牛環(huán)形泰勒蟲病是由環(huán)形泰勒蟲引起的蜱傳血液原蟲病,給熱帶、亞熱帶和溫帶等地區(qū)的畜牧業(yè)生產(chǎn)造成了嚴(yán)重威脅。病原入侵會引起宿主細(xì)胞產(chǎn)生復(fù)雜的天然免疫反應(yīng),其中,TLRs和NLRs信號通路在抗寄生蟲感染中發(fā)揮重要的免疫調(diào)節(jié)作用。但是,目前對參與抗環(huán)形泰勒蟲感染的先天免疫相關(guān)機(jī)制知之甚少。因此,本研究采用實(shí)驗(yàn)室保存的環(huán)形泰勒蟲喀什株作為研究對象,通過轉(zhuǎn)錄組測序、PCR Aarray、ELISA等技術(shù)和方法,針對環(huán)形泰勒蟲感染牛引起的先天免疫信號通路關(guān)鍵分子的變化進(jìn)行研究,鑒定參與�？弓h(huán)形泰勒蟲感染的TLRs和NLRs信號通路相關(guān)的重要分子。首先,本研究建立了牛環(huán)形泰勒蟲LF-RPA檢測方法,為后續(xù)體內(nèi)感染環(huán)形泰勒蟲的檢測提供技術(shù)保障。此外,經(jīng)少量臨床樣品驗(yàn)證,LF-RPA可作為一種有效的檢測方法,用于該病臨床樣本的檢測。其次,通過對新疆、遼寧、甘肅、內(nèi)蒙古、天津和海南6個省區(qū)的牛環(huán)形泰勒蟲進(jìn)行種群遺傳結(jié)構(gòu)比較分析,進(jìn)一步了解新疆種群的遺傳特點(diǎn)。與其他地區(qū)種群相比,種群遺傳特征和MOI分析發(fā)現(xiàn),新疆種群的多樣性和蟲體基因型更為豐富。DAPC分析結(jié)果表明了新疆種群可能存在種群亞結(jié)構(gòu)。配對F

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

環(huán)形泰勒蟲生活史Fig.1.1ThelifecycleofT.annulata(Tretinaetal.,2015)

圖 1.2 TLR 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路Fig.1.2 TLR signaling pathways (Takagi et al., 2017) TLRs 在抗寄生蟲感染免疫中的作用1 TLRs 在抗弓形蟲感染中的作用抗弓形蟲感染中，宿主的 TLR11 和 TLR12 是識別弓形蟲肌動蛋白抑制蛋白 (PFTG) 的，同時也是樹突狀細(xì)胞識別弓形蟲的中心傳感器。研究發(fā)現(xiàn)，TLR11-TLR12 異二聚體在體中與 PFTG 可以直接相互作用，招募 MyD88 分子，啟動下游信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，進(jìn)而介 的產(chǎn)生 (Raetz et al., 2013)。此外，有學(xué)者發(fā)現(xiàn)小鼠體內(nèi)同時缺失 TLR7/TLR9/TLR11，宿對弓形蟲 PFTG 的識別能力，導(dǎo)致其對弓形蟲極其易感 (Andrade et al., 2013)。然而，在組中 TRL11 是假基因，且不存在 TLR12，因此，TLR11 和 TLR12 在小鼠體內(nèi)發(fā)揮抗弓作用并不適用于人類的天然免疫系統(tǒng)中。eiling 等研究發(fā)現(xiàn)，TLR2 缺失的小鼠對極高劑量的弓形蟲易感，而常規(guī)的蟲體劑量對宿統(tǒng)沒有明顯的損傷，并且在結(jié)核桿菌感染實(shí)驗(yàn)中也觀察到類似的現(xiàn)象 (Reiling et al., 2002究報(bào)道，利用弓形蟲表面蛋白糖基磷脂酰肌醇 (GPI) 刺激 TLR2/TLR4 共缺失的巨噬細(xì)現(xiàn) TNFα 的分泌受阻；TLR2/TLR4 共缺失的小鼠感染弓形蟲后，其腦內(nèi)包囊的數(shù)目增加了

博士學(xué)位論文 第二章 牛環(huán)形泰勒蟲 LF-RPA 檢測：95℃預(yù)變性 3 min94℃變性 1 min61.5℃退火溫度 50 sec 35 個循環(huán)68℃延伸 1 min68℃總延伸 10 minPCR 產(chǎn)物，在 2%瓊脂糖凝膠上檢測目的條帶 (393 bp)。將陽性樣品剩余工生物工程有限公司測序。測序得到的結(jié)果進(jìn)行 BLAST 分析，同時和列號：KP731977) 進(jìn)行分析比對，進(jìn)一步確認(rèn)樣品是否感染有環(huán)形泰勒蟲分析物片顯微鏡鏡檢和 PCR 檢測技術(shù)，自甘肅省武威市農(nóng)戶飼養(yǎng)的牛群中篩選體感染的 7 月齡的黃牛，圖 2.1 為檢測的結(jié)果。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3512590