發(fā)布時間：2021-11-20 08:08

　　FadL是革蘭陰性細菌編碼的外膜通道蛋白,參與長鏈脂肪酸的轉(zhuǎn)運,沙門菌中該蛋白作為免疫原使用具有優(yōu)良的保護效果。本試驗以遲緩愛德華菌FadL蛋白作為研究對象,原核表達并純化該蛋白,進一步通過動物試驗確定該蛋白的免疫特性和免疫效果。結(jié)果顯示,成功表達和純化重組FadL蛋白（rFadL）,蛋白大小為50 000。小鼠試驗結(jié)果表明,rFadL免疫小鼠能產(chǎn)生高水平特異性抗體;斑馬魚感染試驗結(jié)果表明,rFadL能夠?qū)Π唏R魚遲緩愛德華菌產(chǎn)生一定免疫保護力,保護率可達55%。本試驗揭示了遲緩愛德華菌FadL蛋白的免疫特性,為遲緩愛德華菌疫苗研發(fā)提供了參考和借鑒。 

【文章來源】：中國獸醫(yī)學(xué)報. 2020,40(10)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【圖文】：

PCR擴增遲緩愛德華菌fadL基因

不同菌株fadL基因同源性分析

將fadL基因構(gòu)建到表達載體pET-28α上,轉(zhuǎn)化BL21構(gòu)建重組表達菌株。對重組表達菌株進行誘導(dǎo)培養(yǎng),利用SDS-PAGE分析蛋白表達情況。結(jié)果顯示(圖3),在45 000 表達出特異性條帶,利用Bandscan軟件分析rFadL蛋白表達量占細菌總蛋白量的63.7%左右。以His-MAb為一抗、 HRP-IgG為二抗進行Western blot分析,同樣于45 000處顯現(xiàn)出特異性條帶(圖4),上述結(jié)果表明重組蛋白rFadL成功表達。圖4 Western blot鑒定rFadL在大腸桿菌中的表達

【參考文獻】：
期刊論文
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[2]遲緩愛德華菌鞭毛蛋白FliC原核表達及免疫試驗[J]. 張志強,楊楠,李永慧,王洪彬,吳同壘,康元環(huán),莘余,史秋梅,高桂生,王春鳳.  動物醫(yī)學(xué)進展. 2018(07)
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