禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病(Reticuloendotheliosis,RE)是由反轉錄科禽類C型反轉錄病毒禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)引起的禽類重要的致瘤性和免疫抑制性疾病。臨床中REV感染引起的免疫抑制給養(yǎng)禽業(yè)帶來重大的損失。近年來,REV的感染流行大多呈現(xiàn)與馬立克病病毒(Marek’s disease virus,MDV)和J亞群禽白血病病毒(Avian leukosis virus subgroup J,ALV-J)等免疫抑制性病毒混合感染,這使得疫病的診斷和防控難度加大。因此該疾病的防控對養(yǎng)禽業(yè)的健康發(fā)展和生物制品質量的提高具有重要影響。目前,關于REV感染宿主引起的宿主免疫反應機制,以及病毒的致病機理尚不清楚。本研究以REV HA1101病毒株感染雞外周血淋巴細胞和人工接種SPF雞為研究對象,通過熒光定量PCR、轉錄組學和生物信息學等研究方法,初步探討了病毒感染過程中可能發(fā)揮作用的細胞因子及相關信號通路,為進一步了解REV感染宿主后引起的免疫抑制和致病機理提供重要的線索。一、REV感染外周血淋巴細胞對天然免疫相關基因轉...

【文章來源】： 揚州大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：84 頁

【文章目錄】：
摘要
Abstract
符號說明
文獻綜述
    1. 禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病
        1.1 禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒形態(tài)結構及理化特性
        1.2 禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒的基因結構與功能
        1.3 REV臨床癥狀和病理變化
        1.4 REV免疫抑制機理
        1.5 流行病學
        1.6 診斷方法
        1.7 REV的防治
    2. 轉錄組學技術在動物性病毒研究中的應用
    3. 先天免疫抗病毒的研究進展
    4. 本研究的目的與意義
研究內(nèi)容一 REV感染對外周血淋巴細胞中天然免疫相關基因轉錄的影響
    1. 材料與方法
        1.1 細胞和病毒
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
        1.4 主要試劑配制
        1.5 雞外周血淋巴細胞的分離
        1.6 病毒感染
        1.7 引物序列
        1.8 Real-time PCR檢測
    2. 實驗結果
        2.1 REV感染雞外周血淋巴細胞中病毒復制情況
        2.2 熒光定量PCR檢測天然免疫受體相關分子表達情況
        2.3 熒光定量PCR檢測天然免疫信號通路相關分子表達情況
        2.4 熒光定量PCR檢測炎癥免疫相關細胞因子表達情況
        2.5 熒光定量PCR檢測抗病毒相關分子表達情況
    3. 討論
研究內(nèi)容二 REV對SPF雞主要免疫器官中免疫相關細胞因子表達的影響
    1 材料與方法
        1.1 實驗動物與病毒
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
        1.4 實驗動物分組和病毒接種
        1.5 臟器的采集及處理
        1.6 RNA的提取
        1.7 RNA的濃度測定及反轉錄
        1.8 引物序列
        1.9 Real-time PCR檢測
    2 結果
        2.1 熒光定量PCR檢測病毒在不同臟器中的復制情況
        2.2 熒光定量PCR檢測REV感染PBL免疫相關分子的表達情況
        2.3 熒光定量PCR檢測REV感染胸腺免疫相關分子的表達情況
        2.4 熒光定量PCR檢測脾臟中免疫相關分子的表達情況
        2.5 熒光定量PCR檢測REV感染盲腸扁桃體中免疫相關分子的表達情況
        2.6 熒光定量PCR檢測REV感染法氏囊免疫相關分子的表達情況
    3 討論
研究內(nèi)容三 REV感染SPF雞法氏囊的轉錄組學研究
    1 材料與方法
        1.1 實驗動物與病毒
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
        1.4 病毒感染法氏囊組織的收集
        1.5 生物信息學分析
        1.6 引物序列
        1.7 Real-time PCR檢測
    2 結果
        2.1 測序數(shù)據(jù)質量評估
        2.2 差異表達基因的GO富集分析
        2.3 REV感染引起的宿主應答反應
    3 討論
        3.1 宿主防衛(wèi)功能相關的差異表達基因
        3.2 細胞因子相關的差異表達基因
        3.3 宿主腫瘤相關的差異表達基因
        3.4 信號通路分析
研究內(nèi)容四 Toll樣受體配體對REV復制的影響
    1 材料與方法
        1.1 細胞和病毒
        1.2 主要試劑
        1.3 主要實驗儀器
        1.4 主要試劑的配制
        1.5 CEF的制備
        1.6 REV感染CEF前配體刺激
        1.7 REV感染CEF中配體刺激
        1.8 REV感染CEF后配體刺激
        1.9 引物序列
        1.10 間接免疫熒光檢測配體處理CEF對REV復制的影響
        1.11 Real-time PCR檢測
    2 結果
        2.1 Toll樣受體配體預刺激細胞對REV及抗病毒相關分子的影響
        2.2 Toll樣受體配體與REV同時刺激細胞對病毒及抗病毒相關分子的影響
        2.3 REV感染后Toll樣受體配體刺激細胞對REV復制及抗病毒分子的影響
    3 討論
全文總結
參考文獻
致謝
攻讀學位期間發(fā)表的學術論文


