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貓泛白細(xì)胞減少癥病毒的分離鑒定及VP2基因遺傳演化分析

發(fā)布時間:2021-11-04 07:39
  貓泛白細(xì)胞減少癥又稱貓傳染性腸炎和貓瘟熱,是由貓泛白細(xì)胞減少癥病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)引起的急性高度接觸性傳染病。FPV感染宿主范圍較寬且引起死亡率較高,尤其危害貓、水貂和浣熊等幼齡動物。目前,疫苗接種是預(yù)防該疾病的主要措施,為了有效地控制該病在我國貓群體中的發(fā)生和流行,了解FPV遺傳變異和流行情況對新型疫苗的研發(fā)和該疾病的防治具有重要意義。為了研究FPV感染情況,2018~2019年期間從中國某動物醫(yī)院收集34份疑似感染FPV的臨床樣品。利用F81細(xì)胞分別對所有樣品進(jìn)行病毒分離,22份樣品使細(xì)胞產(chǎn)生CPE。選取其中一份血便樣品進(jìn)行鑒定,經(jīng)分子生物學(xué)、免疫熒光、電鏡觀察和動物回歸實(shí)驗(yàn)等鑒定后,分離鑒定一株FPV,命名為DL-C-3株,其第5代病毒毒價為106.08.08 TCID50/0.1 m L。為了對臨床樣品快速檢測,建立了檢測FPV TaqMan探針實(shí)時熒光定量PCR(Taq Man q PCR)診斷方法。結(jié)果顯示,標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)(R2)值為0.9997,線性相關(guān)顯著... 

【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】:75 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

貓泛白細(xì)胞減少癥病毒的分離鑒定及VP2基因遺傳演化分析


FPV DL-C-3毒株的 PCR鑒定結(jié)果

熒光,熒光現(xiàn)象,細(xì)胞,顯微鏡


在免疫熒光顯微鏡下,可見到特異性的綠色熒光,對照組細(xì)胞無熒光現(xiàn)象。證明細(xì)胞內(nèi)存在FPV,說明此分離株為FPV。如圖2-3所示。2.3.5 TCID_(50)測定

貓泛白細(xì)胞減少癥病毒的分離鑒定及VP2基因遺傳演化分析


DL-C-3株 FPV的電鏡觀察(100 nm)

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]犬腺病毒SYBR Green Ⅰ熒光定量PCR檢測方法的建立[J]. 由欣月,郝雲(yún)峰,崔尚金,秦彤.  中國動物傳染病學(xué)報. 2019(06)
[2]貓細(xì)小病毒廣西株的分離鑒定及動物發(fā)病模型的建立[J]. 張振江,劉金鳳,王浩,唐海波,秦樹英,李承浩,吳健敏.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2020(01)
[3]貓皰疹病毒Ⅰ型PCR檢測方法的建立及初步應(yīng)用[J]. 翟志安,梁瑞英,崔尚金.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2019(11)
[4]一株貓泛白細(xì)胞減少癥病毒的分離鑒定及其VP2和NS1基因的變異分析[J]. 劉琪,史利軍,梁琳,張玲玲,袁維峰,梁瑞英,李金祥,崔尚金.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2019(05)
[5]貓泛白細(xì)胞減少癥病毒環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增檢測方法的建立[J]. 馬芹,閆文卓,周潔,高誠,劉鐵龍,趙麗麗,陳洪巖,陸濤峰.  實(shí)驗(yàn)動物與比較醫(yī)學(xué). 2019(01)
[6]貓泛白細(xì)胞減少癥病毒北京株NS1基因克隆與生物信息學(xué)分析[J]. 劉琪,史利軍,袁維峰,梁瑞英,李金祥,崔尚金.  中國畜牧獸醫(yī). 2018(12)
[7]北京地區(qū)貓皰疹病毒Ⅰ型的分離及鑒定[J]. 王吉,付瑞,馮育芳,李曉波,王淑菁,王莎莎,李威,秦驍,鞏薇,岳秉飛,賀爭鳴.  病毒學(xué)報. 2018(05)
[8]A型豬塞內(nèi)卡病毒TaqMan熒光定量PCR方法的建立[J]. 李秀博,劉存,鄢明華,崔玉東,崔尚金.  中國動物傳染病學(xué)報. 2019(03)
[9]貓皰疹病毒Ⅰ型PCR檢測方法的建立與初步應(yīng)用[J]. 李航,劉俊平,關(guān)平原,雷宇,李志.  動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2017(11)
[10]貓細(xì)小病毒PCR檢測方法的建立及初步應(yīng)用[J]. 王吉,付瑞,衛(wèi)禮,李曉波,王淑菁,鞏薇,岳秉飛,賀爭鳴.  實(shí)驗(yàn)動物科學(xué). 2015(01)

博士論文
[1]貓泛白細(xì)胞減少癥病毒VP2基因遺傳進(jìn)化及其重組蛋白免疫原性研究[D]. 楊松濤.吉林大學(xué) 2006

碩士論文
[1]貓泛白細(xì)胞減少癥病毒的分離鑒定及VP2蛋白優(yōu)勢抗原區(qū)的原核表達(dá)[D]. 劉琪.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2019
[2]貓泛白細(xì)胞減少癥病毒反向遺傳學(xué)操作系統(tǒng)的建立[D]. 程楠.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2016
[3]貓細(xì)小病毒分離鑒定及馬抗貓瘟特異性IgG制備、檢測和治療效果研究[D]. 饒家輝.吉林大學(xué) 2009
[4]貓泛白細(xì)胞減少癥病毒XJ株的分離及生物學(xué)特性研究[D]. 蘇潔.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008



本文編號:3475296

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