西藏牦牛牛支原體的分離鑒定及其生長特性、耐藥性分析
發(fā)布時間：2021-11-24 16:01
為確定引起西藏牦牛常發(fā)多發(fā)肺炎的細菌病原體,采集145份西藏牦牛鼻腔粘液,通過病原分離培養(yǎng)、菌落形態(tài)觀察、生化試驗和PCR鑒定等方法進行細菌檢測;通過OD630和pH變化對分離株進行生長曲線測定;采用K-B紙片法進行藥物敏感性試驗。結果顯示:從145份牦牛鼻腔粘液中分離得到10株牛支原體;分離株菌落形態(tài)和生化試驗結果均符合牛支原體的生物學特性;通過PCR分別擴增得到238bp的uvrC特異性基因與1 500bp16SrRNA基因。10株分離株間的uvrC特異性基因和16SrRNA基因序列同源性較高,均與國際標準株PG45有高度同源性,uvrC特異性基因序列和16SrRNA基因序列與國際標準株PG45的同源性分別為98.4%～100%和99.1%～99.9%。生長曲線測定表明,分離株在PPLO培養(yǎng)基中培養(yǎng)24h內(nèi)為遲緩期,培養(yǎng)42h后開始進入穩(wěn)定期,78h后開始進入衰亡期;3個分離株培養(yǎng)物的平均pH隨著培養(yǎng)時間延長不斷降低,其中24～42h期間pH下降最快,隨后下降速度減慢,至78h后幾乎不再變化。藥物敏感性試驗表明,分離株對大環(huán)內(nèi)酯類、氨基糖苷類和林可胺類等藥物均存在不同程度的耐藥,但...
【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)大學學報. 2020,25(12)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】：9 頁
【部分圖文】：
圖1 分離株菌落形態(tài)（40X)
16SrRNA基因同源性分析結果顯示，10株西藏牦牛牛支原體分離株之間序列同源性為99.4%～100%；與我國牛支原體地方株的同源性為99.1%～100%；與日本株同源性為99.2%～100%；與匈牙利株的同源性為99.1%～100%；與瑞士株同源性為99.2%～100%；與PG45株同源性為99.1%～99.9%；與PG2株的同源性為98.2%～98.7%；與PG1、PG3、G5的同源性為80.1%～80.7%。2.4.2 基因進化樹分析
本試驗從145份樣品中得到的10份純培養(yǎng)物，經(jīng)菌落形態(tài)觀察、生化鑒定、PCR鑒定及序列分析，證實其均為牛支原體，其分離率為6.90%(10/145）。2.5 生長曲線測定
【參考文獻】：
期刊論文
[1]林芝市牛支原體病流行病學調(diào)查[J]. 嚴明帥,蘇中華,王冬經(jīng),王子,唐無雙,索朗斯珠,牛家強. 高原農(nóng)業(yè). 2020(02)
[2]牛支原體檢測方法研究進展[J]. 王桂玲,吳勝昔,梁望旺,馬培杰,曾政,黃恒,李志. 重慶理工大學學報(自然科學). 2019(01)
[3]西藏牦牛牛支原體感染的血清學調(diào)查分析[J]. 王冬經(jīng),陳建春,徐業(yè)芬,索朗斯珠,蘇中華,牛家強. 甘肅畜牧獸醫(yī). 2018(06)
[4]新疆不同地區(qū)牛支原體分離株oppD/F基因的克隆和序列分析[J]. 師燕霞,凌晨,楊銘偉,張銳,朱玲,阮東,王靜梅,剡根強. 中國獸醫(yī)學報. 2018(02)
[5]畜禽支原體耐藥性及耐藥機制研究進展[J]. 宮曉煒,馬文瑛,陳啟偉,鄭福英,劉永生. 中國畜牧獸醫(yī). 2017(08)
[6]牛支原體TaqMan實時熒光定量PCR檢測方法的建立[J]. 李建,高航飛,安維雪,牛同州,趙永春,遇培之,滿都拉圖,烏力吉那仁,王建國,申之義. 中國獸醫(yī)學報. 2017(06)
[7]寧夏某肉牛場牛支原體分離鑒定及病理組織學觀察[J]. 郭亞男,曹思婷,何生虎,王爽,張鑫,孫鵬. 動物醫(yī)學進展. 2017(03)
[8]牦牛分布特點及其種群數(shù)量[J]. 孟慶輝,陳永杏,董紅敏,白加德,劉艷菊,郭青云,成振華. 家畜生態(tài)學報. 2017(03)
[9]西藏和四川紅原牦牛支原體感染的血清學檢測[J]. 李坤,韓照清,趙曉東,謝榮清,官久強,李家奎. 畜牧與獸醫(yī). 2015(12)
