發(fā)布時間：2021-12-29 22:02

　　現(xiàn)階段國內(nèi)畜牧業(yè)發(fā)展體系下,雖然集約化養(yǎng)殖逐步取代傳統(tǒng)的養(yǎng)殖模式,最大限度的避免了畜禽養(yǎng)殖過程中自然因素的影響,但畜禽的非連續(xù)性的冷暴露依然無法避免,因此導(dǎo)致的慢性冷應(yīng)激反應(yīng)在畜禽養(yǎng)殖過程中仍時有發(fā)生。而海馬體作為各類細胞因子、應(yīng)激激素作用的首要靶點,當慢性冷應(yīng)激發(fā)生后會遭受到怎么樣的影響呢?其中又存在著怎樣復(fù)雜的調(diào)控機制呢?為此深入研究慢性冷應(yīng)激對小鼠海馬體結(jié)構(gòu)及功能影響,對保障畜牧業(yè)健康、可持續(xù)性發(fā)展、提高畜禽養(yǎng)殖福利具有重要意義。為明確慢性冷暴露對小鼠海馬體功能及結(jié)構(gòu)的影響,本研究首先通過對不同性別C57BL/6小鼠施加3小時/天,為期7天的非連續(xù)性冷刺激以構(gòu)建慢性冷應(yīng)激小鼠模型;期間對各組小鼠血清中糖皮質(zhì)激素含量進行連續(xù)監(jiān)測,并于輔以血氣分析以評估慢性冷應(yīng)激模型是否構(gòu)建成功。結(jié)果顯示與對照組相比在模型組小鼠冷暴露的1、3、5、7天血清中糖皮質(zhì)激素含量均發(fā)生極顯著增加（P<0.001）;并且冷暴露7天后小鼠血氣分析結(jié)果中pH等均發(fā)生顯著變化（P<0.01）,綜合兩項試驗結(jié)果確定慢性冷應(yīng)激小鼠模型構(gòu)建成功�；谏鲜鼋Y(jié)果,對各處理組小鼠進行安樂死并對海馬及全腦組織進行樣品... 

【文章來源】：黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)黑龍江省

【文章頁數(shù)】：117 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)對于應(yīng)激反應(yīng)的響應(yīng)(LOPEZ.R.B.,2018)

在急性或慢性應(yīng)激源的刺激下,生物體內(nèi)HPA軸及交感神經(jīng)系統(tǒng)(sympathetic nervous system,SNS)迅速活化,驅(qū)動腎上腺分泌GCs和腎上腺素(Epinephrine,E);SNS及其反射性腦區(qū)釋放去甲腎上腺素(Norepinephrine,NE)等激素用于維持或重塑機體穩(wěn)態(tài)[11,12]。在應(yīng)激反應(yīng)發(fā)生過程中由于NE的釋放導(dǎo)致機體出現(xiàn)心跳加快、血流加速、釋放能量儲備等一系列生理調(diào)節(jié),這些進程的發(fā)生一方面有助于機體警覺性的提高、注意力的集中;而另一方面,由于其作用在腦橋和藍斑等部位,也增加了生物體的躁動與焦慮行為。而GCs由腎上腺皮質(zhì)釋放,經(jīng)由血液由外周循環(huán)作用到全身各處。但由于血液中皮質(zhì)醇結(jié)合球蛋白(Cortisol-binding globulin,CBG)的存在,絕大多數(shù)GCs被結(jié)合,只有少量GCs處于游離狀態(tài)發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)。與此同時,GCs作為HPA軸的末端產(chǎn)物可透過血腦屏障進入大腦以負反饋調(diào)節(jié)的形式抑制HPA軸的過度活化[13]。但大量的應(yīng)激激素短時間內(nèi)的急劇釋放或持續(xù)釋放都會破壞中樞神經(jīng)系統(tǒng)的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài),誘發(fā)并放大神經(jīng)炎癥[14]。有文章指出短時間內(nèi)NE的急劇釋放會介導(dǎo)包括巨噬細胞、CD4+T細胞、CD8+T細胞和NK細胞在內(nèi)的免疫相關(guān)性細胞活化從而引起全身性的免疫應(yīng)答[15],而免疫相關(guān)性細胞的主動活化又會間接導(dǎo)致非免疫相關(guān)細胞內(nèi)NF-κB的活化移位入核,進一步分泌促炎因子并正向放大炎癥反應(yīng)。不僅如此,在NF-κB信號通路活化后大量細胞因子被分泌的同時也會對GR的翻譯過程及功能進行抑制,阻礙GCs在應(yīng)激狀態(tài)下發(fā)揮其抗炎及抗應(yīng)激的生物學(xué)功能,這會對NF-κB信號通路的活化后的炎癥反應(yīng)進一步放大[16]。并且已有證據(jù)表明,GCs與應(yīng)激反應(yīng)下的神經(jīng)炎癥及中樞神經(jīng)系統(tǒng)對外周單核細胞系的募集和動員有關(guān)[17,18]。(圖1-1,引自文獻[18])1.1.3 糖皮質(zhì)激素在應(yīng)激反應(yīng)中的雙向調(diào)節(jié)作用

