FadL是革蘭陰性細(xì)菌編碼的外膜通道蛋白,參與長(zhǎng)鏈脂肪酸的轉(zhuǎn)運(yùn),沙門菌中該蛋白作為免疫原使用具有優(yōu)良的保護(hù)效果。本試驗(yàn)以遲緩愛(ài)德華菌FadL蛋白作為研究對(duì)象,原核表達(dá)并純化該蛋白,進(jìn)一步通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)確定該蛋白的免疫特性和免疫效果。結(jié)果顯示,成功表達(dá)和純化重組FadL蛋白（rFadL）,蛋白大小為50 000。小鼠試驗(yàn)結(jié)果表明,rFadL免疫小鼠能產(chǎn)生高水平特異性抗體;斑馬魚感染試驗(yàn)結(jié)果表明,rFadL能夠?qū)Π唏R魚遲緩愛(ài)德華菌產(chǎn)生一定免疫保護(hù)力,保護(hù)率可達(dá)55%。本試驗(yàn)揭示了遲緩愛(ài)德華菌FadL蛋白的免疫特性,為遲緩愛(ài)德華菌疫苗研發(fā)提供了參考和借鑒。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2020,40(10)北大核心CSCD

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【圖文】：

PCR擴(kuò)增遲緩愛(ài)德華菌fadL基因

不同菌株fadL基因同源性分析

將fadL基因構(gòu)建到表達(dá)載體pET-28α上,轉(zhuǎn)化BL21構(gòu)建重組表達(dá)菌株。對(duì)重組表達(dá)菌株進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng),利用SDS-PAGE分析蛋白表達(dá)情況。結(jié)果顯示(圖3),在45 000 表達(dá)出特異性條帶,利用Bandscan軟件分析rFadL蛋白表達(dá)量占細(xì)菌總蛋白量的63.7%左右。以His-MAb為一抗、 HRP-IgG為二抗進(jìn)行Western blot分析,同樣于45 000處顯現(xiàn)出特異性條帶(圖4),上述結(jié)果表明重組蛋白rFadL成功表達(dá)。圖4 Western blot鑒定rFadL在大腸桿菌中的表達(dá)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]遲緩愛(ài)德華菌鞭毛蛋白FliC原核表達(dá)及免疫試驗(yàn)[J]. 張志強(qiáng),楊楠,李永慧,王洪彬,吳同壘,康元環(huán),莘余,史秋梅,高桂生,王春鳳.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2018(07)
[3]遲緩愛(ài)德華菌外膜蛋白OmpA原核表達(dá)及其免疫原性研究[J]. 張志強(qiáng),楊楠,李永慧,王洪彬,馮東青,吳同壘,史秋梅,朱國(guó)強(qiáng).  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2018(06)
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[5]馬鏈球菌馬亞種FNEB蛋白的截短表達(dá)及其免疫保護(hù)性研究[J]. 徐全圓,石明,楊夷平,李娜,劉建華,加爾肯,冉多良.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2015(02)
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