脫氫表雄酮（Dehydroepiandrosterone,DHEA）作為膽固醇代謝途徑中的重要中間產物,是機體中各種類固醇激素合成的重要前體。已有研究表明,DHEA在調節(jié)機體神經系統、免疫系統、骨質代謝、脂肪代謝等方面都發(fā)揮著重要作用。目前,大多數學者認為,DHEA主要是在外周靶組織/靶細胞中轉化為睪酮或雌二醇而發(fā)揮其特有的生物學功能。睪丸間質細胞分布于睪丸曲精小管間的疏松結締組織,其主要功能是合成和分泌睪酮,血漿睪酮的95%由睪丸間質細胞分泌。本實驗室前期研究結果表明,外源性添加DHEA可促進不同生理期實驗大鼠血清中睪酮和雌二醇的分泌；在TM-3細胞（小鼠睪丸間質細胞系）上證實,DHEA處理可顯著抑制TM-3細胞的增殖,但卻能夠顯著增強TM-3細胞線粒體的功能；同時發(fā)現DHEA在TM-3細胞內主要向睪酮和雌二醇進行轉化,但其具體機制還不是很清楚。因此,本試驗在分離、純化和鑒定原代大鼠睪丸間質細胞的基礎之上,探討DHEA對原代大鼠睪丸間質細胞增殖、細胞周期、線粒體膜電位等生物學特性的影響；在證實DHEA影響原代大鼠睪丸間質細胞合成睪酮的基礎之上,重點從蛋白水平上檢測DHEA對類固醇激素... 

【文章來源】：南京農業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】：104 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
目錄
摘要
ABSTRACT
本文部分縮寫中英文對照
引言
第一篇 文獻綜述
    第一章 脫氫表雄酮生物學作用研究進展
        1 DHEA的合成、代謝與分布
        2 DHEA的生物學功能
            2.1 DHEA對神經系統的影響
            2.2 DHEA對免疫系統的影響
            2.3 DHEA的抗氧化作用
            2.4 DHEA對心血管系統的影響
            2.5 DHEA對骨質代謝的影響
        3 DHEA調節(jié)機體生理功能的作用機制
            3.1 DHEA的激素樣效應
            3.2 DHEA的非激素樣效應
        參考文獻
    第二章 睪酮的生物合成及其調控機制
        1 睪酮的生物合成
        2 睪酮合成途徑中關鍵因子
            2.1 3β-羥基類固醇脫氫酶
            2.2 17β-羥基類固醇脫氫酶
            2.3 芳香化酶
        3 MAPK-ERK信號通路
        4 類固醇激素與MAPK-ERK信號通路間的關系
        參考文獻
第二篇 試驗研究
    第三章 DHEA對原代大鼠睪丸間質細胞增殖特性的影響
        摘要
        1 材料和方法
            1.1 主要試劑和儀器
            1.2 原代大鼠睪丸間質細胞的分離、培養(yǎng)和鑒定
            1.3 DHEA對原代大鼠睪丸間質細胞增殖的形態(tài)學觀察
            1.4 EdU法檢測DHEA對原代大鼠睪丸間質細胞增殖的影響
            1.5 流式細胞術檢測DHEA對原代大鼠睪丸間質細胞周期的影響
            1.6 Real-time PCR法檢測細胞周期蛋白mRNA表達水平
            1.7 數據統計分析
        2 結果與分析
            2.1 原代大鼠睪丸間質細胞的分離、培養(yǎng)和鑒定
            2.2 DHEA對原代大鼠睪丸間質細胞增殖的影響
            2.3 DHEA對原代大鼠睪丸間質細胞周期的影響
            2.4 DHEA對原代大鼠睪丸間質細胞周期相關因子mRNA表達的影響
        3 討論與小結
            3.1 討論
            3.2 小結
        Abstract
        參考文獻
    第四章 DHEA對原代大鼠睪丸間質細胞線粒體功能的影響
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 主要試劑和儀器
            1.2 細胞活力測定
            1.3 電鏡樣品制備
            1.4 線粒體膜電位(△Ψm)測定
            1.5 線粒體琥珀酸脫氫酶(SDH)活性的檢測
            1.6 數據統計分析
        2 結果與分析
            2.1 DHEA對原代大鼠睪丸間質細胞活力的影響
            2.2 DHEA對原代大鼠睪丸間質細胞線粒體超微結構的影響
            2.3 DHEA對原代大鼠睪丸間質細胞線粒體膜電位(△Ψm)的影響
            2.4 DHEA對原代大鼠睪丸間質細胞琥珀酸脫氫酶(SDH)活性的影響
        3 討論與小結
            3.1 討論
            3.2 小結
        Abstract
        參考文獻
    第五章 DHEA對原代大鼠睪丸間質細胞睪酮合成及關鍵酶表達的影響
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 主要試劑和儀器
            1.2 放射免疫法檢測DHEA對原代大鼠睪丸間質細胞睪酮合成的影響
            1.3 DHEA對睪酮合成關鍵酶mRNA表達的影響
            1.4 DHEA對睪酮合成關鍵酶蛋白表達的影響
            1.5 數據統計分析
        2 結果與分析
            2.1 DHEA對原代大鼠睪丸間質細胞睪酮合成的影響
            2.2 DHEA對睪酮合成關鍵酶mRNA表達的影響
            2.3 DHEA對睪酮合成關鍵酶蛋白表達的影響
        3 討論與小結
            3.1 討論
            3.2 小結
        Abstract
        參考文獻
    第六章 DHEA調節(jié)原代大鼠睪丸間質細胞睪酮合成相關信號通路的研究
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 主要試劑和儀器
            1.2 DHEA對原代大鼠睪丸間質細胞ERK和p-ERK蛋白表達的影響
            1.3 ERK通路在調節(jié)原代大鼠睪丸間質細胞睪酮合成中的作用研究
            1.4 ERK通路對原代大鼠睪丸間質細胞中睪酮合成關鍵酶蛋白表達的影響
            1.5 DHEA對原代大鼠睪丸間質細胞CREB和p-CREB蛋白表達的影響
            1.6 數據統計分析
        2 結果與分析
            2.1 DHEA對原代大鼠睪丸間質細胞ERK和p-ERK蛋白表達的影響
            2.2 ERK通路在調節(jié)原代大鼠睪丸間質細胞睪酮合成中的作用研究
            2.3 ERK通路對原代大鼠睪丸間質細胞中睪酮合成關鍵酶蛋白表達的影響
            2.4 DHEA對原代大鼠睪丸間質細胞CREB和p-CREB蛋白表達的影響
        3 討論與小結
            3.1 討論
            3.2 小結
        Abstract
        參考文獻
全文結論
本文創(chuàng)新點
致謝
攻讀碩士學位期間論文發(fā)表情況


