試驗(yàn)旨在探究微生物合成Levan果聚糖的新途徑并優(yōu)化其合成條件。利用轉(zhuǎn)入果聚糖蔗糖轉(zhuǎn)移酶基因的重組谷氨酸棒狀桿菌進(jìn)行全細(xì)胞催化合成Levan果聚糖,并采用響應(yīng)面法以Levan果聚糖產(chǎn)量為響應(yīng)值優(yōu)化催化合成條件。首先設(shè)計(jì)Plackett-Burman試驗(yàn)從7個(gè)相關(guān)因素(蔗糖濃度、菌體濃度、轉(zhuǎn)化時(shí)間、轉(zhuǎn)化pH、PBS中Ca²⁺和Mg²⁺濃度、Levan果聚糖提取時(shí)的乙醇終濃度)中篩選出影響Levan果聚糖產(chǎn)量的3個(gè)主要因素(蔗糖濃度、乙醇終濃度和Ca²⁺濃度);再用篩選出的3個(gè)最重要因素進(jìn)行最陡爬坡試驗(yàn)逼近最大響應(yīng)值區(qū)域;最后運(yùn)用BBD響應(yīng)面法優(yōu)化確定3個(gè)主要因素之間的交互作用和最佳合成條件。結(jié)果顯示,初始試驗(yàn)中Levan果聚糖平均產(chǎn)量為0.069 g/mL。經(jīng)過響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化對(duì)利用重組谷氨酸棒狀桿菌進(jìn)行全細(xì)胞催化合成Levan果聚糖產(chǎn)量影響最大的因素為蔗糖濃度,其次為提取時(shí)的乙醇終濃度,最后是轉(zhuǎn)化液中的Ca²⁺濃度。當(dāng)蔗糖濃度為52.71%、乙醇終濃度為85.31%、Ca²⁺濃度...

【文章來源】： 中國畜牧獸醫(yī). 2020,47(11)北大核心

【文章頁數(shù)】：10 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 菌株
        1.1.2 主要試劑及儀器
    1.2 方法
        1.2.1 全細(xì)胞催化試驗(yàn)基本流程
        1.2.2 Plackett-Burman試驗(yàn)
        1.2.3 最陡爬坡試驗(yàn)
        1.2.4 響應(yīng)面Box-Behnken Design試驗(yàn)(RSM-BBD試驗(yàn))
        1.2.5 驗(yàn)證試驗(yàn)
2 結(jié) 果
    2.1 全細(xì)胞催化初始試驗(yàn)結(jié)果
    2.2 Plackett-Burman試驗(yàn)結(jié)果
    2.3 最陡爬坡試驗(yàn)結(jié)果
    2.4 BBD試驗(yàn)結(jié)果
        2.4.1 回歸模型的建立及分析
        2.4.2 響應(yīng)曲面及其等高線
    2.5 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果分析
3 討 論
4 結(jié) 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]微生物levan果聚糖及其益生功能研究進(jìn)展 [J]. 姜靜,劉麗娜,張鑫,趙丹.  食品工業(yè)科技. 2020(13)
[2]響應(yīng)面法優(yōu)化當(dāng)歸補(bǔ)血湯液體發(fā)酵工藝 [J]. 陳柯源,郝寶成,丁自強(qiáng),梁劍平.  中國畜牧獸醫(yī). 2019(10)
[3]響應(yīng)面優(yōu)化轉(zhuǎn)透明顫菌血紅蛋白基因里氏木霉液體發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的培養(yǎng)條件 [J]. 嚴(yán)琳,鐘紅梅,左婕,陳智慧,羅又才,陳啟月,伍紅.  中國畜牧獸醫(yī). 2018(03)
[4]羅伊氏乳桿菌果聚糖蔗糖酶基因的克隆與表達(dá) [J]. 許本宏,林俊芳,郭麗瓊,葉志偉,李嬌嬌,郭心悅.  中國食品學(xué)報(bào). 2017(02)
[5]產(chǎn)大分子levan的果糖基蔗糖轉(zhuǎn)移酶的原核表達(dá)及酶學(xué)性質(zhì) [J]. 宋廷富,姜騰飛,李茜,常斐斐,黃國印,付佳琪,喬代蓉,徐輝.  應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào). 2016(02)
[6]微生物來源的果聚糖的功能與應(yīng)用 [J]. 韓瑨,吳正鈞,鄢明輝,游春蘋,高彩霞.  食品研究與開發(fā). 2016(04)
[7]重組谷氨酸棒桿菌發(fā)酵L-苯丙氨酸培養(yǎng)基的優(yōu)化 [J]. 張傳志,康振,堵國成,陳堅(jiān),余曉斌.  微生物學(xué)通報(bào). 2015(01)
[8]Levan蔗糖酶及其在Levan果聚糖合成中的應(yīng)用 [J]. 陸娟,盧麗麗,肖敏.  微生物學(xué)報(bào). 2014(06)
[9]Levan果聚糖的應(yīng)用與生產(chǎn)研究進(jìn)展 [J]. 陸娟,唐俊,肖敏,屈長青.  生物學(xué)雜志. 2013(06)
[10]重組酪氨酸酚裂解酶全細(xì)胞催化合成L-酪氨酸 [J]. 常俊俊,劉均忠,劉茜,焦慶才.  精細(xì)化工. 2013(10)

碩士論文
[1]Bacillus amyloliquefaciens H47果聚糖蔗糖酶基因的克隆、表達(dá)及其應(yīng)用研究[D]. 徐君.江南大學(xué). 2016
[2]產(chǎn)果聚糖蔗糖酶菌株篩選及酶的分離純化、酶學(xué)性質(zhì)研究和levan果聚糖的酶法合成[D]. 李潤靜.江南大學(xué). 2013
[3]谷氨酸棒狀桿菌基因敲除系統(tǒng)的構(gòu)建[D]. 譚延振.江南大學(xué). 2012



本文編號(hào)：3532291