來源】：中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2020,40(08)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

不同菌株NmpC蛋白同源性分析

PCR擴(kuò)增沙門菌nmpC基因

對(duì)pET-28a-nmpC/BL21菌株擴(kuò)大培養(yǎng),進(jìn)行可溶性分析。SDS-PAGE電泳分析結(jié)果顯示,表達(dá)的重組蛋白主要存在于沉淀中,而上清中不表達(dá)(圖5),表明該蛋白為包涵體表達(dá)。用包涵體純化試劑盒純化目的蛋白,得到純化蛋白(圖6)。Western blot分析rNmpC蛋白是否能被多抗陽性血清識(shí)別,rNmpC蛋白泳道出現(xiàn)特異性條帶,而Hexon-penton蛋白泳道無此條帶(圖7),表明NmpC蛋白在自然感染中能激發(fā)機(jī)體免疫反應(yīng)。圖4 Western blot分析NmpC蛋白在大腸桿菌中的表達(dá)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]A型禽流感病毒不同拷貝數(shù)基質(zhì)蛋白胞外區(qū)基因的原核表達(dá)及免疫保護(hù)力研究[J]. 李洪濤,張新濤,劉明,劉春國(guó),杜金玲,石薇琳,孫恩成.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2010(10)



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