每年冬春季爆發(fā)于規(guī)模化養(yǎng)豬場(chǎng)的腹瀉常由不同病毒引起,臨床表現(xiàn)為相似腹瀉癥狀。為了區(qū)分臨床腹瀉樣本中的病毒性病原體,迫切需求建立一種快速同時(shí)檢測(cè)常見(jiàn)6種病毒性腹瀉疾病的病原技術(shù)。本研究針對(duì)豬流行性腹瀉病毒（Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV）S基因、豬傳染性胃腸炎病毒（Transmissible gastroenteritis virus, TGEV）N基因、豬Delta冠狀病毒（Porcine delta coronavirus, PDCoV）N基因、豬博卡病毒（Porcine bocavirus, pBCaV）NS1基因、豬諾如病毒（Porcine norovirus, pNoV）RdRp基因、豬輪狀病毒（Porcine rotavirus, pRV）NSP1基因的核酸保守區(qū)域,設(shè)計(jì)多重連接探針擴(kuò)增技術(shù)（multiplex ligationdependent probe amplification, MLPA）探針和預(yù)擴(kuò)增引物,利用MLPA技術(shù)和毛細(xì)管電泳技術(shù),建立檢測(cè)6種疾病病原核酸的檢測(cè)方法。結(jié)果表明,單一探針檢測(cè)混合模板,顯示出高度特異性... 

【文章來(lái)源】：農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2020,28(09)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

6種病毒目的基因PCR擴(kuò)增

混合探針的濃度優(yōu)化峰圖(A)及膠圖(B)

將pBCaV、pNoV、PDCoV、PEDV、pRV和TGEV陽(yáng)性質(zhì)�；旌虾�，分別按照1×107、1×106、1×105copies/μL稀釋，按照1.2.6方法進(jìn)行組內(nèi)和組間重復(fù)性實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示：組內(nèi)實(shí)驗(yàn)的每一種疾病同一濃度的變異系數(shù)都低于3%，組間實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示不同批次、每一種疾病同一個(gè)濃度的變異系數(shù)都低于2%(表4)。圖4 混合探針的特異性分析峰圖(A)及膠圖(B)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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