奶牛ApoB100基因的原核表達(dá)及多克隆抗體的制備
發(fā)布時間:2021-11-13 11:45
奶牛載脂蛋白B100(ApoB100)是目前所知道的蛋白分子量最大的蛋白質(zhì)之一,它含有4536個氨基酸殘基,是組成極低密度脂蛋白(VLDL)顆粒結(jié)構(gòu)的多肽鏈,是VLDL中的甘油三酯(TG)結(jié)合蛋白,如果沒有ApoB100,肝臟中的TG是不可能分泌的。ApoB100在肝臟中的功能是增加VLDL的組裝、分泌、減少肝臟中的脂肪沉積,對脂肪肝的發(fā)生起到有效防治。VLDL顆粒的組裝和分泌受肝臟中ApoB100基因表達(dá)和ApoB100的生物活性控制,ApoB100的生物活性和基因表達(dá)水平對VLDL在肝臟中組裝和分泌起到關(guān)鍵作用。VLDL在肝臟的合成和TG轉(zhuǎn)運(yùn)出肝臟的速度直接受到ApoB100合成及正常應(yīng)用的影響。ApoB100作為VLDL的最主要的載脂蛋白和結(jié)構(gòu)蛋白,主要是參與VLDL、低密度脂蛋白(LDL)的組裝和分泌。ApoB100在肝臟中的確切機(jī)制仍然不是很清楚,可能受到營養(yǎng)和激素等因素的調(diào)節(jié)。本實驗采用基因工程等分子生物學(xué)技術(shù)對ApoB100基因進(jìn)行了克隆和表達(dá),獲得大量ApoB100蛋白,并對表達(dá)出的ApoB100蛋白進(jìn)行了純化、復(fù)性、免疫試驗動物。根據(jù)GenBank中收錄的ApoB10...
【文章來源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
第一篇 綜述
1.1 圍產(chǎn)期奶牛的能量代謝特點
1.2 奶牛脂肪肝
1.3 脂肪肝發(fā)生機(jī)理
1.4 能量匱乏引起的體脂動員
1.5 脂肪在肝臟中的代謝
1.6 VLDL與LDL的代謝功能
1.7 ApoB100在肝臟中的影響
1.8 在肝臟VLDL組裝和分泌過程中ApoB100的主要作用
1.9 原核表達(dá)系統(tǒng)
1.10 包涵體蛋白的形成
1.11 本研究的立題依據(jù)
1.12 本研究的意義
第二篇 實驗內(nèi)容及方法
第一章 重組蛋白ApoB100基因表達(dá)載體的構(gòu)建
1.1 材料和方法
1.2 結(jié)果
1.3 討論
1.5 小結(jié)
第二章 融合蛋白pET-28a-ApoB100的制備
2.1 材料和方法
2.2 結(jié)果
2.3 討論
2.5 小結(jié)
第三章 多克隆抗體的制備
3.1 材料和方法
3.2 結(jié)果
3.3 討論
3.4 小結(jié)
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
作者簡介
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]患脂肪肝奶牛的代謝、內(nèi)分泌和組織基因表達(dá)特征[J]. 夏成,王哲,張洪友,徐闖,張才. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(08)
[2]《基因工程概論》教學(xué)改革實踐[J]. 易潤華,劉大召,蔣鴻標(biāo),何覺民. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(09)
[3]奶牛酮病和脂肪肝綜合癥研究進(jìn)展[J]. 黃克和. 中國乳業(yè). 2008(06)
[4]亞臨床酮病奶牛血液部分生化指標(biāo)代謝水平研究[J]. 張志剛,李小兵,劉國文,孫國權(quán),王哲,郭昌明,高瑞峰,潘志忠. 中國農(nóng)學(xué)通報. 2008(06)
[5]奶牛酮病診治研究進(jìn)展[J]. 江精華,何寶祥,黃迪,韋振榮,梁真. 動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2007(S1)
[6]干乳期能量攝入水平對圍產(chǎn)期奶牛肝載脂蛋白B100mRNA豐度的影響[J]. 孫玉成,王雪瑩,李紅梅,王哲,張嘉保. 中國獸醫(yī)學(xué)報. 2006(03)
