牛結(jié)核病是對(duì)人類(lèi)健康、畜牧業(yè)發(fā)展造成嚴(yán)重影響的一種慢性消耗性傳染病,被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織歸為B類(lèi)疫病�？ń槊纾˙CG）是由牛分枝桿菌制成的減毒活菌苗,是目前唯一被廣泛認(rèn)可的用于預(yù)防結(jié)核病的疫苗。而研究表明,BCG的保護(hù)效力對(duì)年齡具有依賴性,保護(hù)力隨著年齡的增長(zhǎng)而減弱;同時(shí),BCG無(wú)法應(yīng)用于患有免疫缺陷類(lèi)疾病的個(gè)體,也會(huì)使牛結(jié)核菌素皮試（Tuberculin skin test,TST）反應(yīng)呈陽(yáng)性,干擾牛結(jié)核病的檢測(cè)。因此迫切需要新型預(yù)防牛結(jié)核病的疫苗。人5型腺病毒（Ad5）是一種E1區(qū)缺失的復(fù)制缺陷型病毒表達(dá)載體,只能在HEK293細(xì)胞中進(jìn)行繁殖擴(kuò)增,插入外源基因的腺病毒穿梭載體,在HEK293細(xì)胞中能夠通過(guò)同源重組整合到腺病毒載體基因組中,并包裝重組腺病毒,最終重組腺病毒能夠在HEK293細(xì)胞中大量表達(dá)外源蛋白。MPB51與MPB63是牛分枝桿菌兩種主要分泌蛋白,具有良好的免疫保護(hù)性,是開(kāi)發(fā)牛結(jié)核病疫苗的理想候選抗原。因此本研究Ad5為載體,構(gòu)建牛分枝桿菌mpb51-mpb63融合基因重組腺病毒,并通過(guò)小鼠模型研究重組腺病毒表達(dá)的融合蛋白MPB51-MPB63的免疫原性,為研制牛結(jié)核病... 

【文章來(lái)源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

mpb51-mpb63PCR結(jié)果

圖 1-1 mpb51-mpb63 PCR 結(jié)果M：DL2000 DNA Marker; 1: mpb51-mpb63 PCR 產(chǎn)物Fig. 1-1 PCR result of mpb51-mpb63M: DL2000 DNA Marker; 1: mpb51-mpb63 PCR product

和融合基因的酶切與回收pacAd5 CMV-KpA與融合基因mpb51-mpb63結(jié)果如圖 1-3、1-4 所示。圖中分別可見(jiàn) 1255 9 bp 的穿梭載體 pacAd5 CMV K-NpA。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]牛結(jié)核病對(duì)人類(lèi)健康的影響及其診斷方法[J]. 賈紅,鑫婷,郭曉宇,袁維峰,侯紹華,朱鴻飛.  微生物與感染. 2014(01)
[2]牛結(jié)核病的流行病學(xué)與風(fēng)險(xiǎn)分析[J]. 蘭德松,閆明媚,顧貴波.  畜牧獸醫(yī)科技信息. 2011(09)
[3]結(jié)核分枝桿菌蛋白抗原的研究進(jìn)展[J]. 劉艷,楊忠華,姜路明.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2010(24)



本文編號(hào)：3507501