在中樞神經(jīng)系統(tǒng)穩(wěn)態(tài)平衡的條件下,小膠質(zhì)細胞呈現(xiàn)出高放射狀的小細胞體形態(tài),并具有可與其他髓樣細胞系相區(qū)分的特異性轉(zhuǎn)錄標志物(P2ry12,Tmem119,Siglech,Gpr34,Socs3,Hexb等)[54]。而當中樞系統(tǒng)穩(wěn)態(tài)遭到破壞時,例如發(fā)生退行性疾病期間,小膠質(zhì)細胞的穩(wěn)態(tài)轉(zhuǎn)錄信號會遭到抑制,同時伴隨著細胞形態(tài)的改變:從放射狀的小細胞體轉(zhuǎn)變?yōu)樽冃蜗x樣的大細胞體,完成由未活化的小膠質(zhì)細胞到活化的“疾病相關(guān)小膠質(zhì)細胞(Disease-associated microglia,DAM)”免疫表型轉(zhuǎn)換[55-57]。小膠質(zhì)細胞的活化可由中樞神經(jīng)系統(tǒng)的外源性因素介導(dǎo),更重要的是,內(nèi)源性介質(zhì)也可誘導(dǎo)小膠質(zhì)細胞的活化。在沒有病原侵入的情況下小膠質(zhì)細胞的內(nèi)源活化過程主要是對于組織損傷的響應(yīng)。在活化過程中,包括HSPs、S100、HMGB1在內(nèi)的大量DAMPs被釋放經(jīng)由各類模式識別受體(Pattern recognition receptor,PRR)引起包括小膠質(zhì)細胞在內(nèi)的各類免疫相關(guān)性細胞產(chǎn)生免疫應(yīng)答分泌IL-1、CCL19等細胞因子以旁分泌和自分泌的形式誘導(dǎo)并放大炎癥反應(yīng)[58-60]。而這些免疫信號在大腦中轉(zhuǎn)換為一系列神經(jīng)、內(nèi)分泌和行為反應(yīng),從而促進了生物體對包括海馬體、杏仁核和前額葉皮層在內(nèi)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)受威脅區(qū)的各類反饋調(diào)節(jié)[61]。(圖1-1,引自文獻[61])在大量的應(yīng)激領(lǐng)域研究中發(fā)現(xiàn),中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)活化的小膠質(zhì)細胞表達部分髓系細胞活化標志物包括IBA-1、CD11b、CD45、CX3CR1及MHC??[62]。在Nair和Bonneau等人的研究中發(fā)現(xiàn)在束縛應(yīng)激小鼠模型的腦組織中分離出大量CD11b陽性的小膠質(zhì)細胞[63];在經(jīng)過急性震尾刺激后小鼠海馬體CA1、CA3和DG區(qū)域中MHCⅡ與IBA-1共定位在小膠質(zhì)細胞中;在經(jīng)過急性異型應(yīng)激源刺激后的小鼠下丘腦、海馬以及皮質(zhì)中同樣發(fā)現(xiàn)了大量IBA-1、CD11b、MHCⅡ陽性小膠質(zhì)細胞,這些證據(jù)均證明不同類型的應(yīng)激源均可使中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的小膠質(zhì)細胞活化[64]。在Lee等人的實驗中,小鼠被置于高溫環(huán)境下階段性刺激,實驗結(jié)果顯示小鼠腦內(nèi)的天然免疫通路被激活;促炎因子含量始終維持在一個較高的水平上;并且神經(jīng)膠質(zhì)細胞也呈持續(xù)活化的狀態(tài);神經(jīng)元的新生、成熟都受到了不同程度的影響;進而導(dǎo)致小鼠認知障礙[65]。也有實驗證明間歇性熱暴露也會對小鼠大腦內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)造成不可修復(fù)性的損傷[66]。在發(fā)生缺氧應(yīng)激時,神經(jīng)膠質(zhì)細胞也會大量分泌炎性因子改變血腦屏障的通透性進而對外周的巨噬細胞以及中性粒細胞進行招募;與此同時,細胞膜表面受體CD206、CD200等也迅速做出響應(yīng)向組織受損位置聚集,并直接發(fā)揮吞噬、消化作用[67,68]。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]糖皮質(zhì)激素對小膠質(zhì)細胞內(nèi)鈣的影響[J]. 何舒翹,錢旭,張貴平,張維文,張梅.  中國藥理學(xué)通報. 2017(06)
[2]Toll樣受體與腫瘤免疫[J]. 鮑雷,史明,姚媛菲,李鈺,李暉.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展. 2015(04)



本文編號：3556939