本研究應(yīng)用PureSperm離心法和上游法進(jìn)行流式細(xì)胞儀分離牛原精去除死精子方法研究,目的是通過(guò)去除原精中的死精子進(jìn)一步提高牛精子分離-性控凍精生產(chǎn)效率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：①PureSperm離心法處理原精后死精率降低（原精：處理組=24.96%vs13.45%）,但解凍后活力（原精：處理組=0.38vs0.31）和存活時(shí)間（原精處理組=4.34h vs3.59h）下降。②上游法精子浮游活力呈垂直分布,底部至頂部精子活力逐步提高、精子數(shù)量逐步下降。上游法處理原精后死精率（原精：處理組=14.11%vs5.81%）顯著下降（P<0.05）,解凍后活力（原精：處理組=0.47vs0.47）及解凍后存活時(shí)間（原精：處理組=6.Oh vs6.17h）均無(wú)顯著差異（P>0.05）。③上游法處理的精液,與原精相比分離效率提升16.19%,但PureSperm法處理后精液分離效率與原精相比沒(méi)有明顯效果。④上游法處理后與原精相比頂體完整性（原精：處理組=0.61vs0.61）、線粒體活性（原精：處理組=0.43vs0.47）、膜完整性（原精：處理組=0.22vs0.26）均無(wú)顯著差異（P>0... 

【文章來(lái)源】：內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū) 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 流式細(xì)胞儀精子分離簡(jiǎn)介
        1.1.1 流式細(xì)胞儀結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介圖
        1.1.2 流式細(xì)胞儀分離精子的原理
    1.2 流式細(xì)胞儀精子分離法存在問(wèn)題和應(yīng)用前景
    1.3 去除死精子技術(shù)研究進(jìn)展
    1.4 研究目的與意義
第二章 PureSperm離心法去死精子及精子分離-性控凍精生產(chǎn)技術(shù)研究
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 主要儀器設(shè)備
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 基礎(chǔ)液的配制
        2.1.4 采精、運(yùn)輸和原精保存
    2.2 PureSperm法處理精液
    2.3 精子的染色、分離和冷凍保存
    2.4 解凍后分離精子的評(píng)估
        2.4.1 解凍后精子的活力檢測(cè)
        2.4.2 解凍后精子的存活時(shí)間測(cè)定
    2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
第三章 上游法去死精子及精子分離-性控凍精生產(chǎn)技術(shù)研究
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 主要儀器設(shè)備
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 基礎(chǔ)液的配制
        3.1.4 采精、運(yùn)輸和原精保存
    3.2 上游法處理精液
    3.3 精子的染色結(jié)合精子上游法處理
    3.4 精子分離和冷凍保存
    3.5 解凍后分離精子的評(píng)估
        3.5.1 解凍后精子的活力檢測(cè)
        3.5.2 解凍后精子的存活時(shí)間測(cè)定
        3.5.3 解凍后分離精子的質(zhì)膜完整性檢測(cè)
        3.5.4 解凍后分離精子的頂體完整性檢測(cè)
        3.5.5 解凍后分離精子的線粒體活性檢測(cè)
    3.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
第四章 結(jié)果及討論
    4.1 PureSperm法去死精子及精子分離-性控凍精生產(chǎn)技術(shù)研究
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.1.2 討論
    4.2 上游法去死精子及精子分離-性控凍精生產(chǎn)技術(shù)研究
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            4.2.1.1 使用10ml注射器上游法處理
            4.2.1.2 使用60ml注射器上游法處理
            4.2.1.3 精子染色后使用60ml注射器上游法處理
            4.2.1.4 上游法處理后分離精子解凍后質(zhì)膜完整性、線粒體活性和頂體完整性檢測(cè)
        4.2.2 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]馬鹿X/Y精子分離及人工授精技術(shù)研究[J]. 胡樹(shù)香,王建國(guó),劉樹(shù)江,張立民,周文忠,孫偉,錢松晉,李煜,李喜和.  中國(guó)草食動(dòng)物. 2009(05)
[2]應(yīng)用X精子冷凍精液生產(chǎn)體內(nèi)性控胚胎的試驗(yàn)研究進(jìn)展[J]. 黃河,李鑫,扈長(zhǎng)春,胡莉萍,羅應(yīng)榮.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2005(07)



本文編號(hào)：3523391