禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病(Reticuloendotheliosis,RE)是由反轉(zhuǎn)錄科禽類C型反轉(zhuǎn)錄病毒禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)引起的禽類重要的致瘤性和免疫抑制性疾病。臨床中REV感染引起的免疫抑制給養(yǎng)禽業(yè)帶來重大的損失。近年來,REV的感染流行大多呈現(xiàn)與馬立克病病毒(Marek’s disease virus,MDV)和J亞群禽白血病病毒(Avian leukosis virus subgroup J,ALV-J)等免疫抑制性病毒混合感染,這使得疫病的診斷和防控難度加大。因此該疾病的防控對(duì)養(yǎng)禽業(yè)的健康發(fā)展和生物制品質(zhì)量的提高具有重要影響。目前,關(guān)于REV感染宿主引起的宿主免疫反應(yīng)機(jī)制,以及病毒的致病機(jī)理尚不清楚。本研究以REV HA1101病毒株感染雞外周血淋巴細(xì)胞和人工接種SPF雞為研究對(duì)象,通過熒光定量PCR、轉(zhuǎn)錄組學(xué)和生物信息學(xué)等研究方法,初步探討了病毒感染過程中可能發(fā)揮作用的細(xì)胞因子及相關(guān)信號(hào)通路,為進(jìn)一步了解REV感染宿主后引起的免疫抑制和致病機(jī)理提供重要的線索。一、REV感染外周血淋巴細(xì)胞對(duì)天然免疫相關(guān)基因轉(zhuǎn)...

【文章來源】： 揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：84 頁

【文章目錄】：
摘要
Abstract
符號(hào)說明
文獻(xiàn)綜述
    1. 禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病
        1.1 禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒形態(tài)結(jié)構(gòu)及理化特性
        1.2 禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒的基因結(jié)構(gòu)與功能
        1.3 REV臨床癥狀和病理變化
        1.4 REV免疫抑制機(jī)理
        1.5 流行病學(xué)
        1.6 診斷方法
        1.7 REV的防治
    2. 轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)在動(dòng)物性病毒研究中的應(yīng)用
    3. 先天免疫抗病毒的研究進(jìn)展
    4. 本研究的目的與意義
研究內(nèi)容一 REV感染對(duì)外周血淋巴細(xì)胞中天然免疫相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄的影響
    1. 材料與方法
        1.1 細(xì)胞和病毒
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
        1.4 主要試劑配制
        1.5 雞外周血淋巴細(xì)胞的分離
        1.6 病毒感染
        1.7 引物序列
        1.8 Real-time PCR檢測
    2. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.1 REV感染雞外周血淋巴細(xì)胞中病毒復(fù)制情況
        2.2 熒光定量PCR檢測天然免疫受體相關(guān)分子表達(dá)情況
        2.3 熒光定量PCR檢測天然免疫信號(hào)通路相關(guān)分子表達(dá)情況
        2.4 熒光定量PCR檢測炎癥免疫相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)情況
        2.5 熒光定量PCR檢測抗病毒相關(guān)分子表達(dá)情況
    3. 討論
研究內(nèi)容二 REV對(duì)SPF雞主要免疫器官中免疫相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)的影響
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與病毒
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
        1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組和病毒接種
        1.5 臟器的采集及處理
        1.6 RNA的提取
        1.7 RNA的濃度測定及反轉(zhuǎn)錄
        1.8 引物序列
        1.9 Real-time PCR檢測
    2 結(jié)果
        2.1 熒光定量PCR檢測病毒在不同臟器中的復(fù)制情況
        2.2 熒光定量PCR檢測REV感染PBL免疫相關(guān)分子的表達(dá)情況
        2.3 熒光定量PCR檢測REV感染胸腺免疫相關(guān)分子的表達(dá)情況
        2.4 熒光定量PCR檢測脾臟中免疫相關(guān)分子的表達(dá)情況
        2.5 熒光定量PCR檢測REV感染盲腸扁桃體中免疫相關(guān)分子的表達(dá)情況
        2.6 熒光定量PCR檢測REV感染法氏囊免疫相關(guān)分子的表達(dá)情況
    3 討論
研究內(nèi)容三 REV感染SPF雞法氏囊的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與病毒
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
        1.4 病毒感染法氏囊組織的收集
        1.5 生物信息學(xué)分析
        1.6 引物序列
        1.7 Real-time PCR檢測
    2 結(jié)果
        2.1 測序數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估
        2.2 差異表達(dá)基因的GO富集分析
        2.3 REV感染引起的宿主應(yīng)答反應(yīng)
    3 討論
        3.1 宿主防衛(wèi)功能相關(guān)的差異表達(dá)基因
        3.2 細(xì)胞因子相關(guān)的差異表達(dá)基因
        3.3 宿主腫瘤相關(guān)的差異表達(dá)基因
        3.4 信號(hào)通路分析
研究內(nèi)容四 Toll樣受體配體對(duì)REV復(fù)制的影響
    1 材料與方法
        1.1 細(xì)胞和病毒
        1.2 主要試劑
        1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        1.4 主要試劑的配制
        1.5 CEF的制備
        1.6 REV感染CEF前配體刺激
        1.7 REV感染CEF中配體刺激
        1.8 REV感染CEF后配體刺激
        1.9 引物序列
        1.10 間接免疫熒光檢測配體處理CEF對(duì)REV復(fù)制的影響
        1.11 Real-time PCR檢測
    2 結(jié)果
        2.1 Toll樣受體配體預(yù)刺激細(xì)胞對(duì)REV及抗病毒相關(guān)分子的影響
        2.2 Toll樣受體配體與REV同時(shí)刺激細(xì)胞對(duì)病毒及抗病毒相關(guān)分子的影響
        2.3 REV感染后Toll樣受體配體刺激細(xì)胞對(duì)REV復(fù)制及抗病毒分子的影響
    3 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3480561