本試驗在細胞水平和動物整體水平研究了黃曲霉毒素B1（AFB1）、玉米赤霉烯酮（ZEA）、嘔吐毒素（DON）和伏馬菌素B1（FB1）四種霉菌毒素對豬腎細胞、大鼠肝細胞和小鼠的聯(lián)合毒性。（1）對豬腎細胞（PK15）的聯(lián)合毒性將AFB1、ZEA、DON和FB1以不同濃度與PK15孵育12,24和48h后,采用MTT法和LDH釋放法評價霉菌毒素的細胞毒性。結(jié)果表明：AFB1、ZEA、DON與PK15孵育48h后,EC50（50%效應(yīng)濃度）分別為38.8、121.8和3.6μM,EC30（30%效應(yīng)濃度）分別為26.9、86.6和1.8μm。且AFB1和ZEA均呈現(xiàn)時間效應(yīng)和劑量效應(yīng)關(guān)系,隨著劑量增加和時間延長,霉菌毒素的細胞毒性增強。FB1濃度高達250μM且孵育48h后,PK15細胞活力仍大于70%。與霉菌毒素孵育24h后,AFB1、ZEA和DON能顯著提高細胞LDH的釋放,而FB1顯著降低細胞LDH的釋放。AFB1和DON均能顯著提高細胞內(nèi)活性氧和細胞凋亡率（P<0.05）,而ZEA （10,20,40μM）對細胞內(nèi)活性氧和細胞凋亡沒有影響。四種霉菌毒素的細胞毒性大小順序為DON&g... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：108 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略語表
第一章 文獻綜述
    1 前言
    2 飼料中霉菌毒素的危害
        2.1 AFB_1的理化性質(zhì)和毒性作用
        2.2 ZEA的理化性質(zhì)和毒性作用
        2.3 DON的理化性質(zhì)和毒性作用
        2.4 FUM的理化性質(zhì)和毒性作用
    3 飼料中霉菌毒素的污染情況
    4 霉菌毒素聯(lián)合作用的研究
        4.1 聯(lián)合作用方法學研究
        4.2 國內(nèi)對霉菌毒素聯(lián)合作用的研究
        4.3 國外對霉菌毒素聯(lián)合作用的研究
    5 研究意義和研究內(nèi)容
第二章 細胞毒性試驗
    試驗一 四種霉菌毒素對豬腎細胞的聯(lián)合毒性研究
        1 材料與方法
            1.1 試驗材料和試驗儀器
            1.2 試驗方法
        2 試驗設(shè)計及數(shù)據(jù)處理
            2.1 不同霉菌毒素對細胞活力的劑量效應(yīng)關(guān)系
            2.2 不同霉菌毒素對細胞膜損傷的劑量效應(yīng)關(guān)系
            2.3 不同霉菌毒素對細胞內(nèi)活性氧和細胞凋亡率的影響
            2.4 利用中心組合設(shè)計研究四種霉菌毒素的聯(lián)合毒性
            2.5 AFB_1和ZEA對細胞膜完整性和氧化損傷的聯(lián)合作用
            2.6 AFB_1和ZEA對細胞凋亡的聯(lián)合作用
            2.7 數(shù)據(jù)處理
        3 結(jié)果與分析
            3.1 不同霉菌毒素對PK15的細胞毒性、細胞膜損傷、氧化損傷和細胞凋亡的影響
            3.2 常見霉菌毒素二元和三元混合的聯(lián)合作用類型
            3.3 AFB1與ZEA對PK1 5的聯(lián)合作用機理
        4 小結(jié)
    試驗二 四種霉菌毒素對大鼠肝細胞的聯(lián)合毒性研究
        1 材料與方法
            1.1 試驗材料和實驗儀器
            1.2 試驗方法
        2 試驗設(shè)計及數(shù)據(jù)處理
            2.1 不同霉菌毒素對BRL細胞活力的劑量效應(yīng)關(guān)系
            2.2 不同霉菌毒素對BRL細胞膜損傷的劑量效應(yīng)關(guān)系
            2.3 不同霉菌毒素對細胞內(nèi)活性氧、細胞凋亡率的影響
            2.4 利用中心組合設(shè)計研究四種霉菌毒素的聯(lián)合毒性
            2.5 AFB_1和DON對細胞膜完整性和氧化損傷的聯(lián)合作用
            2.6 AFB_1和DON對細胞凋亡的聯(lián)合作用
            2.7 試驗數(shù)據(jù)處理
        3 結(jié)果與分析
            3.1 不同霉菌毒素對BRL細胞毒性、細胞膜損傷、氧化損傷和細胞凋亡的影響
            3.2 四種霉菌毒素二元和三元混合的聯(lián)合作用類型
            3.3 AFB_1與DON對BRL細胞的聯(lián)合作用機理
        4 小結(jié)
第三章 四種霉菌毒素對Balb/C小鼠的聯(lián)合毒性
    1 材料與方法
        1.1 試驗動物
        1.2 霉菌毒素溶液的配置
        1.3 試驗設(shè)計
        1.4 采樣及分析方法
        1.5 數(shù)據(jù)處理
    2 結(jié)果與分析
        2.1 對日采食量和體重的影響
        2.2 對器官指數(shù)的影響
        2.3 對血液生化指標的影響
        2.5 對小鼠肝臟MDA、T-AOC和SOD含量及HSP70蛋白表達的影響
        2.6 對脾臟IL-1β,IL-6和TNF-α mRNA表達量的影響
        2.7 對小鼠肝臟細胞凋亡的影響
    3 小結(jié)
第四章 討論
    1 不同霉菌毒素對肝細胞和腎細胞的毒性作用
    2 霉菌毒素聯(lián)合對肝細胞的影響
    3 霉菌毒素聯(lián)合對腎細胞的影響
    4 霉菌毒素聯(lián)合對小鼠臟器損傷的影響
    5 霉菌毒素聯(lián)合對小鼠免疫功能的影響
    6 霉菌毒素聯(lián)合作用對小鼠生長和采食量的影響
第五章 結(jié)論與展望
參考文獻
附錄 在讀期間發(fā)表的論文情況
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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[3]葡甘聚糖復(fù)合吸附劑對肉雞飼料中霉菌毒素混合污染的脫毒研究[D]. 徐雪梅.華中農(nóng)業(yè)大學 2008
[4]四川地區(qū)主要飼料霉菌毒素分布規(guī)律的研究[D]. 楊曉飛.四川農(nóng)業(yè)大學 2007



本文編號：3468860