[7]包涵體蛋白的變復(fù)性研究[J]. 高永貴,關(guān)怡新,姚善涇. 科技通報. 2003(01)
[8]奶牛脂肪肝的發(fā)病機(jī)理及防制措施[J]. 陳代文. 中國畜牧獸醫(yī). 2002(03)
[9]中國奶業(yè)現(xiàn)狀[J]. 王鐵靈. 中國牧業(yè)通訊. 2002(02)
[10]包涵體蛋白體外復(fù)性的研究進(jìn)展[J]. 方敏,黃華樑. 生物工程學(xué)報. 2001(06)
碩士論文
[1]意大利蜜蜂蜂毒肽基因克隆與表達(dá)研究[D]. 朱文赫.吉林大學(xué) 2008
本文編號:3492959
【文章來源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
第一篇 綜述
1.1 圍產(chǎn)期奶牛的能量代謝特點
1.2 奶牛脂肪肝
1.3 脂肪肝發(fā)生機(jī)理
1.4 能量匱乏引起的體脂動員
1.5 脂肪在肝臟中的代謝
1.6 VLDL與LDL的代謝功能
1.7 ApoB100在肝臟中的影響
1.8 在肝臟VLDL組裝和分泌過程中ApoB100的主要作用
1.9 原核表達(dá)系統(tǒng)
1.10 包涵體蛋白的形成
1.11 本研究的立題依據(jù)
1.12 本研究的意義
第二篇 實驗內(nèi)容及方法
第一章 重組蛋白ApoB100基因表達(dá)載體的構(gòu)建
1.1 材料和方法
1.2 結(jié)果
1.3 討論
1.5 小結(jié)
第二章 融合蛋白pET-28a-ApoB100的制備
2.1 材料和方法
2.2 結(jié)果
2.3 討論
2.5 小結(jié)
第三章 多克隆抗體的制備
3.1 材料和方法
3.2 結(jié)果
3.3 討論
3.4 小結(jié)
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
作者簡介
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]患脂肪肝奶牛的代謝、內(nèi)分泌和組織基因表達(dá)特征[J]. 夏成,王哲,張洪友,徐闖,張才. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(08)
[2]《基因工程概論》教學(xué)改革實踐[J]. 易潤華,劉大召,蔣鴻標(biāo),何覺民. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(09)
[3]奶牛酮病和脂肪肝綜合癥研究進(jìn)展[J]. 黃克和. 中國乳業(yè). 2008(06)
[4]亞臨床酮病奶牛血液部分生化指標(biāo)代謝水平研究[J]. 張志剛,李小兵,劉國文,孫國權(quán),王哲,郭昌明,高瑞峰,潘志忠. 中國農(nóng)學(xué)通報. 2008(06)
[5]奶牛酮病診治研究進(jìn)展[J]. 江精華,何寶祥,黃迪,韋振榮,梁真. 動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2007(S1)
[6]干乳期能量攝入水平對圍產(chǎn)期奶牛肝載脂蛋白B100mRNA豐度的影響[J]. 孫玉成,王雪瑩,李紅梅,王哲,張嘉保. 中國獸醫(yī)學(xué)報. 2006(03)
[7]包涵體蛋白的變復(fù)性研究[J]. 高永貴,關(guān)怡新,姚善涇. 科技通報. 2003(01)
[8]奶牛脂肪肝的發(fā)病機(jī)理及防制措施[J]. 陳代文. 中國畜牧獸醫(yī). 2002(03)
[9]中國奶業(yè)現(xiàn)狀[J]. 王鐵靈. 中國牧業(yè)通訊. 2002(02)
[10]包涵體蛋白體外復(fù)性的研究進(jìn)展[J]. 方敏,黃華樑. 生物工程學(xué)報. 2001(06)
碩士論文
[1]意大利蜜蜂蜂毒肽基因克隆與表達(dá)研究[D]. 朱文赫.吉林大學(xué) 2008
本文編號:3492959
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