【參考文獻】：
期刊論文
[1]紫杉醇聯合順鉑對人乳腺癌細胞株MCF-7增殖抑制作用及其機制[J]. 張華,唐金海,季明華,吳建中.  南京醫(yī)科大學學報(自然科學版). 2012(03)
[2]MAPK信號通路研究進展[J]. 陳建勇,王聰,王娟,曹禮榮.  中國醫(yī)藥科學. 2011(08)
[3]EdU在檢測細胞增殖中的應用[J]. 劉雷,楊立業(yè).  醫(yī)學綜述. 2010(19)
[4]GnRH類似物對大鼠睪丸間質細胞MAPK的影響[J]. 柳海燕,王大勇,時姍姍,陶曉倩,韓雪峰,林釵英,姚兵.  中華男科學雜志. 2010(03)
[5]脫氫表雄酮對大鼠血管平滑肌細胞增殖的影響[J]. 劉佳.  黑龍江醫(yī)學. 2010(03)
[6]脫氫表雄酮對雄性衰老大鼠類固醇激素代謝的影響[J]. 宋李杰,席珍,薛小英,王秋影,馬海田,鄒思湘.  畜牧與獸醫(yī). 2009(07)
[7]睪丸間質細胞中睪酮合成酶及蛋白表達的調控因子[J]. 孫佳音,應鋒,韓曉冬.  生殖與避孕. 2009(01)
[8]參附注射液和生脈注射液對心肌細胞Ca2+-ATP酶影響的對比研究[J]. 羅明鳳,張三印,黃秀深,周艷霞,孫改俠.  天津中醫(yī)藥. 2008(06)
[9]哺乳動物睪丸間質細胞的分離及體外培養(yǎng)[J]. 成鋼.  中國畜牧獸醫(yī). 2006(09)
[10]脫氫表雄酮經不依賴于雌、雄激素受體的MAPK信號途徑抑制成骨細胞凋亡[J]. 王凌,李大金,王文君,朱影.  分子細胞生物學報. 2006(04)

博士論文
[1]去氫表雄酮抑制腫瘤細胞增殖及其分子機制的研究[D]. 姜艷芳.吉林大學 2005



本文編號：3486599