雞蛋的產(chǎn)量和蛋品質(zhì)與國(guó)民經(jīng)濟(jì)和人民生活息息相關(guān),以地方品種雞為基礎(chǔ)進(jìn)行雞蛋生產(chǎn)潛力巨大,改良地方品種蛋雞勢(shì)在必行。欣華雞是以地方雞品種培育的配套系,有耐粗飼、抗逆性及適應(yīng)性強(qiáng)等特點(diǎn),但對(duì)中低遺傳力性狀（開產(chǎn)日齡、產(chǎn)蛋數(shù)及蛋品質(zhì)等）使用常規(guī)方法的育種改良并不理想。本研究以欣華雞E系為試驗(yàn)素材,采用PCR-RFLP方法對(duì)DRD2、IGF-1、HDLBP和ADRA1β基因進(jìn)行分型,使用分子生物學(xué)方法對(duì)繁殖生長(zhǎng)軸中四個(gè)基因的SNPs位點(diǎn)多態(tài)性進(jìn)行檢測(cè)并與蛋用性狀進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析,希望從中篩選潛在分子標(biāo)記,為加快欣華雞品種改良和育種奠定基礎(chǔ)。本研究試驗(yàn)結(jié)果如下:1、對(duì)DRD2、IGF-1、HDLBP和ADRA1β基因的組織表達(dá)譜研究發(fā)現(xiàn)不同時(shí)期欣華母雞的心、肝、腎、腦、胸肌、輸卵管和垂體組織中存在m RNA水平的表達(dá)差異。2、通過(guò)一代測(cè)序和PCR-RFLP的方法共檢測(cè)出位于DRD2、IGF-1、HDLBP和ADRA1β基因調(diào)控區(qū)、內(nèi)含子和外顯子共31個(gè)SNP位點(diǎn)。（1）SNP位點(diǎn)與產(chǎn)蛋性狀的關(guān)聯(lián)分析發(fā)現(xiàn):DRD2基因與開產(chǎn)日齡相關(guān)的位點(diǎn)是SNP1、SNP4位點(diǎn);與產(chǎn)蛋數(shù)相關(guān)的位點(diǎn)是SNP2位點(diǎn);與開... 

【文章來(lái)源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：94 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

候選基因在繁殖生長(zhǎng)軸的調(diào)控通路圖

2.2 實(shí)驗(yàn)方法2.2.1 雞基因組 DNA 的提取與檢測(cè)2.2.1.1 雞基因組 DNA 的提取采用常規(guī)苯酚抽提法提取雞基因組總DNA，溶于TE溶液中。用濃度測(cè)定儀測(cè)定DNA濃度，并稀釋DNA終濃度至 50-300ng/μL，于‐20℃保存?zhèn)溆谩＞唧w步驟如下：（1）取 50μL血樣加入新的EP管中，加 1Χ500μL STE，在室溫條件下靜置5-10min，充分溶血；（2）將混合血樣 8000 r/min離心 4℃10min，棄上清；（3）重復(fù)上一個(gè)步驟；圖 2 本研究技術(shù)路線圖Fig. 2 The research technology roadmap

圖 3 欣華雞各器官或組織總 RNA 瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)結(jié)果Fig.3 Agarose gel electrophoresis of tatal RNARD2 基因組織、時(shí)期表達(dá)譜，SNP 檢測(cè)與關(guān)聯(lián)分析DRD2 基因組織、時(shí)期表達(dá)譜定量 RT-PCR 方法，分析欣華雞三個(gè)時(shí)期（21 周齡、36 周齡、58 周、腎、腦、胸肌、輸卵管和垂體 7 組織中 DRD2 基因 mRNA 的相對(duì)表圖 3；在大腦組織中，欣華雞 36 周齡該基因 mRNA 的相對(duì)表達(dá)量極顯和 58 周齡個(gè)體；在垂體組織中，36 周齡該基因 mRNA 的相對(duì)表達(dá)量8 周齡個(gè)體，但與 21 周齡無(wú)顯著差異；在胸肌組織中，58 周齡該基因表達(dá)量極顯著高于 21 周齡和 36 周齡個(gè)體。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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