病毒病是目前影響畜牧業(yè)生產(chǎn)的重要疾病之一。許多研究表明某些天然植物的活性成分具有良好的抗病毒功效。沙冬青是天然植物的一種。已有報道表明，沙冬青總生物堿具有抗病毒特性。為了進一步深入研究沙冬青生物堿的抗病毒活性特點和安全性，本研究進行了沙冬青體內(nèi)、外抗BPIV-3病毒試驗及亞急性毒性試驗研究。本文的主要研究內(nèi)容如下：1.沙冬青種子總生物堿體外抗牛副流感病毒（III型）的試驗研究采用MTT法和細胞病變法測定沙冬青種子總生物堿對MDBK細胞的毒性,以病毒唑為陽性對照物，通過沙冬青總生物堿與MDBK細胞的四種作用方式，觀察病毒引起的細胞毒性效應（CPE）,測定OD值檢測細胞活性，計算病毒抑制率，半數(shù)毒性濃度（TC50），半數(shù)抑制濃度（IC50），治療指數(shù)（TI），結(jié)果表明，生物堿的安全濃度為0.31mg/mL，半數(shù)毒性濃度TC50=2.19mg/ml，病毒TCI5=10-7.733/0.1mL，直接作用方式給藥IC50=0.25mg/mL，最高病毒抑制率為66.15%，TI為8.76；抑制作用方式給藥IC50=0.203mg/mL，最高病毒抑制率為52.91%，TI為10.79；阻斷作用方式給... 

【文章來源】：甘肅農(nóng)業(yè)大學甘肅省

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Summary
縮略詞表
第一部分 綜述
    1.生物堿的研究進展
        1.1 生物堿的概述
        1.2 生物堿理化特性和提取方法
        1.3 生物堿分類和功能
    2.沙冬青的研究進展
        2.1 沙冬青的概述
        2.2 沙冬青化學成分的研究概況
        2.3 沙冬青化學成分藥理作用研究概況
    3.中藥抗病毒研究進展
    4 試驗研究目的和意義
    5 研究內(nèi)容
第二部分 試驗部分
    第一章 沙冬青總生物堿體外抗牛副流感病毒3型（BPIV-3）的試驗研究
        1 材料
            1.1 試驗藥物
            1.2 毒株與細胞
            1.3 主要試劑
            1.4 試驗儀器及器械
            1.5 主要溶液配制
        2 方法
            2.1 細胞的復蘇與傳代
            2.2 生長曲線的繪制
            2.3 沙冬青生物堿對MDBK細胞的毒性試驗
            2.4 細胞活性試驗
            2.5 病毒TCID50測定[77]
            2.6 生物堿抗病毒活性的測定
            2.7 試驗分析方法
            2.8 統(tǒng)計學處理
        3. 試驗結(jié)果
            3.1 細胞生長曲線結(jié)果
            3.2 沙冬青生物堿對MDKB細胞毒性測定結(jié)果
            3.3 病毒唑（利巴韋林Ribavirin）對牛腎細胞毒性測定結(jié)果
            3.4 病毒TCID50結(jié)果
            3.5 沙冬青生物堿對病毒感染細胞直接作用的測定結(jié)果
            3.6 沙冬青生物堿對病毒感染細胞抑制作用的測定結(jié)果
            3.7 沙冬青生物堿對病毒感染細胞阻斷作用的測定結(jié)果
            3.8 沙冬青生物堿對病毒感染細胞綜合作用的測定結(jié)果
        4.討論
    第二章 沙冬青種子總生物堿體內(nèi)抗牛副流感病毒Ⅲ型(BPIV-3)的試驗研究
        1 材料
            1.1 試驗藥物
            1.2 毒株
            1.3 試驗動物
            1.4 實驗儀器
        2 實驗方法
            2.1 實驗分組
            2.2 小鼠病毒LD50的測定[82-83]
            2.3 肺炎模型的建立及沙冬青生物堿對病毒感染小鼠肺指數(shù)的測定[84]
            2.4 沙冬青生物堿對小鼠保護作用的測定
            2.5 統(tǒng)計學處理
        3.實驗結(jié)果
            3.1 病毒LD50的測定結(jié)果
            3.2 肺炎模型的建立及其肺指數(shù)的測定
            3.3 沙冬青生物堿對小鼠保護作用的測定
        4.討論
    第三章 沙冬青總生物堿對小鼠亞急性毒性試驗研究
        1 材料與方法
            1.1 試驗藥品
            1.2 試驗動物
            1.3 試驗方法
            1.4 數(shù)據(jù)處理
        2 結(jié)果與分析
            2.1 沙冬青種子總生物堿對小鼠自然狀況和體重的影響
            2.2 沙冬青種子總生物堿對小鼠血液生化指標的影響
            2.3 沙冬青種子總生物堿對小鼠血液生理的影響
            2.4 沙冬青種子總生物堿對小鼠病理組織學的影響
        3 討論與結(jié)論
全文結(jié)論
附圖
參考文獻
致謝
作者簡介
導師簡介


【參考文獻】：
期刊論文
[1]沙冬青種子總生物堿對小鼠急性毒性試驗研究[J]. 相猛,魯延剛,石廣亮,劉宇,王學紅,梁劍平,賈寧.  甘肅農(nóng)業(yè)大學學報. 2012(01)
[2]沙冬青生物堿對MDCC-MSB1端粒酶活性和細胞凋亡的影響[J]. 亢愷,方梅,賈寧.  中國獸醫(yī)科學. 2011(04)
[3]沙冬青生物堿對MDCC-MSB1細胞增殖及細胞線粒體膜電位的影響[J]. 哈利,張惠英,賈寧,方梅.  中國獸醫(yī)學報. 2011(02)
[4]蒙藥沙冬青的化學成分研究[J]. 張興群,楊曉霞,陳婷,邵志宇.  西北植物學報. 2010(05)
[5]牛副流感病毒3型的分離鑒定[J]. 劉鵬,侯喜林,周玉龍,樸范澤.  微生物學通報. 2009(09)
[6]沙冬青地上部分的化學成分研究[J]. 田曉明,陳世忠,屠鵬飛,雷連娣.  中國中藥雜志. 2008(19)
[7]JA1對體外培養(yǎng)的Hep細胞和小鼠皮下移植性Hep細胞凋亡的影響[J]. 賈寧,方梅,薛妍.  中國獸醫(yī)科學. 2008(04)
[8]JA1對體外培養(yǎng)肝癌細胞線粒體膜電位及wt-p53基因表達的影響[J]. 賈寧,方梅.  甘肅農(nóng)業(yè)大學學報. 2008(02)
[9]黃芩苷體內(nèi)抗流感病毒作用[J]. 初正云,初明,滕宇.  中國中藥雜志. 2007(22)
[10]奶牛無漿體病PCR診斷方法的建立及應用[J]. 周玉龍,侯喜林,樸范澤.  中國預防獸醫(yī)學報. 2007(09)



本文編號：3551479