鴨疫里氏桿菌（Riemerella anatipestifer, RA）,原名鴨疫巴氏桿菌（Pasteurella Anatipestifer, PA）,原為巴氏桿菌科里氏桿菌屬的一員,后被劃入黃桿菌科,除了進化上的特異性,另一個引起人們研究興趣的原因主要是該菌引起世界范圍內(nèi)雛鴨的一種重要傳染病——鴨傳染性漿膜炎。該病原菌主要引起雛鴨敗血癥,表現(xiàn)為腦膜炎、心包炎和腹膜炎等,導致養(yǎng)鴨業(yè)巨大經(jīng)濟損失。目前,已鑒定出的21種血清型,各血清型之間缺乏交叉保護力是阻礙該病防控、疫苗研究和鑒別診斷的主要因素。市場上尚無安全、高效的疫苗用于該病原菌的防控。新型保護性抗原,特別是能為不同血清型菌株感染提供交叉保護力的交叉保護性抗原的篩選是研制新型亞單位疫苗的當務(wù)之急。2011年以來已有數(shù)株鴨疫里氏桿菌基因組被公布,這些基因組信息為高通量篩選保護性抗原開辟了新途徑。根據(jù)以往的報道和本實驗室分離保存的菌株統(tǒng)計,鴨疫里氏桿菌2型是臨床感染中危害最大的血清型之一,我們選擇2型代表毒株RAf153進行全基因測序,并建立了鴨疫里氏桿菌RAf153全菌蛋白的免疫蛋白質(zhì)組學方法,用該方法共篩選到12種保護性抗原候選因... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一篇 文獻綜述
    第一章 鴨疫里氏桿菌研究進展
        1 病原學
        2 流行病學
        3 我國養(yǎng)鴨業(yè)現(xiàn)狀
        4 疫苗研究
    第二章 蛋白質(zhì)組學的概念及方法
        1 蛋白質(zhì)組學的由來
        2 蛋白質(zhì)組學研究的總體策略
        3 免疫蛋白質(zhì)組學方法在疫苗研究中的應用
            3.1 蛋白質(zhì)組學的在生物醫(yī)學中的主要應用
            3.2 免疫蛋白質(zhì)組學在疫苗研究中的應用
第二篇 試驗部分
    第三章 鴨疫里氏桿菌免疫蛋白質(zhì)組學方法的建立
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 菌株與培養(yǎng)條件
            1.2 血清準備
            1.3 蛋白樣品提取
            1.4 免疫蛋白質(zhì)組學
            1.5 原核表達、免疫原性分析及純化
        2 結(jié)果
            2.1 RAf153全菌蛋白電泳圖譜及western blot分析
            2.2 免疫反應性蛋白點的鑒定
            2.3 生物信息學分析
            2.4 核酸序列GenBank登錄號
            2.5 蛋白質(zhì)基因序列在不同菌種中的分布
            2.6 蛋白質(zhì)的原核表達及免疫原性分析
        3 討論
        ABSTRACT
    第四章 1型和2型鴨疫里氏桿菌亞單位疫苗候選因子的免疫蛋白質(zhì)組學篩選
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 菌株與培養(yǎng)條件
            1.2 血清準備
            1.3 蛋白樣品提取
            1.4 免疫蛋白質(zhì)組學
            1.5 原核表達、免疫原性分析及純化
            1.6 免疫反應性蛋白的保守性分析
            1.7 攻毒保護試驗
        2 結(jié)果
            2.1 二維凝膠電泳圖譜及western blot分析
            2.2 免疫反應性蛋白點的鑒定
            2.3 生物信息學分析
            2.4 蛋白質(zhì)的原核表達及免疫原性分析
            2.5 核酸序列GenBank登錄號
            2.6 攻毒保護試驗
        3 討論
        ABSTRACT
    第五章 南京周邊地區(qū)鴨疫里氏桿菌流行病學調(diào)查
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 菌株與培養(yǎng)條件
            1.2 鴨疫里氏桿菌PCR檢測方法建立
            1.3 鴨疫里氏桿菌間接ELISA檢測方法的建立
            1.4 鴨疫里氏桿菌PCR檢測
            1.5 鴨疫里氏桿菌血清學調(diào)查
        2 結(jié)果
            2.1 PCR檢測方法的建立
            2.2 間接ELISA方法的建立
        3 討論
        ABSTRACT
    第六章 鴨疫里氏桿菌2型菌株RAF153全基因組測序及型特異性基因篩選
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 菌株培養(yǎng)
            1.2 基因組提取
            1.3 RAf153基因組序列測定
            1.4 比較基因組學研究
            1.5 鑒別診斷引物設(shè)計
        2 結(jié)果
            2.1 RAf153基因組序列測定結(jié)果
            2.2 鑒別引物篩選
        3 討論
        ABSTRACT
參考文獻
全文總結(jié)
附錄
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表的學術(shù)論文


【參考文獻】：
期刊論文
[1]鴨疫里默氏桿菌疫苗的研究進展[J]. 鐘登科,魏建超,路振香.  中國家禽. 2009(05)
[2]鴨疫里默氏菌一個可能新型的鑒定[J]. 張大丙,鄭獻進,曲豐發(fā).  中國預防獸醫(yī)學報. 2006(01)
[3]我國鴨疫里默氏桿菌血清型調(diào)查及新血清型的發(fā)現(xiàn)和病原特性[J]. 程安春,汪銘書,陳孝躍,朱德康,黃城,劉菲,周毅,郭宇飛,劉兆宇,方鵬飛.  中國獸醫(yī)學報. 2003(04)
[4]血清5型鴨疫里氏桿菌在我國的發(fā)現(xiàn)及其病原特性研究[J]. 汪銘書,程安春,陳孝躍,劉兆宇,方鵬飛,郭宇飛.  中國獸醫(yī)科技. 2002(09)
[5]鴨疫里氏桿菌病三價油乳劑滅活疫苗的研究[J]. 胡清海,劉曉文,趙世華,張知良,苗晉鋒,劉華雷,趙寶華,徐步,丁鏟.  中國獸醫(yī)科技. 2002(07)
[6]江蘇安徽兩省鴨疫里默氏桿菌病的流行病學調(diào)查研究[J]. 胡清海,張知良,苗晉鋒,劉岳龍,劉曉文,丁鏟.  中國獸醫(yī)科技. 2001(08)
[7]不同血清型鴨疫里氏桿菌分離株的部分特性比較[J]. 張大丙,郭玉璞.  中國獸醫(yī)雜志. 1999(10)
[8]鴨疫巴氏桿菌病及其并發(fā)感染的防治[J]. 郭予強,楊連楷,凌育燊,詹樂群.  養(yǎng)禽與禽病防治. 1994(03)
[9]北京鴨小鴨傳染性漿膜炎的調(diào)查研究[J]. 郭玉璞,陳德威,范國雄,劉瑞萍.  畜牧獸醫(yī)學報. 1982(02)



本文編號：3476328