2019年1月山東省萊蕪某豬場(chǎng)保育豬在免疫豬瘟（classicai swine fever,CSF）疫苗后發(fā)病,病死率高達(dá)60%。對(duì)病豬進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室綜合診斷,確診為豬瘟病毒（classical swine fever virus,CSFV）感染,經(jīng)檢測(cè)分離毒株（Laiwu2019）存在變異。為進(jìn)一步了解山東地區(qū)CSFV遺傳進(jìn)化情況,2019年上半年從山東部分地區(qū)收集23份CSF疑似病料,確定17份陽(yáng)性并成功分離到14株CSFV,對(duì)分離毒株的E2基因進(jìn)行遺傳進(jìn)化分析。結(jié)果表明,分離的15株CSFV間的核苷酸與推導(dǎo)氨基酸的同源性分別為97.0%～99.9%和97.1%～100.0%,與參考株間的同源性分別為81.9%～97.4%和88.7%～99.7%。通過(guò)與Shimen株糖基化位點(diǎn)分析,分離株僅在"⁹⁸⁶NYAK-NYTK⁹⁸⁹"處發(fā)生突變。分離毒株與Shimen株抗原表位分析比較,15株分離株在抗原表位"⁷¹⁷TTWKEYSH⁷²⁴"發(fā)生了"K⁷²⁰R"的突變,在"^77... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2020,40(09)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

病豬臨床剖檢病變

鏡檢病理切片可見(jiàn),腎小管上皮細(xì)胞變性壞死,腎間質(zhì)出血(圖2A);淋巴結(jié)充血、出血,淋巴細(xì)胞壞死(圖2B);回盲瓣淋巴濾泡出血性壞死(圖2C);扁桃體黏膜上皮細(xì)胞壞死、脫落,淋巴組織壞死,隱窩內(nèi)充滿(mǎn)壞死物(圖2D);膀胱黏膜固有層充血、出血(圖2E);脾臟充血,淋巴細(xì)胞壞死(圖2F)。2.3 病毒檢測(cè)結(jié)果

將18份陽(yáng)性病料研磨液經(jīng)過(guò)0.22 μm濾器過(guò)濾后,用DMEM稀釋10倍,接種于生長(zhǎng)密度為70%單層PK-15細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,連續(xù)盲傳3代,收取帶毒細(xì)胞,于-80℃反復(fù)凍融3次,通過(guò)CSFV全長(zhǎng)引物RT-PCR擴(kuò)增結(jié)果顯示15份細(xì)胞病毒液檢測(cè)為陽(yáng)性(圖5),并將15株分離毒株進(jìn)行命名(表3)。圖4 23份疑似CSF病料RT-PCR檢測(cè)結(jié)果


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