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流產(chǎn)布氏桿菌脂多糖突變株ΔrfbE和ΔrfbD的構(gòu)建及其生物學特性研究

發(fā)布時間:2021-12-28 05:37
  布氏桿菌是兼性胞內(nèi)生長的革蘭氏陰性菌,可感染多種動物和人,引起布氏桿菌病。布氏桿菌的致病機制與其胞內(nèi)存活、增殖有關(guān)。脂多糖(LPS)是布氏桿菌一種重要的毒力因子,完整的LPS對其胞內(nèi)生存和毒力十分必要。rfbE (BAB10542)編碼ABC型轉(zhuǎn)運系統(tǒng)ATP酶,rfbD (BAB10543)編碼ABC型轉(zhuǎn)運系統(tǒng)運載體,這兩個蛋白參與LPS的O-抗原從細胞膜內(nèi)側(cè)轉(zhuǎn)運到周質(zhì)側(cè)。rfbE, rfbD基因突變,將導致O-抗原在胞內(nèi)合成,但不能轉(zhuǎn)運到周質(zhì)側(cè),無法合成完整的LPS。本研究通過同源重組的方法構(gòu)建ΔrfbE和ΔrfbD突變株,通過比較突變株和野毒株的細菌表型、生長曲線、在小鼠巨噬細胞RAW264.7胞內(nèi)生存能力、在BALB/c小鼠動物模型上的毒力情況,來探討不完整LPS結(jié)構(gòu)對布氏桿菌S2308生物學功能和毒力特性的影響;并通過監(jiān)測ΔrfbE免疫后小鼠血清針對S2308產(chǎn)生的抗體效價、細胞因子表達,小鼠脾臟內(nèi)MHC分子和共刺激分子在轉(zhuǎn)錄水平的表達,以及ΔrfbE免疫后小鼠對S2308攻毒產(chǎn)生的保護力,來評價ΔrfbE免疫保護性,探究其做為新型減... 

【文章來源】:揚州大學江蘇省

【文章頁數(shù)】:88 頁

【學位級別】:博士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
符號說明
第一章 文獻綜述
    1 布氏桿菌病危害
    2 布氏桿菌病流行現(xiàn)狀
    3 布氏桿菌病病原
    4 布氏桿菌胞內(nèi)生存機制
    5 布氏桿菌主要毒力因子
    6 布氏桿菌疫苗
    7 布氏桿菌LPS相關(guān)基因突變株
    8 布氏桿菌的免疫機制
    9 本研究的目的和意義
第二章 流產(chǎn)布氏桿菌LPS突變株ΔrfbE的構(gòu)建及其生物學特性研究
    1 材料
    2 方法
    3 結(jié)果
    4 討論
第三章 流產(chǎn)布氏桿菌LPS突變株ΔrfbD的構(gòu)建及其生物學特性研究
    1 材料
    2 方法
    3 結(jié)果
    4 討論
全文結(jié)論
參考文獻
致謝
攻讀學位期間發(fā)表的學術(shù)論文


【參考文獻】:
期刊論文
[1]淺談布魯氏菌疫苗的研究進展[J]. 鄧文星,李芳,蘇益瓊,李紀春.  中國畜禽種業(yè). 2012(04)
[2]布魯氏菌毒力基因的研究狀況[J]. 曹小安,邱昌慶,秦天達.  中國人獸共患病學報. 2009(07)
[3]布氏桿菌病研究進展[J]. 王金良,沈志強.  中國動物保健. 2008(06)
[4]布魯氏菌自殺載體的改建及其在突變株構(gòu)建中的應用[J]. 王玉飛,陳澤良,喬鳳,汪舟佳,杜昕穎,苑錫銅,黃留玉.  世界華人消化雜志. 2007(27)
[5]ABC轉(zhuǎn)運蛋白的結(jié)構(gòu)與轉(zhuǎn)運機制[J]. 王華丙,張振義,包銳,陳宇星.  生命的化學. 2007(03)
[6]布氏菌減毒活菌苗的研究進展[J]. 李鵬,焦淑成,王希良.  中國地方病防治雜志. 2007(02)
[7]布魯菌毒力因子研究進展[J]. 趙忠鵬,王希良.  微生物學免疫學進展. 2007(01)
[8]布魯氏菌病概述[J]. 齊景文.  中國獸醫(yī)雜志. 2004(09)
[9]布氏菌病研究進展[J]. 尚德秋.  中國地方病防治雜志. 2004(04)
[10]布氏桿菌病概況及其研究進展[J]. 胡森,步志高.  畜牧獸醫(yī)科技信息. 2003(12)

博士論文
[1]IV型分泌系統(tǒng)調(diào)控布魯氏菌胞內(nèi)生存的分子機制研究[D]. 王玉飛.中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院 2008



本文編號:3553507

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