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內(nèi)蒙古絨山羊皮膚毛囊毛乳頭細(xì)胞系的建立及其基因表達(dá)譜型的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-12-10 10:36
  毛乳頭控制毛囊的新生和毛囊的大小,是毛囊生長(zhǎng)和毛囊周期的控制中樞。內(nèi)蒙古絨山羊體表皮膚具有兩種大小和質(zhì)地差異顯著的毛囊,初級(jí)毛囊(產(chǎn)粗毛)和次級(jí)毛囊(產(chǎn)絨)。絨山羊初級(jí)毛囊與次級(jí)毛囊大小上的顯著差異使其成為研究毛囊形態(tài)發(fā)生發(fā)育機(jī)制的優(yōu)良模型。而次級(jí)毛囊比初級(jí)毛囊更為明確的毛囊年生長(zhǎng)周期及每個(gè)周期的易于劃分等特點(diǎn)也為研究毛囊周期機(jī)制提供了良好的實(shí)驗(yàn)材料。本研究通過(guò)Ⅱ型膠原酶消化結(jié)合機(jī)械分離的方法,共建立了三種毛乳頭細(xì)胞系,分別為毛囊生長(zhǎng)期初級(jí)毛囊毛乳頭細(xì)胞、生長(zhǎng)期次級(jí)毛囊毛乳頭細(xì)胞和休止期次級(jí)毛囊毛乳頭細(xì)胞。我們對(duì)三種毛乳頭細(xì)胞的形態(tài)和生長(zhǎng)情況進(jìn)行了檢測(cè),發(fā)現(xiàn)體外培養(yǎng)條件下所有三種毛乳頭細(xì)胞均呈三角形或多角形,均高表達(dá)毛乳頭細(xì)胞特異性標(biāo)記分子α-平滑肌肌動(dòng)蛋白。不同的是,只有毛囊生長(zhǎng)期初級(jí)毛囊毛乳頭細(xì)胞和生長(zhǎng)期次級(jí)毛囊毛乳頭細(xì)胞能夠在體外培養(yǎng)條件下形成細(xì)胞凝集塊,休止期次級(jí)毛囊毛乳頭細(xì)胞在任何代次均不能形成。隨后的細(xì)胞增殖能力檢測(cè)發(fā)現(xiàn)休止期次級(jí)毛囊毛乳頭細(xì)胞較另外兩種毛乳頭細(xì)胞增殖能力弱。高通量轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)在檢測(cè)基因表達(dá)水平的方面具有高效、全面和精確的特點(diǎn)。以山羊基因組全序列測(cè)序結(jié)果為... 

【文章來(lái)源】:內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū) 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:84 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞表
前言
    參考文獻(xiàn)
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    一、毛囊的結(jié)構(gòu)和功能
    二、毛乳頭與毛囊的發(fā)生發(fā)育
    三、毛乳頭與毛囊的生長(zhǎng)周期
    四、毛乳頭與毛囊干細(xì)胞的聯(lián)系
    五、常見(jiàn)的基因表達(dá)鑒定技術(shù)
        1 反轉(zhuǎn)錄差異顯示技術(shù)(Different Display Reverse Transcription-PCR,DDRT-PCR)
        2 抑制性消減雜交技術(shù)(Suppression Subtractive Hybridization,SSH)
        3 高通量轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)(Transcriptome Sequencing,RNA-Seq)
        4 基因芯片技術(shù)(Microarray)
    參考文獻(xiàn)
第二部分 研究論文
    第一章 絨山羊初級(jí)毛囊、次級(jí)毛囊毛乳頭細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和鑒定
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結(jié)果與討論
            2.1 絨山羊初級(jí)毛囊、次級(jí)毛囊毛乳頭細(xì)胞的分離、培養(yǎng)
            2.2 毛乳頭細(xì)胞的凍存和復(fù)蘇能力
            2.3 毛乳頭細(xì)胞的鑒定
            2.4 毛乳頭細(xì)胞的增殖能力
        3 本章小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
    第二章 毛囊生長(zhǎng)期初級(jí)毛囊毛乳頭細(xì)胞與次級(jí)毛囊毛乳頭細(xì)胞基因表達(dá)差異研究
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結(jié)果
            2.1 毛囊生長(zhǎng)期初級(jí)毛囊毛乳頭細(xì)胞和生長(zhǎng)期次級(jí)毛囊毛乳頭細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果
            2.2 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序數(shù)據(jù)的校驗(yàn)
        3 討論
            3.1 初級(jí)毛囊毛乳頭細(xì)胞和次級(jí)毛囊毛乳頭細(xì)胞之間參與血管新生和可能的毛囊形態(tài)發(fā)生的差異表達(dá)基因
            3.2 ECM基因在初級(jí)毛囊毛乳頭細(xì)胞和次級(jí)毛囊毛乳頭細(xì)胞中存在表達(dá)差異
            3.3 Wnt/β-catenin/Lefl信號(hào)通路里的差異表達(dá)基因參與毛囊形態(tài)發(fā)生或重建
        4 本章小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
    第三章 次級(jí)毛囊生長(zhǎng)期毛乳頭細(xì)胞與休止期毛乳頭細(xì)胞基因表達(dá)差異研究
        摘要
        1 材料和方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結(jié)果和討論
            2.1 兩種毛乳頭細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組譜型
            2.2 ana-SHFDPCs和tel-SHFDPCs兩者中參與細(xì)胞周期通路的差異表達(dá)基因
            2.3 ana-SHFDPCs和tel-SHFDPCs兩者中參與細(xì)胞黏附分子通路的差異表達(dá)基因
            2.4 ana-SHFDPCs和tel-SHFDPCs兩者中參與細(xì)胞因子-細(xì)胞因子受體相互作用通路的差異表達(dá)基因
            2.5 ana-SHFDPCs和tel-SHFDPCs兩者中參與p53信號(hào)通路的差異表達(dá)基因
            2.6 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序數(shù)據(jù)的校驗(yàn)
        3 本章小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
結(jié)論
致謝
攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]內(nèi)蒙古阿爾巴斯絨山羊毛囊結(jié)構(gòu)及形態(tài)發(fā)生過(guò)程研究[J]. 張燕軍,尹俊,李金泉,李長(zhǎng)青.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2007(05)



本文編號(hào):3532453

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