為確定引起西藏牦牛常發(fā)多發(fā)肺炎的細(xì)菌病原體,采集145份西藏牦牛鼻腔粘液,通過(guò)病原分離培養(yǎng)、菌落形態(tài)觀察、生化試驗(yàn)和PCR鑒定等方法進(jìn)行細(xì)菌檢測(cè);通過(guò)OD630和pH變化對(duì)分離株進(jìn)行生長(zhǎng)曲線測(cè)定;采用K-B紙片法進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn)。結(jié)果顯示:從145份牦牛鼻腔粘液中分離得到10株牛支原體;分離株菌落形態(tài)和生化試驗(yàn)結(jié)果均符合牛支原體的生物學(xué)特性;通過(guò)PCR分別擴(kuò)增得到238bp的uvrC特異性基因與1 500bp16SrRNA基因。10株分離株間的uvrC特異性基因和16SrRNA基因序列同源性較高,均與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)株P(guān)G45有高度同源性,uvrC特異性基因序列和16SrRNA基因序列與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)株P(guān)G45的同源性分別為98.4%～100%和99.1%～99.9%。生長(zhǎng)曲線測(cè)定表明,分離株在PPLO培養(yǎng)基中培養(yǎng)24h內(nèi)為遲緩期,培養(yǎng)42h后開始進(jìn)入穩(wěn)定期,78h后開始進(jìn)入衰亡期;3個(gè)分離株培養(yǎng)物的平均pH隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)不斷降低,其中24～42h期間pH下降最快,隨后下降速度減慢,至78h后幾乎不再變化。藥物敏感性試驗(yàn)表明,分離株對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類、氨基糖苷類和林可胺類等藥物均存在不同程度的耐藥,但... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,25(12)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：9 頁(yè)

【部分圖文】：

圖1 分離株菌落形態(tài)（40X)

16SrRNA基因同源性分析結(jié)果顯示，10株西藏牦牛牛支原體分離株之間序列同源性為99.4%～100%；與我國(guó)牛支原體地方株的同源性為99.1%～100%；與日本株同源性為99.2%～100%；與匈牙利株的同源性為99.1%～100%；與瑞士株同源性為99.2%～100%；與PG45株同源性為99.1%～99.9%；與PG2株的同源性為98.2%～98.7%；與PG1、PG3、G5的同源性為80.1%～80.7%。2.4.2 基因進(jìn)化樹分析

本試驗(yàn)從145份樣品中得到的10份純培養(yǎng)物，經(jīng)菌落形態(tài)觀察、生化鑒定、PCR鑒定及序列分析，證實(shí)其均為牛支原體，其分離率為6.90%(10/145）。2.5 生長(zhǎng)曲線測(cè)定

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]林芝市牛支原體病流行病學(xué)調(diào)查[J]. 嚴(yán)明帥,蘇中華,王冬經(jīng),王子,唐無(wú)雙,索朗斯珠,牛家強(qiáng).  高原農(nóng)業(yè). 2020(02)
[2]牛支原體檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J]. 王桂玲,吳勝昔,梁望旺,馬培杰,曾政,黃恒,李志.  重慶理工大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)). 2019(01)
[3]西藏牦牛牛支原體感染的血清學(xué)調(diào)查分析[J]. 王冬經(jīng),陳建春,徐業(yè)芬,索朗斯珠,蘇中華,牛家強(qiáng).  甘肅畜牧獸醫(yī). 2018(06)
[4]新疆不同地區(qū)牛支原體分離株oppD/F基因的克隆和序列分析[J]. 師燕霞,凌晨,楊銘偉,張銳,朱玲,阮東,王靜梅,剡根強(qiáng).  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2018(02)
[5]畜禽支原體耐藥性及耐藥機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 宮曉煒,馬文瑛,陳啟偉,鄭福英,劉永生.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2017(08)
[6]牛支原體TaqMan實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)方法的建立[J]. 李建,高航飛,安維雪,牛同州,趙永春,遇培之,滿都拉圖,烏力吉那仁,王建國(guó),申之義.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2017(06)
[7]寧夏某肉牛場(chǎng)牛支原體分離鑒定及病理組織學(xué)觀察[J]. 郭亞男,曹思婷,何生虎,王爽,張?chǎng)?孫鵬.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2017(03)
[8]牦牛分布特點(diǎn)及其種群數(shù)量[J]. 孟慶輝,陳永杏,董紅敏,白加德,劉艷菊,郭青云,成振華.  家畜生態(tài)學(xué)報(bào). 2017(03)
[9]西藏和四川紅原牦牛支原體感染的血清學(xué)檢測(cè)[J]. 李坤,韓照清,趙曉東,謝榮清,官久強(qiáng),李家奎.  畜牧與獸醫(yī). 2015(12)
[10]西藏牦牛遺傳多樣性的ISSR分析[J]. 姚慧,鐘金城,姬秋梅,張成福,信金偉,陳智華,柴志欣.  生態(tài)學(xué)雜志. 2015(11)

博士論文
[1]寧夏地區(qū)永寧縣牛支原體病流行病學(xué)調(diào)查及防治技術(shù)研究[D]. 邵倩.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017

碩士論文
[1]牛支原體重組酶聚合酶擴(kuò)增（RPA）檢測(cè)方法的建立和樣品DNA提取方法的研究[D]. 翟肖輝.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2019
[2]牛支原體LAMP檢測(cè)方法的建立及體外傳代致弱菌株的特性鑒定[D]. 白智迪.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011



本文編號(hào)：3516305