[10]西藏牦牛遺傳多樣性的ISSR分析[J]. 姚慧,鐘金城,姬秋梅,張成福,信金偉,陳智華,柴志欣. 生態(tài)學雜志. 2015(11)
博士論文
[1]寧夏地區(qū)永寧縣牛支原體病流行病學調(diào)查及防治技術研究[D]. 邵倩.甘肅農(nóng)業(yè)大學 2017
碩士論文
[1]牛支原體重組酶聚合酶擴增（RPA）檢測方法的建立和樣品DNA提取方法的研究[D]. 翟肖輝.中國農(nóng)業(yè)科學院 2019
[2]牛支原體LAMP檢測方法的建立及體外傳代致弱菌株的特性鑒定[D]. 白智迪.華中農(nóng)業(yè)大學 2011
本文編號：3516305
【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)大學學報. 2020,25(12)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】：9 頁
【部分圖文】：
圖1 分離株菌落形態(tài)（40X)
16SrRNA基因同源性分析結果顯示，10株西藏牦牛牛支原體分離株之間序列同源性為99.4%～100%；與我國牛支原體地方株的同源性為99.1%～100%；與日本株同源性為99.2%～100%；與匈牙利株的同源性為99.1%～100%；與瑞士株同源性為99.2%～100%；與PG45株同源性為99.1%～99.9%；與PG2株的同源性為98.2%～98.7%；與PG1、PG3、G5的同源性為80.1%～80.7%。2.4.2 基因進化樹分析
本試驗從145份樣品中得到的10份純培養(yǎng)物，經(jīng)菌落形態(tài)觀察、生化鑒定、PCR鑒定及序列分析，證實其均為牛支原體，其分離率為6.90%(10/145）。2.5 生長曲線測定
【參考文獻】：
期刊論文
[1]林芝市牛支原體病流行病學調(diào)查[J]. 嚴明帥,蘇中華,王冬經(jīng),王子,唐無雙,索朗斯珠,牛家強. 高原農(nóng)業(yè). 2020(02)
[2]牛支原體檢測方法研究進展[J]. 王桂玲,吳勝昔,梁望旺,馬培杰,曾政,黃恒,李志. 重慶理工大學學報(自然科學). 2019(01)
[3]西藏牦牛牛支原體感染的血清學調(diào)查分析[J]. 王冬經(jīng),陳建春,徐業(yè)芬,索朗斯珠,蘇中華,牛家強. 甘肅畜牧獸醫(yī). 2018(06)
[4]新疆不同地區(qū)牛支原體分離株oppD/F基因的克隆和序列分析[J]. 師燕霞,凌晨,楊銘偉,張銳,朱玲,阮東,王靜梅,剡根強. 中國獸醫(yī)學報. 2018(02)
[5]畜禽支原體耐藥性及耐藥機制研究進展[J]. 宮曉煒,馬文瑛,陳啟偉,鄭福英,劉永生. 中國畜牧獸醫(yī). 2017(08)
[6]牛支原體TaqMan實時熒光定量PCR檢測方法的建立[J]. 李建,高航飛,安維雪,牛同州,趙永春,遇培之,滿都拉圖,烏力吉那仁,王建國,申之義. 中國獸醫(yī)學報. 2017(06)
[7]寧夏某肉牛場牛支原體分離鑒定及病理組織學觀察[J]. 郭亞男,曹思婷,何生虎,王爽,張鑫,孫鵬. 動物醫(yī)學進展. 2017(03)
[8]牦牛分布特點及其種群數(shù)量[J]. 孟慶輝,陳永杏,董紅敏,白加德,劉艷菊,郭青云,成振華. 家畜生態(tài)學報. 2017(03)
[9]西藏和四川紅原牦牛支原體感染的血清學檢測[J]. 李坤,韓照清,趙曉東,謝榮清,官久強,李家奎. 畜牧與獸醫(yī). 2015(12)
[10]西藏牦牛遺傳多樣性的ISSR分析[J]. 姚慧,鐘金城,姬秋梅,張成福,信金偉,陳智華,柴志欣. 生態(tài)學雜志. 2015(11)
博士論文
[1]寧夏地區(qū)永寧縣牛支原體病流行病學調(diào)查及防治技術研究[D]. 邵倩.甘肅農(nóng)業(yè)大學 2017
碩士論文
[1]牛支原體重組酶聚合酶擴增（RPA）檢測方法的建立和樣品DNA提取方法的研究[D]. 翟肖輝.中國農(nóng)業(yè)科學院 2019
[2]牛支原體LAMP檢測方法的建立及體外傳代致弱菌株的特性鑒定[D]. 白智迪.華中農(nóng)業(yè)大學 2011
本文編號：3516305
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