【參考文獻】：
期刊論文
[1]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒感染雞胚成纖維細胞的轉錄組學分析 [J]. 王靜,楊彥超,李凱,高立,王永強,張艷萍,崔紅玉,劉長軍,祁小樂,高玉龍,潘青,王笑梅.  中國家禽. 2018(14)
[2]poly(I:C)刺激雞胚胎成纖維細胞產(chǎn)生外泌體的抗新城疫病毒活性 [J]. 丁偉,徐小洪,丁佳欣,李金斗,丁壯.  中國獸醫(yī)學報. 2018(06)
[3]禽呼腸孤病毒強毒株和弱毒疫苗株感染雞肝癌細胞的轉錄組學分析 [J]. 黃莉,謝芝勛,謝麗基,黃嬌玲,謝志勤,范晴,鄧顯文,羅思思,張艷芳,曾婷婷,王盛,張民秀.  畜牧獸醫(yī)學報. 2017(11)
[4]IL-7的多樣化功能研究現(xiàn)狀及進展[J]. 余東山,席文娜,孫水林.  國際免疫學雜志. 2012 (06)
[5]整合禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒基因的雞痘病毒野毒株致病性研究 [J]. 孫洪磊,車國喜,秦梅,楊鳳,李宏民,劉思當.  中國獸醫(yī)學報. 2011(11)
[6]Toll樣受體介導的先天性抗病毒免疫反應研究進展 [J]. 何小兵,房永祥,賈懷杰,陳國華,曾爽,瞿惠玲,景志忠.  細胞與分子免疫學雜志. 2011(06)
[7]雞外周血淋巴細胞的分離和體外培養(yǎng) [J]. 謝昆,蔣成硯,全舒舟,王冉.  中國家禽. 2011(11)
[8]呼吸道合胞病毒感染上調Toll樣受體7和3基因的早期表達(英文) [J]. 黃升海,魏偉,云云.  微生物學報. 2009(02)
[9]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒分子生物學特性及其免疫抑制機理 [J]. 馬春霞,鄭世民.  中國家禽. 2007(22)
[10]干擾素的分子生物學機制研究進展 [J]. 曲建慧,張玲霞.  國際流行病學傳染病學雜志. 2006(01)

博士論文
[1]J亞群禽白血病病毒與宿主細胞相互作用機制研究[D]. 王琳.揚州大學 2018
[2]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒轉錄組學及免疫抑制機理的研究[D]. 繆佶.揚州大學 2016
[3]馬立克氏病病毒RB1B株感染雞的蛋白質組、轉錄組學及天然免疫機理研究[D]. 胡序明.揚州大學 2014
[4]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病基因工程亞單位疫苗及DNA疫苗的研制[D]. 李凱.中國農(nóng)業(yè)科學院 2014
[5]J亞群禽白血病病毒JS09GY3株感染特性及感染雞法氏囊轉錄組學分析[D]. 杭柏林.揚州大學 2014
[6]馬立克氏病病毒誘導的免疫應答基因表達譜及miRNA對腫瘤發(fā)生的調節(jié)作用[D]. 徐明.吉林大學 2011
[7]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒與J-亞群白血病病毒的致病性及其疫苗研究[D]. 孫淑紅.山東農(nóng)業(yè)大學 2007

碩士論文
[1]CEF感染REV后部分染色體微衛(wèi)星不穩(wěn)定性的研究[D]. 梁芳.南京農(nóng)業(yè)大學 2013
[2]REV感染SPF雞中IL-6、IL-18和IFN-γ的定量檢測[D]. 陳雪鋒.山東農(nóng)業(yè)大學 2012
[3]ALV-J和REV誘導雛雞胸腺和法氏囊細胞凋亡的研究[D]. 劉玉潔.山東農(nóng)業(yè)大學 2006
[4]雞IFN-γ基因的克隆與原核表達[D]. 鮑鳴.安徽農(nóng)業(yè)大學 2005



本文編號：3480561