鴨疫里氏桿菌（Riemerella anatipestifer, RA）,原名鴨疫巴氏桿菌（Pasteurella Anatipestifer, PA）,原為巴氏桿菌科里氏桿菌屬的一員,后被劃入黃桿菌科,除了進(jìn)化上的特異性,另一個(gè)引起人們研究興趣的原因主要是該菌引起世界范圍內(nèi)雛鴨的一種重要傳染病——鴨傳染性漿膜炎。該病原菌主要引起雛鴨敗血癥,表現(xiàn)為腦膜炎、心包炎和腹膜炎等,導(dǎo)致養(yǎng)鴨業(yè)巨大經(jīng)濟(jì)損失。目前,已鑒定出的21種血清型,各血清型之間缺乏交叉保護(hù)力是阻礙該病防控、疫苗研究和鑒別診斷的主要因素。市場(chǎng)上尚無安全、高效的疫苗用于該病原菌的防控。新型保護(hù)性抗原,特別是能為不同血清型菌株感染提供交叉保護(hù)力的交叉保護(hù)性抗原的篩選是研制新型亞單位疫苗的當(dāng)務(wù)之急。2011年以來已有數(shù)株鴨疫里氏桿菌基因組被公布,這些基因組信息為高通量篩選保護(hù)性抗原開辟了新途徑。根據(jù)以往的報(bào)道和本實(shí)驗(yàn)室分離保存的菌株統(tǒng)計(jì),鴨疫里氏桿菌2型是臨床感染中危害最大的血清型之一,我們選擇2型代表毒株RAf153進(jìn)行全基因測(cè)序,并建立了鴨疫里氏桿菌RAf153全菌蛋白的免疫蛋白質(zhì)組學(xué)方法,用該方法共篩選到12種保護(hù)性抗原候選因... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 鴨疫里氏桿菌研究進(jìn)展
        1 病原學(xué)
        2 流行病學(xué)
        3 我國養(yǎng)鴨業(yè)現(xiàn)狀
        4 疫苗研究
    第二章 蛋白質(zhì)組學(xué)的概念及方法
        1 蛋白質(zhì)組學(xué)的由來
        2 蛋白質(zhì)組學(xué)研究的總體策略
        3 免疫蛋白質(zhì)組學(xué)方法在疫苗研究中的應(yīng)用
            3.1 蛋白質(zhì)組學(xué)的在生物醫(yī)學(xué)中的主要應(yīng)用
            3.2 免疫蛋白質(zhì)組學(xué)在疫苗研究中的應(yīng)用
第二篇 試驗(yàn)部分
    第三章 鴨疫里氏桿菌免疫蛋白質(zhì)組學(xué)方法的建立
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 菌株與培養(yǎng)條件
            1.2 血清準(zhǔn)備
            1.3 蛋白樣品提取
            1.4 免疫蛋白質(zhì)組學(xué)
            1.5 原核表達(dá)、免疫原性分析及純化
        2 結(jié)果
            2.1 RAf153全菌蛋白電泳圖譜及western blot分析
            2.2 免疫反應(yīng)性蛋白點(diǎn)的鑒定
            2.3 生物信息學(xué)分析
            2.4 核酸序列GenBank登錄號(hào)
            2.5 蛋白質(zhì)基因序列在不同菌種中的分布
            2.6 蛋白質(zhì)的原核表達(dá)及免疫原性分析
        3 討論
        ABSTRACT
    第四章 1型和2型鴨疫里氏桿菌亞單位疫苗候選因子的免疫蛋白質(zhì)組學(xué)篩選
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 菌株與培養(yǎng)條件
            1.2 血清準(zhǔn)備
            1.3 蛋白樣品提取
            1.4 免疫蛋白質(zhì)組學(xué)
            1.5 原核表達(dá)、免疫原性分析及純化
            1.6 免疫反應(yīng)性蛋白的保守性分析
            1.7 攻毒保護(hù)試驗(yàn)
        2 結(jié)果
            2.1 二維凝膠電泳圖譜及western blot分析
            2.2 免疫反應(yīng)性蛋白點(diǎn)的鑒定
            2.3 生物信息學(xué)分析
            2.4 蛋白質(zhì)的原核表達(dá)及免疫原性分析
            2.5 核酸序列GenBank登錄號(hào)
            2.6 攻毒保護(hù)試驗(yàn)
        3 討論
        ABSTRACT
    第五章 南京周邊地區(qū)鴨疫里氏桿菌流行病學(xué)調(diào)查
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 菌株與培養(yǎng)條件
            1.2 鴨疫里氏桿菌PCR檢測(cè)方法建立
            1.3 鴨疫里氏桿菌間接ELISA檢測(cè)方法的建立
            1.4 鴨疫里氏桿菌PCR檢測(cè)
            1.5 鴨疫里氏桿菌血清學(xué)調(diào)查
        2 結(jié)果
            2.1 PCR檢測(cè)方法的建立
            2.2 間接ELISA方法的建立
        3 討論
        ABSTRACT
    第六章 鴨疫里氏桿菌2型菌株RAF153全基因組測(cè)序及型特異性基因篩選
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 菌株培養(yǎng)
            1.2 基因組提取
            1.3 RAf153基因組序列測(cè)定
            1.4 比較基因組學(xué)研究
            1.5 鑒別診斷引物設(shè)計(jì)
        2 結(jié)果
            2.1 RAf153基因組序列測(cè)定結(jié)果
            2.2 鑒別引物篩選
        3 討論
        ABSTRACT
參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
附錄
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]鴨疫里默氏桿菌疫苗的研究進(jìn)展[J]. 鐘登科,魏建超,路振香.  中國家禽. 2009(05)
[2]鴨疫里默氏菌一個(gè)可能新型的鑒定[J]. 張大丙,鄭獻(xiàn)進(jìn),曲豐發(fā).  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2006(01)
[3]我國鴨疫里默氏桿菌血清型調(diào)查及新血清型的發(fā)現(xiàn)和病原特性[J]. 程安春,汪銘書,陳孝躍,朱德康,黃城,劉菲,周毅,郭宇飛,劉兆宇,方鵬飛.  中國獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2003(04)
[4]血清5型鴨疫里氏桿菌在我國的發(fā)現(xiàn)及其病原特性研究[J]. 汪銘書,程安春,陳孝躍,劉兆宇,方鵬飛,郭宇飛.  中國獸醫(yī)科技. 2002(09)
[5]鴨疫里氏桿菌病三價(jià)油乳劑滅活疫苗的研究[J]. 胡清海,劉曉文,趙世華,張知良,苗晉鋒,劉華雷,趙寶華,徐步,丁鏟.  中國獸醫(yī)科技. 2002(07)
[6]江蘇安徽兩省鴨疫里默氏桿菌病的流行病學(xué)調(diào)查研究[J]. 胡清海,張知良,苗晉鋒,劉岳龍,劉曉文,丁鏟.  中國獸醫(yī)科技. 2001(08)
[7]不同血清型鴨疫里氏桿菌分離株的部分特性比較[J]. 張大丙,郭玉璞.  中國獸醫(yī)雜志. 1999(10)
[8]鴨疫巴氏桿菌病及其并發(fā)感染的防治[J]. 郭予強(qiáng),楊連楷,凌育燊,詹樂群.  養(yǎng)禽與禽病防治. 1994(03)
[9]北京鴨小鴨傳染性漿膜炎的調(diào)查研究[J]. 郭玉璞,陳德威,范國雄,劉瑞萍.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 1982(02)



本文編號(hào)：3476328